妊高征患者血浆肿瘤坏死因子和血管内皮生长因子变化及意义
作者：闻安民 陈颜芳 张斌 程新旺 王智琼
单位：(广东省人民医院妇产科510080)
关键词：妊高征；肿瘤坏死因子；血管内皮生长因子
广东医学000214 【摘要】 目的 测定妊高征患者血浆中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growith factor, VEGF)水平的变化及意义。方法 采用双抗体夹心ELISA法(酶联免疫法)测定妊高征患者(妊高征组)和正常妊娠妇女(对照组)产前血浆TNF-α和VEGF水平。结果 妊高征组血浆TNF-α水平[(86±24)pg/ml]明显高于对照组[(47±16)pg/ml](P<0.01)；而血浆VEGF水平妊高征[(22±10)pg/ml]则明显低于对照组[(39±15)pg/ml](P<0.01)。结论 妊高征患者血浆中TNF-α异常升高和VEGF异常降低，可能是妊高征时血管内皮细胞功能异常及妊高征发病中的一个重要环节之一。
, http://www.100md.com
Change and significance of plasma tumor necrosis factor-alpha and vascular endothelial growth factor in pregnancy-induced hypertension
Wen Anmin, Chen Yanfang, Zhang Bing
(Guangdong Provincial People's Hospital,Guangzhou 510080)
【Abstract】 Objective To evaluate changes and singificance of tumor necrosis factor-alpoha (TNF-α) and vascular endothelial growth factor (VEGF) plasma concentrations in patients with pregnancy-induced hypertension (PIH). Methods Plasma TNT-α and VEGF concentrations in patients with PIH (PIH group) and in normal pregnant women (control group) were measured by ELISA. Results Plasma levels of TNF-α were significantly higher in the PIH group [(86±24)pg/ml] than those in the control group[(47±16)pg/ml](P<0.01); Meanwhile, plasma levels of VEGF were significantly lower in the PIH group [(22±10)pg/ml] than those in the control group [(39±15)pg/ml](P<0.01), demonstrating there existed a reciprocal abnormality of plasma levels of TNF-α and VEGF in PIH patients. Conclusion Plasma levels of TNF-α are significantly higher and levels of VEGF are significantly lower in PIH patients, which may be associated with vascular endothelial cells dys function and may play a crucial role in the pathogenesis of PIH.
, 百拇医药
【Key words】 Pregnancy-induced hypertension Tumor necrosis factor Vascular endothelial growth factor
妊高征是危害母儿健康的产科常见病之一，其病因至今尚未清楚，免疫学因素一直是学者们关注的领域。近年来许多研究结果表明，血管内皮细胞损伤及其功能不全，在妊高征发病中可能起着关键的作用。亦有研究发现，血浆中免疫反应性肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)水平异常可能导致血管内皮细胞损伤和功能紊乱[1，2]。本研究测定了妊高征血浆中的TNF-α和VEGF水平，探讨其在妊高征发病的变化与意义。
1 资料与方法
1.1 研究对象 选择1997年9月至1999年3月在本院产科住院的妊高征患者30例(妊高征组)。诊断标准按《妇产科学》第4版所列相关标准。平均年龄(27.2±2.5)岁，平均孕期(37.3±1.43)周。取同期住院正常妊娠分娩30例(对照组)，平均年龄(26.6±2.8)岁，平均孕期(38.9±1.12)周。两组孕妇均无高血压家族史及既往史，无急慢性肾炎和其他继发性高血压存在。血肌酐、尿素氮均正常。
, 百拇医药
1.2 方法 血浆TNF-α和VEGF水平测定，均于产前空腹取两组孕妇静脉血于肝素抗凝管中，立即在4℃下离心分离血浆，置-70℃保存。TNF采用双抗体夹心ELISA法(试剂盒购自深圳晶美公司)，灵敏度为10 pg/ml，板内和板间变异系数均<10%。VEGF亦采用双抗体夹心ELISA法(试剂盒购自美国R&D公司)，灵敏度为5 pg/ml，板内和板间变异系数均<9%。
