白花前胡对麻醉开胸猫急性心肌梗塞的影响
作者：常天辉 陈磊 姜明燕 王玉萍
单位：常天辉(中国医科大学基础医学院临床药理学教研室, 沈阳110001)；陈磊(中国医科大学基础医学院临床药理学教研室, 沈阳110001)；姜明燕(中国医科大学第一临床医院药剂科)；王玉萍(中国医科大学基础医学院药理学教研室)
关键词：白花前胡；中药；急性心肌梗塞；乳酸脱氢酶；肌酸激酶；心外膜电图
中国医科大学学报000202 摘要 目的：观察中药白花前胡对急性心肌梗塞(AMI)的影响。方法：用结扎麻醉开胸猫左冠状动脉前降支诱发AMI模型，于结扎后10 min经12指肠给药，做冠脉循环及心脏血流动力学,心肌耗氧量,心外膜电图，血清酶活性，组织N-BT染色以及AMI程度(Σ-ST)和范围(N-ST)等检测。结果：白花前胡醇提物增加冠脉流量，降低冠脉阻力、左室压、左室舒张末压、左室最大上升速率、心率、心肌耗氧量、心肌氧摄取率和率压积。给药(0.2 g/kg)后1 h,血清乳酸脱氢酶和心肌MB型肌酸激酶的变化率，由对照组的(61.1±12.8)%和(191.1±225.2)%，分别降至(9.1±44.6)%，P<0.05和(-1.5±87.2)%；Σ-ST和N-ST由(34.7±41.2)%和(53.6±8.6)%，分别降至(-19.0±15.4)%，P<0.05和(22.2±4.3)%，P<0.01；给药后5 h，左室梗塞率由(23.6±6.7)%，减至(15.0±5.7)%，P<0.05。结论：中药白花前胡有抗急性心肌梗塞作用。
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Effects of Peucedanum praeruptorum Dunn, A Traditional Chinese Medicine on
Acute Myocradial Infarction in Open-chest Anesthetized Cats
Chang Tianhui, Chen Lei, Jiang Mingyan, Wang Yuping
(Department of Clinical Pharmacology, College of Basic Medical Sciences, China Medical Universyty, Shenyang, 110001)
ABSTRACT Objective: To investgate the effects of ethanol extract of Peucedanum praeruptorum Dunn, a traditional Chineses medicinal herb,on acute myocardial infarction(AMI). Methods:Epicardial electrogram,serumal enzymatic assay and histological NBT-staining technique were used in open-chest urethane anesthetized cats subjected to a 5 h-occlusion of the left anterior descending coronary artery. Results:Intraduodenal administration of drug(0.2 g/kg) at 10 min after ligation resulted in a marked increase in CSF,and decreases in CR,BP,LVP,LVEDP,+LV dp/dtmax,MCO2,MTO2,RPP and HR. After 1 h of the administration of the drug(0.2 g/kg),LDH and CK-MB decreased to(9.1±44.6)% and(-1.5±87.2)%,from (61.1±12.8)% and (191.1±225.2)%,respectively(P<0.05);the severity(Σ-ST) and the exten(N-ST) of AMI decreased to (-12.6±4.5)%,and (22.2±4.3)%,P<0.01 from(34.7±41.2)% and (53.6±8.6)%，respectively(P<0.5)；the percentage of left ventricular infarction deceased to (15.0±5.7)%,from (23.6±6.7)% 5 h after the drug(P<0.05). Conclusion:Peucedanum praeruptorum Dunn shoved a marked cardioprotective effect in AMI-cats.
