He-Ne激光照射对离体人外周血淋巴细胞产生微核的影响
作者：周宏治 廖映枌 彭秀琼 段丹丽 陈真武 黄勇
单位：周宏治(四川教育学院生物系，成都市,610041)；廖映枌(四川教育学院生物系，成都市,610041)；彭秀琼(华西医科大学附属第二医院)；段丹丽(四川省肿瘤医院)；陈真武(成都国光电子管厂)；黄勇(成都国光电子管厂)
关键词：
中华激光医学杂志000215 激光在临床上应用比较广泛，为探讨其细胞遗传学效应，我们用He-Ne激光照射离体人外周血淋巴细胞，观察了淋巴细胞微核率的变化，现报告如下。
材料和方法
取育龄妇女微量外周静脉血，肝素抗凝。血样分5组，其中4组(激光A～D组)用HJZ-Ⅱ型He-Ne医疗激光器行激光照射，采用点状照射，光纤末端输出功率6 mW，光斑直径4 mm，照射距离4 mm，分别照射5、10、20、40 min，能量密度分别为14.31、28.62、57.24、114.52 J/cm2；另1组为对照组。每组重复4次。
取处理后的血样0.5 ml，加入装有培养液(配方：基础培养液RPMI 1640 1.6 ml，小牛血清0.4 ml，植物血凝素0.2 ml，终浓度为100 U/ml的青霉素、链霉素，pH 7.2～7.4)的培养瓶中，置37℃水浴锅中培养72 h。弃上清液，加入预热到37℃的0.075 mol/L氯化钾低渗溶液处理20～30 min，使红细胞破碎，白细胞膨胀，然后离心，弃去上清液，用固定液(甲醇∶冰醋酸=3∶1)固定2次。打成细胞悬液，冰冻载片滴片，Giemsa染色，油镜下检查每张玻片标本中出现微核的淋巴细胞数目。每张玻片计数2 000个以上的细胞，并计算微核细胞率。
结 果
见表1。激光照射各组血样的微核细胞率与对照组比较，差异均无显著意义(P>0.05)。
表1 He-Ne激光照射对人外周血淋巴细胞微核细胞率的影响 组别
照射时间
(min)
能量密度
(J/cm2)
微核细胞率*
(%，
±s)
激光A组
5
14.31
0.102±0.020
激光B组
10
28.62
0.117±0.007
激光C组
20
57.24
0.118±0.021
激光D组
40
114.52
0.131±0.025
对照组
0
0
0.119±0.035
* 为4次计算的结果
讨 论
用微核试验来监测诱变，具有经济、简便、快捷等特点，其敏感性和特异性与染色体分析相当，结果具有高度一致性和吻合性[1]。在本试验条件下，各组离体人外周血淋巴细胞经He-Ne激光照射后，平均微核细胞率都在0.20%之下，属于正常人体淋巴细胞微核细胞率范围。此结果表明，He-Ne激光在治疗范围内使用的能量密度比较安全，不会对人体造成遗传性危害。
参考文献
[1] 高晓玲，廖映枌，陶大昌，等. 低强度He-Ne激光辐照人体外周血对淋巴细胞染色体影响的研究[J]. 激光生物学报，1999，8：187-189.
(收稿日期：1999-06-30), 百拇医药
单位：周宏治(四川教育学院生物系，成都市,610041)；廖映枌(四川教育学院生物系，成都市,610041)；彭秀琼(华西医科大学附属第二医院)；段丹丽(四川省肿瘤医院)；陈真武(成都国光电子管厂)；黄勇(成都国光电子管厂)
关键词：
中华激光医学杂志000215 激光在临床上应用比较广泛，为探讨其细胞遗传学效应，我们用He-Ne激光照射离体人外周血淋巴细胞，观察了淋巴细胞微核率的变化，现报告如下。
材料和方法
取育龄妇女微量外周静脉血，肝素抗凝。血样分5组，其中4组(激光A～D组)用HJZ-Ⅱ型He-Ne医疗激光器行激光照射，采用点状照射，光纤末端输出功率6 mW，光斑直径4 mm，照射距离4 mm，分别照射5、10、20、40 min，能量密度分别为14.31、28.62、57.24、114.52 J/cm2；另1组为对照组。每组重复4次。
取处理后的血样0.5 ml，加入装有培养液(配方：基础培养液RPMI 1640 1.6 ml，小牛血清0.4 ml，植物血凝素0.2 ml，终浓度为100 U/ml的青霉素、链霉素，pH 7.2～7.4)的培养瓶中，置37℃水浴锅中培养72 h。弃上清液，加入预热到37℃的0.075 mol/L氯化钾低渗溶液处理20～30 min，使红细胞破碎，白细胞膨胀，然后离心，弃去上清液，用固定液(甲醇∶冰醋酸=3∶1)固定2次。打成细胞悬液，冰冻载片滴片，Giemsa染色，油镜下检查每张玻片标本中出现微核的淋巴细胞数目。每张玻片计数2 000个以上的细胞，并计算微核细胞率。
结 果
见表1。激光照射各组血样的微核细胞率与对照组比较，差异均无显著意义(P>0.05)。
表1 He-Ne激光照射对人外周血淋巴细胞微核细胞率的影响 组别
照射时间
(min)
能量密度
(J/cm2)
微核细胞率*
(%，
±s)激光A组
5
14.31
0.102±0.020
激光B组
10
28.62
0.117±0.007
激光C组
20
57.24
0.118±0.021
激光D组
40
114.52
0.131±0.025
对照组
0
0
0.119±0.035
* 为4次计算的结果
讨 论
用微核试验来监测诱变，具有经济、简便、快捷等特点，其敏感性和特异性与染色体分析相当，结果具有高度一致性和吻合性[1]。在本试验条件下，各组离体人外周血淋巴细胞经He-Ne激光照射后，平均微核细胞率都在0.20%之下，属于正常人体淋巴细胞微核细胞率范围。此结果表明，He-Ne激光在治疗范围内使用的能量密度比较安全，不会对人体造成遗传性危害。
参考文献
[1] 高晓玲，廖映枌，陶大昌，等. 低强度He-Ne激光辐照人体外周血对淋巴细胞染色体影响的研究[J]. 激光生物学报，1999，8：187-189.
(收稿日期：1999-06-30), 百拇医药