1.3 统计学处理 所有数据均以
±s表示，显著性检验采用方差分析及t检验。
2 结果
2.1 两组产前血浆中TNF-α水平变化 见表1。
2.2 两组产前血浆中VEGF水平变化 见表1。
, 百拇医药
3 讨论
3.1 TNF在妊高征发病中的作用 TNF是由激活的单核巨噬细胞产生的一种多肽，目前被认为是参与机人多种生理与免疫过程的重要介质，当其在血液中浓度异常增高时，可损作伤血管内皮细胞。1992年，Haeger等[3]认为，妊高征先兆子痫的发展过程包含了母体对胎儿抗原的异常免疫反应。TNF可能作为母体排斥反应的重要介质，参与妊高征的发病过程。Kupferminc等[1]研究表明，分娩前妊高征患者血浆TNF明显高于正常妊娠妇女，但产后72 h下降与正常妊娠妇女无显著差异，并证实可引起血管内皮细胞损伤。亦有研究表明，TNF-α能诱导内皮细胞凋亡[4]。我们的研究结果也表明，妊高征组的产前血浆TNF-α明显高于对照组(P<0.01)。由此可见，在妊高征时发生的免疫反应可使TNF异常增高，并直接损伤血管内皮细胞，使之功能紊乱、血管活性因子代谢异常而导致血管舒张功能减弱，血管发生痉挛，血压升高。因此，TNF-α在妊高征的发病中起着重要的作用。
, 百拇医药
表1 两组血浆中TNF-α和VEGF水平比较(±s) mg/ml 组 别
例数
TNF-α
VEGF
对 照 组
30
47±16
39±15
妊高征组
30
86±24
, 百拇医药
22±10
* 与对照组比较 P<0.01
3.2 VEGF与妊高征的关系 VEGF是一种糖蛋白二聚体，能特异地作用于血管内皮系统，是一种特异的、强烈的血管内皮细胞促分裂因子和血管生成因子，在体内对增加血管通透性及维持血管正常状态和完整性等具有重要意义[5]。此外，VEGF能抑制TNF-α所诱导的血管内皮的凋亡[4]。因而，VEGF对血管内皮细胞的生长和生存具有重要的作用。同时VEGF的升高有助于维持妊娠母体血管的完整性和正常通透性，在调节母体心血管系统对妊娠的适应能力方面有重要意义[6]。现已证明妊高征是一种与血管内皮细胞功能密切相关的一种疾病。目前，对VEGF在妊高征发病中的意义尚了解不多，且结果亦不一致。Lyall等[2]报道先兆子痫患者血中VEGF比正常孕妇低，并认为可能与VEGF受体变化有关。天然可溶性VEGF受体的作用在活体的表现为具有VEGF拮抗剂的作用，先兆子痫患者可容性VEGF受体生产过剩而抑制了VEGF分泌。亦有研究表明，胎盘中VEGF免疫组化染色强度减弱[7]，mRNA水平降低[8]。但也有报道妊高征患者血浆和脐血的VEGF水平高于正常孕妇[9]。VEGF又称血管通透性因子，能增加血管细胞的通透性，其对血管内皮功能的影响在妊高征发病中的意义有待于进一步研究。
, 百拇医药
血管内皮舒张功能的改变可能与妊高征血液中有“毒性因子”存在有关。有关的研究表明，在保护内皮细胞免受毒素诱导的程序化死亡中，TNF-α和VEGF对血管内皮细胞的凋亡的作用是一对相互对立的因子[4]，妊娠期双方的平衡可能在维持血管正常状态和完整性方面具有重要意义。此外，VEGF的下降间接地降低了内皮依赖性舒张因子一氧化氮(NO)的合成与释放，并且呈浓度依赖性[10]。本研究中所测定的妊高征患者血浆中TNF-α和VEGF有异常改变，可能是妊高征时血管内皮细胞的功能异常的重要环节之一，TNF-α和VEGF在妊高征发病中关系和作用仍有待于进一步深入研究。
参考文献
1，Haeger M, Unander M, Hansson NB, et al. Leukocyte activation in pre-eclampsia. Obstet Gynecol,1992,79:19
, 百拇医药
2，Lyall F, Young A, Boswell F, et al. Placental expression of vascular endothelial growth factor in placentae from pregnancies complicated by pre-eclampsia and intrauterine growth restriction does not support placental hypoxia at delivery. Placenta,1997,18:269
3，Kupferminc MJ, Peaceman AM, Wigton TR, et al. Tumor necrosis factor-α is elevated in plasma and amniotic fluid of patients with severe preeclampsia. Am J Obstet Gynecol 1994,170:1752
, http://www.100md.com
4，Spyridopoulos I, Brogi E, Kearney M, et al. Vascular endothelial growth factor inhibits endothelial cell apoptosis induced by tumor necrosis factor-alpha: balance between growth and death. J Mol Ceel Cardiol,1997,29:1321
5，Dor Y, Keshet E. Ischemia-driven angiogenesis. Trends Cariovasc Med, 1997,7:289
6，Evans PW, Wheeler T, Anthony FW, et al. A longitudinal study of maternal serum vascular endothelial growth factor in early pregnancy. Hum Reprod,1998,13:1057