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KEY WORDS Peucedanum praeruptorum Dunn;Traditional Chinese Medicine;acute myocardial infaraction;lactate dehydrogenase;creatine kinase;epicardial electrogran
白花前胡(Peucedanum praeruptorum Dunn.)及其香豆素成分Pd-Ia(3′-当归酰氧-4′-乙酰氧基-3′，4′-又氢邪蒿内酯)可增加冠脉和心肌营养性血流量，扩血管，降压，并有抗心肌缺血及抗心律失常等作用。Pd-Ia为Ca2+内流阻滞剂和K+通道开放剂，在不影响心率，血压及心肌收缩功能条件下，有改善顿抑心肌(stunned myocardium)局部收缩功能作用[1～8]。本文用整体麻醉开胸猫急性心肌梗塞(AMI)模型，观察白花胡的抗AMI作用，进行心外膜电图、血清酶活性以及AMI程度和范围等研究。
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1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 药物：白花前胡乙醇提取物(EP)，3.75 g(折生药)/g，本室制。盐酸维拉帕米(Ver),40 mg/片，天津市中央制药厂生产，批号：941102；普萘洛尔(Pro)，东北制药厂生产，批号：891000。
1.1.2 动物：健康成年杂种家猫72只，雌雄兼用，体重2.5～4.2 kg，中国医科大学实验动物部提供。
1.2 实验方法
1.2.1 分组：按性别体重随机分4组，即①空白对照组(H2O 5 mg/只)，②EP小剂量组(0.2 g/kg)，③EP大剂量组(1.0 g/kg)，④阳性药对照组(Ver或Pro)，每组动物数6或12只。
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1.2.2 心脏血流动力学及心肌耗氧量测定[9，10]：将猫麻醉(乌拉坦1 g/kg,ip)、固定后，分别做颈总动脉，颈外静脉，气管插管及12指肠插管，供采血，测BP，体外循环回路，人工呼吸(频率50 bpm,呼吸量30 ml)及给药用。开胸暴露心脏，用冠状窦插管和电磁流量计(MF-27型，日本光电)探头构筑体外循环通路以测冠状窦流量(CSF)；行左心尖插管，用多导仪(RM-6000，日本光电)连续同步记录血压(BP)，左室压(LVP)，左室舒张末压(LVEDP)及其微分(左室最大上升速率，dp/dtmax)，标准II导ECG和心率(HR)；给药前及给药后1 h分别抽取动脉血管冠状窦血，以血气分析仪(AVL990型，美国)测血氧含量。实验结束后逆流经冠状窦插管灌入台盼蓝染色液，然后切下全心，将左室及蓝染区分别称重，按公式计算心肌耗氧量(MCO2)、心肌氧摄取率(MTO2)和率压积(RPP)。待各指标稳定后记录给药前值并给药，于给药后30、60、120和180 min再次记录，并且每次记录前，各指标均应稳定至少30 min。因受动物、仪器、采样、测定等诸多因素干扰影响，各组给药前指标的误差较大，故以给药前后变化率进行统计学处理。
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1.2.3 心外膜电图，血清酶活性及AMI程度和范围的测定：于左冠脉前降支第一和第二分支间主干穿两线(暂不结扎)，在结扎线以下用紫药水依次作12个前壁心外膜电极标记点，结扎线以上也标记一点做对照电极。以浸泡有饱和aCl溶液的棉线灯芯和银丝作探查电极；用ECG放大器胸前导联描记各点药前心外膜电图(定标10 mm=1 mV)，每次标测前用生理盐水湿润心外膜表面。双重结扎冠脉10 min后，记录BP、HR等指标并给药。阳性药选Pro，记录给药后30、60、120、180及300 min的心外膜电图，并计算AMI程度(结扎前后Σ-ST差会晤)及缺血范围(即N-ST差值，N-ST为ST升高≥2 mV)电极数)。另于结扎前和给药后1和5 h分别采血，用全自动系列化分析仪(7150型，日本日立)测血清乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酸激酶(CK)及其同功酶CK-MB(心肌型)的活性。给药后5 h取心称重，在结扎线以下平行冠状沟将左室切成4片，置0.1%硝基四唑蓝(N-BT)液内(Tris液配制，pH7.4～7.6)，于37℃恒温水浴下染色5-7 min，剪去蓝染心肌(梗塞区不染色)，计算梗塞区占全心和左室的重量百分比。
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2 结果
2.1 心脏血流动力学实验
2.1.1 对BP、HR及ECG的影响：给EP后30 min，BP和HR均有不同程度降低，持续180 min以上，未见剂量依赖关系，例如大剂量组(1.0 g/kg)使收缩压(SBP)由(15.1±3.3)kPa，降至(11.9±4.9)kPa，下降(23.6±16.4%)，与对照组比较，P<0.05；HR减慢(35.5±22.7)%，与给药前及对照组比较，P<0.05；Ver作用较强，但各组ECG均无明显改变。
2.1.2 对CSF及冠脉阻力(CR)的影响：给EP后30 min，CSF增加，CR降低，持续120 min以上，未见剂量依赖关系，例如大剂量组使CSF由(9.3±4.0)ml/min，增至(14.0±7.1)ml/min，变化率为(46.8±15.0)%，与对照组比较，P<0.01；CR降低(38.4±9.3)%，P<0.01，Ver作用最强(表1)。