, http://www.100md.com
7，Lyall F, Greer IA, Boswell F, et al. Suppression of serum vascular endothelial growth factor immunoreactivity in normal pregnancy and in pre-eclampsia. Br Obstet Gynecol,1997,104:223
8，Cooper JC, Sharkey AM, Charnock-Jones DS, et al. VEGF mRNA levels in placentae from pregnancies by pre-eclampsia. Br J Obstet Gynecol,1996,103:1191
9，Kupferminc MJ, Daniel Y, Englender T, et al. Vascular endothelial growth factor is increased in patients with preeclampsia. Am J Reprod Immunol,1997,38:302
10，Ahmed A, Dunk C, Kniss D, et al. Role of VEGF receptor-1(flt-1) in mediating calcium-dependent nitric oxide release and limiting DNA synthesis in human trophoblast cell. Lab Invest,1997,76:779
(收稿日期：1999-10-25), 百拇医药
单位：(广东省人民医院妇产科510080)
关键词：妊高征；肿瘤坏死因子；血管内皮生长因子
广东医学000214 【摘要】 目的 测定妊高征患者血浆中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growith factor, VEGF)水平的变化及意义。方法 采用双抗体夹心ELISA法(酶联免疫法)测定妊高征患者(妊高征组)和正常妊娠妇女(对照组)产前血浆TNF-α和VEGF水平。结果 妊高征组血浆TNF-α水平[(86±24)pg/ml]明显高于对照组[(47±16)pg/ml](P<0.01)；而血浆VEGF水平妊高征[(22±10)pg/ml]则明显低于对照组[(39±15)pg/ml](P<0.01)。结论 妊高征患者血浆中TNF-α异常升高和VEGF异常降低，可能是妊高征时血管内皮细胞功能异常及妊高征发病中的一个重要环节之一。
, http://www.100md.com
Change and significance of plasma tumor necrosis factor-alpha and vascular endothelial growth factor in pregnancy-induced hypertension
Wen Anmin, Chen Yanfang, Zhang Bing
(Guangdong Provincial People's Hospital,Guangzhou 510080)
【Abstract】 Objective To evaluate changes and singificance of tumor necrosis factor-alpoha (TNF-α) and vascular endothelial growth factor (VEGF) plasma concentrations in patients with pregnancy-induced hypertension (PIH). Methods Plasma TNT-α and VEGF concentrations in patients with PIH (PIH group) and in normal pregnant women (control group) were measured by ELISA. Results Plasma levels of TNF-α were significantly higher in the PIH group [(86±24)pg/ml] than those in the control group[(47±16)pg/ml](P<0.01); Meanwhile, plasma levels of VEGF were significantly lower in the PIH group [(22±10)pg/ml] than those in the control group [(39±15)pg/ml](P<0.01), demonstrating there existed a reciprocal abnormality of plasma levels of TNF-α and VEGF in PIH patients. Conclusion Plasma levels of TNF-α are significantly higher and levels of VEGF are significantly lower in PIH patients, which may be associated with vascular endothelial cells dys function and may play a crucial role in the pathogenesis of PIH.