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表1 给白花前胡醇提物后60 min对CSF及CR的影响
Table 1 Effects of EP on CSF and CR 60 min
after drugs(
±s，n=6) 组别
剂量(g/kg)
CSF(ml/min)
CR(kPa.min/ml)
H2O
—
药前
, 百拇医药
4.7±0.6
1.3± 0.4
药后
4.5±0.7
1.1± 0.4
±%
-4.3±0.6
-12.0± 4.9
Ver
0.007
药前
10.8±4.1
, http://www.100md.com 1.0± 0.4
药后
14.3±5.0
0.5± 0.2Δ
±%
48.5±5.7**
-51.8±12.5**
EP
0.2
药前
8.0±6.9
1.8± 1.1
, 百拇医药
药后
10.3±6.7
0.7± 0.3
±%
45.8±31.5*
-48.4±25.9*
1.0
药前
9.3±4.0
1.1± 0.6
药后
14.0±7.1
, http://www.100md.com
0.7± 0.6
±%
46.8±15.0**
—38.4± 9.3**
与给药前比较Δ P<0.05；与对照组比较* P<0.05，** P<0.01
2.1.3 对LVP、LVEDP及dp/dtmax影响：给EP后30 min，LVP、LVEDP及dp/dtmax明显降低，持续120 min以上，似有剂量依赖关系，例如大剂量组使3项指标分别下降(53.1±30.9)%，P<0.05，(25.6±18.3)%，P<0.01及(30.1±4.1)%，P<0.01；Ver与大剂量组作用类似。
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2.1.4 对心肌耗氧量(MCO2)、心肌氧摄取率(MTO2)和率压积(RPP)的影响：给EP后60 min，明显降低MCO2和RPP，未见剂量依赖关系，例如小剂量组分别使两指标变化率由对照组的(118.7±10.3)%和(-21.5±24.1)%，降至(79.0±10.5)%，P<0.01和(-46.6±17.5)%；而Ver降低MCO2的作用最强(表2)。
表2 给白花前胡醇提物药后60 min对MCO2、MTO2及RPP影响
Table 2 Effects of EP on MCO2、MTO2 and RPP 60 min after drugs(±s，n=6) 组别
, 百拇医药
剂量(g/kg)
检测时间
MCO2 ml(100 g.min-1
MTO2(%)
RPP(×103 bpm.kPa)
H2O
—
药前
20.1± 6.7
23.3± 10.6
, 百拇医药
6.4± 1.0
药后
40.0±14.9Δ
44.5± 14.7Δ
5.2± 2.1
±%
118.7±10.3
118.5±103.8
-21.5±24.1
Ver
0.007
药前
, 百拇医药
56.8±49.6
29.4± 17.5
14.9± 7.5
药后
74.1± 2.2
59.5± 15.7Δ
5.3± 2.5Δ
±%
49.9±12.2**
128.9± 76.2
-58.8±27.3*
, 百拇医药
EP
0.2
药前
41.1± 4.6
43.9± 12.4
13.9± 1.8
药后
68.8±40.4
67.0± 28.3
7.5± 3.0ΔΔ
±%
79.0±10.5**
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23.1± 47.8
-46.6±17.5
0.1
药前
85.3±58.8
48.8± 19.4
12.4± 7.7
药后
159.7±90.7
57.8± 22.9
6.5± 5.5
±%
, 百拇医药
106.3±58.4
48.8± 28.2
-62.2± 8.1**
与给药前比较Δ P<0.05，ΔΔ P<0.01；与对照组比较* P<0.05，** P<0.01
2.2 对心外膜电图影响
2.2.1 对AMI程度(Σ-ST)的影响：给药后1和5 h,EP小、大两种剂量及Pro组有明显减轻AMI程度(Σ-ST)的作用，未见剂量依赖关系，例如给药后1 h，由对照组的(34.7±41.2)%，分别降至(-12.6±4.5)%，(-11.9±8.2)%和(-19.0±15.4%)，均P<0.05；给药后5 h作用明显增强(表3)。
, 百拇医药
2.2.2 对AMI范围(N-ST)的影响：各给药组均有缩小AMI范围(N-ST)的作用，例如给药后1 h，EP小、大两种剂量及Pro组变化率，由原来的(53.6±8.6)%，分别降至(22.2±4.3)%，(-20.6±18.0)%及(-26.1±6.7)%，均P<0.01，持续近5 h(P<0.01)，似有剂量依赖关系(表4)。
表3 白花前胡醇提物对AMI程度(Σ-ST)的影响
Table 3 Effects of EP on the severity of AMI(Σ-ST；±s mV，n=12) 组别
剂量(g/kg)
给药前
给药后1 h
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±%
给药后5 h
±%
H2O
—
30.8±9.0
39.2±5.4
34.7±41.2
42.2±5.4Δ
42.2±26.5
Pro
0.007
, 百拇医药
36.8±4.0
30.2±8.8
-19.0±15.4*
28.2±5.8**
-23.5± 9.7**
EP
0.2
37.0±4.4
32.4±3.2*
-12.6± 4.5*
32.6±4.4**
, 百拇医药
-11.0± 7.2**
0.1
37.6±6.2
32.8±3.0*
-11.9± 8.2*
37.4±5.2
2.2± 2.9*
与给药前比较ΔP<0.05；* P<0.05，与对照组比较** P<0.01
2.3 对AMI范围的组织学测定 用N-BT染色组织学定量方法显示的AMI范围，与心外膜电图所测结果一致，EP小、大两剂量组和Pro组均有明显减少AMI范围作用，左室梗塞率由对照组的(23.6±6.7)%，分别减至(15.0±5.7)%，P<0.05，(13.9±6.7)%，P<0.05及(12.9±3.9)%，P<0.01(表5)。(9.1±44.6)%，P<0.05和(-1.5±87.2)%；EP大剂量组和Pro组对CK-MB和LDH作用较强(表6)。
, 百拇医药
表4 白药前胡醇提物对AMI范围(N-ST)影响
Table 4 Effects of EP on the extent of AMI(N-ST;±s mV，n=12) 组别
剂量(g/kg)
给药前
给药后1 h
±%
给药后5 h
±%
H2O
—
, 百拇医药
8.7±5.0
10.7±1.2
53.6± 8.6
10.7±2.3
57.1± 8.5
Pro
0.007
10.0±1.0
6.0±3.5*
-26.1± 6.7**
6.7±4.2
, 百拇医药 -19.4±17.4**
EP
0.2
8.0±2.0
9.3±1.2
22.2± 4.3**
8.7±1.3
11.1± 2.7**
0.1
12.0±2.0
9.3±1.2
, 百拇医药 -20.6±18.0**
11.3±3.1
-2.5± 3.8**
与对照组比较*P<0.05，** P<0.01
2.4 对血清酶活性的影响 EP和Por有明显降低LDH，AST及CK-MB活性的趋势，例如给药后1 h，小剂量组使LDH和CK-MB的变化率，由对照组的(61.1±12.8)%和(191.1±225.2)%，分别降至
表5 白花前胡醇提物对AMI范围的影响
Table 5 Effects of EP on extent of AMI(±s %, n=6) 组别
, 百拇医药
剂量(g/kg)
梗塞区/全心
梗塞区/左室
H2O
—
15.3±8.7
23.6±6.7
Pro
0.007
8.2±2.2
12.9±3.9**
EP
, 百拇医药
0.2
10.2±3.7
15.0±5.7*
1.0
9.6±5.6
13.9±6.7*
与对照组比较 * P<0.05, ** P<0.01表6 白花前胡醇提物对AMI期间某些血清酶活性的影响
Table 6 Effects of EP on serumal enzymatic activities of LDH，AST，CK and CK-MB
, 百拇医药 (±s ，IU/L, n=6) 组别
剂量(g/kg)
检测时间
LDH
AST
CK
CK-M
H2O
—
药前
594.0±175.0
, 百拇医药
226.0±244
1 768.0±2 159
217.0±230
药后
943.0±219Δ
295.0±175
2 877.0±2 357
639.0±20ΔΔ
±%
61.1±12.8
251.8±397.9
, 百拇医药
137.8±94.2
191.1±225.2
Pro
0.007
药前
883.0±566
172.0±93
2 435.0±2 886
520.0±454
药后
795.0±549
204.0±126
, http://www.100md.com
2 647.0±2 349
523.0±297
±%
-12.4±6.2**
13.0±16.6
44.8±47.3
22.2±49.6
EP
0.2
药前
481.0±286
155.0±164
, 百拇医药
696.0±275
434.0±156
药后
440.0±128
187.0±155
1 792.0±931Δ
298.0±135
±%
9.1±44.6*
43.9±36.8
145.2±46.7
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-1.5±87.2
1.0
药前
258.0±177
89.0±52
460.0±206
273.0±85
药后
287.0±88
94.0±47
1 065.0±379ΔΔ
74.0±94ΔΔ
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±%
32.6±46.8
9.5±10.1
139.4±30.0
75.0±32.5*
与给药前比较Δ P<0.05, ΔΔ P<0.01; 与对照组比较* P<0.05, ** P<0.01
3 讨论
本实验证明,经12指肠给药,EP增加麻醉猫CSF，降低CR、BP、LVP、LVEDP及+LV dp/dtmax，减少MCO2、MTO2、RPP及HR，有与Ca2+通道阻断剂Ver相似的作用(但强度较弱),证明Pd-Ia及其源植物EP有抗心肌缺血和/或抗心绞痛活性。
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闭塞冠脉10 min后给EP(0.2～1.0 g/kg),5 h内明显减少AMI的程度和范围；降低LDH和CK-MB活性,提示该药有较好抗AMI作用。目前,阻止细胞内Ca2+超载,激活细胞膜ATP敏感性K+通道(KATP)等，对心肌缺血/再灌注损伤(I/R)的保护作用日益受到重视。已知KATP能显著减轻I/R,改善再灌后心肌功能[11],抑制I/R时白细胞介导的氧自由基产生并减少自由脂肪酸等有害代谢物形成[12]，EP的有效成分Pd-Ia为Ca2+内流阻滞剂和KATP开放剂,这也许是EP抗AMI的机制所在，但与非选择性β受体阻断剂Pro的作用类似,提示肾上腺素能神经也可能介入调理之中,值得继续深入研究。
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(1999-09-07收稿), http://www.100md.com
单位：常天辉(中国医科大学基础医学院临床药理学教研室, 沈阳110001)；陈磊(中国医科大学基础医学院临床药理学教研室, 沈阳110001)；姜明燕(中国医科大学第一临床医院药剂科)；王玉萍(中国医科大学基础医学院药理学教研室)
关键词：白花前胡；中药；急性心肌梗塞；乳酸脱氢酶；肌酸激酶；心外膜电图
中国医科大学学报000202 摘要 目的：观察中药白花前胡对急性心肌梗塞(AMI)的影响。方法：用结扎麻醉开胸猫左冠状动脉前降支诱发AMI模型，于结扎后10 min经12指肠给药，做冠脉循环及心脏血流动力学,心肌耗氧量,心外膜电图，血清酶活性，组织N-BT染色以及AMI程度(Σ-ST)和范围(N-ST)等检测。结果：白花前胡醇提物增加冠脉流量，降低冠脉阻力、左室压、左室舒张末压、左室最大上升速率、心率、心肌耗氧量、心肌氧摄取率和率压积。给药(0.2 g/kg)后1 h,血清乳酸脱氢酶和心肌MB型肌酸激酶的变化率，由对照组的(61.1±12.8)%和(191.1±225.2)%，分别降至(9.1±44.6)%，P<0.05和(-1.5±87.2)%；Σ-ST和N-ST由(34.7±41.2)%和(53.6±8.6)%，分别降至(-19.0±15.4)%，P<0.05和(22.2±4.3)%，P<0.01；给药后5 h，左室梗塞率由(23.6±6.7)%，减至(15.0±5.7)%，P<0.05。结论：中药白花前胡有抗急性心肌梗塞作用。
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Effects of Peucedanum praeruptorum Dunn, A Traditional Chinese Medicine on
Acute Myocradial Infarction in Open-chest Anesthetized Cats
Chang Tianhui, Chen Lei, Jiang Mingyan, Wang Yuping
(Department of Clinical Pharmacology, College of Basic Medical Sciences, China Medical Universyty, Shenyang, 110001)
ABSTRACT Objective: To investgate the effects of ethanol extract of Peucedanum praeruptorum Dunn, a traditional Chineses medicinal herb,on acute myocardial infarction(AMI). Methods:Epicardial electrogram,serumal enzymatic assay and histological NBT-staining technique were used in open-chest urethane anesthetized cats subjected to a 5 h-occlusion of the left anterior descending coronary artery. Results:Intraduodenal administration of drug(0.2 g/kg) at 10 min after ligation resulted in a marked increase in CSF,and decreases in CR,BP,LVP,LVEDP,+LV dp/dtmax,MCO2,MTO2,RPP and HR. After 1 h of the administration of the drug(0.2 g/kg),LDH and CK-MB decreased to(9.1±44.6)% and(-1.5±87.2)%,from (61.1±12.8)% and (191.1±225.2)%,respectively(P<0.05);the severity(Σ-ST) and the exten(N-ST) of AMI decreased to (-12.6±4.5)%,and (22.2±4.3)%,P<0.01 from(34.7±41.2)% and (53.6±8.6)%，respectively(P<0.5)；the percentage of left ventricular infarction deceased to (15.0±5.7)%,from (23.6±6.7)% 5 h after the drug(P<0.05). Conclusion:Peucedanum praeruptorum Dunn shoved a marked cardioprotective effect in AMI-cats.
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KEY WORDS Peucedanum praeruptorum Dunn;Traditional Chinese Medicine;acute myocardial infaraction;lactate dehydrogenase;creatine kinase;epicardial electrogran
白花前胡(Peucedanum praeruptorum Dunn.)及其香豆素成分Pd-Ia(3′-当归酰氧-4′-乙酰氧基-3′，4′-又氢邪蒿内酯)可增加冠脉和心肌营养性血流量，扩血管，降压，并有抗心肌缺血及抗心律失常等作用。Pd-Ia为Ca2+内流阻滞剂和K+通道开放剂，在不影响心率，血压及心肌收缩功能条件下，有改善顿抑心肌(stunned myocardium)局部收缩功能作用[1～8]。本文用整体麻醉开胸猫急性心肌梗塞(AMI)模型，观察白花胡的抗AMI作用，进行心外膜电图、血清酶活性以及AMI程度和范围等研究。
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1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 药物：白花前胡乙醇提取物(EP)，3.75 g(折生药)/g，本室制。盐酸维拉帕米(Ver),40 mg/片，天津市中央制药厂生产，批号：941102；普萘洛尔(Pro)，东北制药厂生产，批号：891000。
1.1.2 动物：健康成年杂种家猫72只，雌雄兼用，体重2.5～4.2 kg，中国医科大学实验动物部提供。
1.2 实验方法
1.2.1 分组：按性别体重随机分4组，即①空白对照组(H2O 5 mg/只)，②EP小剂量组(0.2 g/kg)，③EP大剂量组(1.0 g/kg)，④阳性药对照组(Ver或Pro)，每组动物数6或12只。
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1.2.2 心脏血流动力学及心肌耗氧量测定[9，10]：将猫麻醉(乌拉坦1 g/kg,ip)、固定后，分别做颈总动脉，颈外静脉，气管插管及12指肠插管，供采血，测BP，体外循环回路，人工呼吸(频率50 bpm,呼吸量30 ml)及给药用。开胸暴露心脏，用冠状窦插管和电磁流量计(MF-27型，日本光电)探头构筑体外循环通路以测冠状窦流量(CSF)；行左心尖插管，用多导仪(RM-6000，日本光电)连续同步记录血压(BP)，左室压(LVP)，左室舒张末压(LVEDP)及其微分(左室最大上升速率，dp/dtmax)，标准II导ECG和心率(HR)；给药前及给药后1 h分别抽取动脉血管冠状窦血，以血气分析仪(AVL990型，美国)测血氧含量。实验结束后逆流经冠状窦插管灌入台盼蓝染色液，然后切下全心，将左室及蓝染区分别称重，按公式计算心肌耗氧量(MCO2)、心肌氧摄取率(MTO2)和率压积(RPP)。待各指标稳定后记录给药前值并给药，于给药后30、60、120和180 min再次记录，并且每次记录前，各指标均应稳定至少30 min。因受动物、仪器、采样、测定等诸多因素干扰影响，各组给药前指标的误差较大，故以给药前后变化率进行统计学处理。
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1.2.3 心外膜电图，血清酶活性及AMI程度和范围的测定：于左冠脉前降支第一和第二分支间主干穿两线(暂不结扎)，在结扎线以下用紫药水依次作12个前壁心外膜电极标记点，结扎线以上也标记一点做对照电极。以浸泡有饱和aCl溶液的棉线灯芯和银丝作探查电极；用ECG放大器胸前导联描记各点药前心外膜电图(定标10 mm=1 mV)，每次标测前用生理盐水湿润心外膜表面。双重结扎冠脉10 min后，记录BP、HR等指标并给药。阳性药选Pro，记录给药后30、60、120、180及300 min的心外膜电图，并计算AMI程度(结扎前后Σ-ST差会晤)及缺血范围(即N-ST差值，N-ST为ST升高≥2 mV)电极数)。另于结扎前和给药后1和5 h分别采血，用全自动系列化分析仪(7150型，日本日立)测血清乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酸激酶(CK)及其同功酶CK-MB(心肌型)的活性。给药后5 h取心称重，在结扎线以下平行冠状沟将左室切成4片，置0.1%硝基四唑蓝(N-BT)液内(Tris液配制，pH7.4～7.6)，于37℃恒温水浴下染色5-7 min，剪去蓝染心肌(梗塞区不染色)，计算梗塞区占全心和左室的重量百分比。
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2 结果
2.1 心脏血流动力学实验
2.1.1 对BP、HR及ECG的影响：给EP后30 min，BP和HR均有不同程度降低，持续180 min以上，未见剂量依赖关系，例如大剂量组(1.0 g/kg)使收缩压(SBP)由(15.1±3.3)kPa，降至(11.9±4.9)kPa，下降(23.6±16.4%)，与对照组比较，P<0.05；HR减慢(35.5±22.7)%，与给药前及对照组比较，P<0.05；Ver作用较强，但各组ECG均无明显改变。
2.1.2 对CSF及冠脉阻力(CR)的影响：给EP后30 min，CSF增加，CR降低，持续120 min以上，未见剂量依赖关系，例如大剂量组使CSF由(9.3±4.0)ml/min，增至(14.0±7.1)ml/min，变化率为(46.8±15.0)%，与对照组比较，P<0.01；CR降低(38.4±9.3)%，P<0.01，Ver作用最强(表1)。
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表1 给白花前胡醇提物后60 min对CSF及CR的影响
Table 1 Effects of EP on CSF and CR 60 min
after drugs(
±s，n=6) 组别剂量(g/kg)
CSF(ml/min)
CR(kPa.min/ml)
H2O
—
药前
, 百拇医药
4.7±0.6
1.3± 0.4
药后
4.5±0.7
1.1± 0.4
±%
-4.3±0.6
-12.0± 4.9
Ver
0.007
药前
10.8±4.1
, http://www.100md.com 1.0± 0.4
药后
14.3±5.0
0.5± 0.2Δ
±%
48.5±5.7**
-51.8±12.5**
EP
0.2
药前
8.0±6.9
1.8± 1.1
, 百拇医药
药后
10.3±6.7
0.7± 0.3
±%
45.8±31.5*
-48.4±25.9*
1.0
药前
9.3±4.0
1.1± 0.6
药后
14.0±7.1
, http://www.100md.com
0.7± 0.6
±%
46.8±15.0**
—38.4± 9.3**
与给药前比较Δ P<0.05；与对照组比较* P<0.05，** P<0.01
2.1.3 对LVP、LVEDP及dp/dtmax影响：给EP后30 min，LVP、LVEDP及dp/dtmax明显降低，持续120 min以上，似有剂量依赖关系，例如大剂量组使3项指标分别下降(53.1±30.9)%，P<0.05，(25.6±18.3)%，P<0.01及(30.1±4.1)%，P<0.01；Ver与大剂量组作用类似。
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2.1.4 对心肌耗氧量(MCO2)、心肌氧摄取率(MTO2)和率压积(RPP)的影响：给EP后60 min，明显降低MCO2和RPP，未见剂量依赖关系，例如小剂量组分别使两指标变化率由对照组的(118.7±10.3)%和(-21.5±24.1)%，降至(79.0±10.5)%，P<0.01和(-46.6±17.5)%；而Ver降低MCO2的作用最强(表2)。
表2 给白花前胡醇提物药后60 min对MCO2、MTO2及RPP影响
Table 2 Effects of EP on MCO2、MTO2 and RPP 60 min after drugs(
±s，n=6) 组别, 百拇医药
剂量(g/kg)
检测时间
MCO2 ml(100 g.min-1
MTO2(%)
RPP(×103 bpm.kPa)
H2O
—
药前
20.1± 6.7
23.3± 10.6
, 百拇医药
6.4± 1.0
药后
40.0±14.9Δ
44.5± 14.7Δ
5.2± 2.1
±%
118.7±10.3
118.5±103.8
-21.5±24.1
Ver
0.007
药前
, 百拇医药
56.8±49.6
29.4± 17.5
14.9± 7.5
药后
74.1± 2.2
59.5± 15.7Δ
5.3± 2.5Δ
±%
49.9±12.2**
128.9± 76.2
-58.8±27.3*
, 百拇医药
EP
0.2
药前
41.1± 4.6
43.9± 12.4
13.9± 1.8
药后
68.8±40.4
67.0± 28.3
7.5± 3.0ΔΔ
±%
79.0±10.5**
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23.1± 47.8
-46.6±17.5
0.1
药前
85.3±58.8
48.8± 19.4
12.4± 7.7
药后
159.7±90.7
57.8± 22.9
6.5± 5.5
±%
, 百拇医药
106.3±58.4
48.8± 28.2
-62.2± 8.1**
与给药前比较Δ P<0.05，ΔΔ P<0.01；与对照组比较* P<0.05，** P<0.01
2.2 对心外膜电图影响
2.2.1 对AMI程度(Σ-ST)的影响：给药后1和5 h,EP小、大两种剂量及Pro组有明显减轻AMI程度(Σ-ST)的作用，未见剂量依赖关系，例如给药后1 h，由对照组的(34.7±41.2)%，分别降至(-12.6±4.5)%，(-11.9±8.2)%和(-19.0±15.4%)，均P<0.05；给药后5 h作用明显增强(表3)。
, 百拇医药
2.2.2 对AMI范围(N-ST)的影响：各给药组均有缩小AMI范围(N-ST)的作用，例如给药后1 h，EP小、大两种剂量及Pro组变化率，由原来的(53.6±8.6)%，分别降至(22.2±4.3)%，(-20.6±18.0)%及(-26.1±6.7)%，均P<0.01，持续近5 h(P<0.01)，似有剂量依赖关系(表4)。
表3 白花前胡醇提物对AMI程度(Σ-ST)的影响
Table 3 Effects of EP on the severity of AMI(Σ-ST；
±s mV，n=12) 组别剂量(g/kg)
给药前
给药后1 h
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±%
给药后5 h
±%
H2O
—
30.8±9.0
39.2±5.4
34.7±41.2
42.2±5.4Δ
42.2±26.5
Pro
0.007
, 百拇医药
36.8±4.0
30.2±8.8
-19.0±15.4*
28.2±5.8**
-23.5± 9.7**
EP
0.2
37.0±4.4
32.4±3.2*
-12.6± 4.5*
32.6±4.4**
, 百拇医药
-11.0± 7.2**
0.1
37.6±6.2
32.8±3.0*
-11.9± 8.2*
37.4±5.2
2.2± 2.9*
与给药前比较ΔP<0.05；* P<0.05，与对照组比较** P<0.01
2.3 对AMI范围的组织学测定 用N-BT染色组织学定量方法显示的AMI范围，与心外膜电图所测结果一致，EP小、大两剂量组和Pro组均有明显减少AMI范围作用，左室梗塞率由对照组的(23.6±6.7)%，分别减至(15.0±5.7)%，P<0.05，(13.9±6.7)%，P<0.05及(12.9±3.9)%，P<0.01(表5)。(9.1±44.6)%，P<0.05和(-1.5±87.2)%；EP大剂量组和Pro组对CK-MB和LDH作用较强(表6)。
, 百拇医药
表4 白药前胡醇提物对AMI范围(N-ST)影响
Table 4 Effects of EP on the extent of AMI(N-ST;
±s mV，n=12) 组别剂量(g/kg)
给药前
给药后1 h
±%
给药后5 h
±%
H2O
—
, 百拇医药
8.7±5.0
10.7±1.2
53.6± 8.6
10.7±2.3
57.1± 8.5
Pro
0.007
10.0±1.0
6.0±3.5*
-26.1± 6.7**
6.7±4.2
, 百拇医药 -19.4±17.4**
EP
0.2
8.0±2.0
9.3±1.2
22.2± 4.3**
8.7±1.3
11.1± 2.7**
0.1
12.0±2.0
9.3±1.2
, 百拇医药 -20.6±18.0**
11.3±3.1
-2.5± 3.8**
与对照组比较*P<0.05，** P<0.01
2.4 对血清酶活性的影响 EP和Por有明显降低LDH，AST及CK-MB活性的趋势，例如给药后1 h，小剂量组使LDH和CK-MB的变化率，由对照组的(61.1±12.8)%和(191.1±225.2)%，分别降至
表5 白花前胡醇提物对AMI范围的影响
Table 5 Effects of EP on extent of AMI(
±s %, n=6) 组别, 百拇医药
剂量(g/kg)
梗塞区/全心
梗塞区/左室
H2O
—
15.3±8.7
23.6±6.7
Pro
0.007
8.2±2.2
12.9±3.9**
EP
, 百拇医药
0.2
10.2±3.7
15.0±5.7*
1.0
9.6±5.6
13.9±6.7*
与对照组比较 * P<0.05, ** P<0.01表6 白花前胡醇提物对AMI期间某些血清酶活性的影响
Table 6 Effects of EP on serumal enzymatic activities of LDH，AST，CK and CK-MB
, 百拇医药 (
±s ，IU/L, n=6) 组别剂量(g/kg)
检测时间
LDH
AST
CK
CK-M
H2O
—
药前
594.0±175.0
, 百拇医药
226.0±244
1 768.0±2 159
217.0±230
药后
943.0±219Δ
295.0±175
2 877.0±2 357
639.0±20ΔΔ
±%
61.1±12.8
251.8±397.9
, 百拇医药
137.8±94.2
191.1±225.2
Pro
0.007
药前
883.0±566
172.0±93
2 435.0±2 886
520.0±454
药后
795.0±549
204.0±126
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2 647.0±2 349
523.0±297
±%
-12.4±6.2**
13.0±16.6
44.8±47.3
22.2±49.6
EP
0.2
药前
481.0±286
155.0±164
, 百拇医药
696.0±275
434.0±156
药后
440.0±128
187.0±155
1 792.0±931Δ
298.0±135
±%
9.1±44.6*
43.9±36.8
145.2±46.7
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-1.5±87.2
1.0
药前
258.0±177
89.0±52
460.0±206
273.0±85
药后
287.0±88
94.0±47
1 065.0±379ΔΔ
74.0±94ΔΔ
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±%
32.6±46.8
9.5±10.1
139.4±30.0
75.0±32.5*
与给药前比较Δ P<0.05, ΔΔ P<0.01; 与对照组比较* P<0.05, ** P<0.01
3 讨论
本实验证明,经12指肠给药,EP增加麻醉猫CSF，降低CR、BP、LVP、LVEDP及+LV dp/dtmax，减少MCO2、MTO2、RPP及HR，有与Ca2+通道阻断剂Ver相似的作用(但强度较弱),证明Pd-Ia及其源植物EP有抗心肌缺血和/或抗心绞痛活性。
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闭塞冠脉10 min后给EP(0.2～1.0 g/kg),5 h内明显减少AMI的程度和范围；降低LDH和CK-MB活性,提示该药有较好抗AMI作用。目前,阻止细胞内Ca2+超载,激活细胞膜ATP敏感性K+通道(KATP)等，对心肌缺血/再灌注损伤(I/R)的保护作用日益受到重视。已知KATP能显著减轻I/R,改善再灌后心肌功能[11],抑制I/R时白细胞介导的氧自由基产生并减少自由脂肪酸等有害代谢物形成[12]，EP的有效成分Pd-Ia为Ca2+内流阻滞剂和KATP开放剂,这也许是EP抗AMI的机制所在，但与非选择性β受体阻断剂Pro的作用类似,提示肾上腺素能神经也可能介入调理之中,值得继续深入研究。
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