, 百拇医药
【Key words】 Pregnancy-induced hypertension Tumor necrosis factor Vascular endothelial growth factor
妊高征是危害母儿健康的产科常见病之一，其病因至今尚未清楚，免疫学因素一直是学者们关注的领域。近年来许多研究结果表明，血管内皮细胞损伤及其功能不全，在妊高征发病中可能起着关键的作用。亦有研究发现，血浆中免疫反应性肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)水平异常可能导致血管内皮细胞损伤和功能紊乱[1，2]。本研究测定了妊高征血浆中的TNF-α和VEGF水平，探讨其在妊高征发病的变化与意义。
1 资料与方法
1.1 研究对象 选择1997年9月至1999年3月在本院产科住院的妊高征患者30例(妊高征组)。诊断标准按《妇产科学》第4版所列相关标准。平均年龄(27.2±2.5)岁，平均孕期(37.3±1.43)周。取同期住院正常妊娠分娩30例(对照组)，平均年龄(26.6±2.8)岁，平均孕期(38.9±1.12)周。两组孕妇均无高血压家族史及既往史，无急慢性肾炎和其他继发性高血压存在。血肌酐、尿素氮均正常。
, 百拇医药
1.2 方法 血浆TNF-α和VEGF水平测定，均于产前空腹取两组孕妇静脉血于肝素抗凝管中，立即在4℃下离心分离血浆，置-70℃保存。TNF采用双抗体夹心ELISA法(试剂盒购自深圳晶美公司)，灵敏度为10 pg/ml，板内和板间变异系数均<10%。VEGF亦采用双抗体夹心ELISA法(试剂盒购自美国R&D公司)，灵敏度为5 pg/ml，板内和板间变异系数均<9%。
1.3 统计学处理 所有数据均以
±s表示，显著性检验采用方差分析及t检验。2 结果
2.1 两组产前血浆中TNF-α水平变化 见表1。
2.2 两组产前血浆中VEGF水平变化 见表1。
, 百拇医药
3 讨论
3.1 TNF在妊高征发病中的作用 TNF是由激活的单核巨噬细胞产生的一种多肽，目前被认为是参与机人多种生理与免疫过程的重要介质，当其在血液中浓度异常增高时，可损作伤血管内皮细胞。1992年，Haeger等[3]认为，妊高征先兆子痫的发展过程包含了母体对胎儿抗原的异常免疫反应。TNF可能作为母体排斥反应的重要介质，参与妊高征的发病过程。Kupferminc等[1]研究表明，分娩前妊高征患者血浆TNF明显高于正常妊娠妇女，但产后72 h下降与正常妊娠妇女无显著差异，并证实可引起血管内皮细胞损伤。亦有研究表明，TNF-α能诱导内皮细胞凋亡[4]。我们的研究结果也表明，妊高征组的产前血浆TNF-α明显高于对照组(P<0.01)。由此可见，在妊高征时发生的免疫反应可使TNF异常增高，并直接损伤血管内皮细胞，使之功能紊乱、血管活性因子代谢异常而导致血管舒张功能减弱，血管发生痉挛，血压升高。因此，TNF-α在妊高征的发病中起着重要的作用。
, 百拇医药
表1 两组血浆中TNF-α和VEGF水平比较(
±s) mg/ml 组 别例数
TNF-α
VEGF
对 照 组
30
47±16
39±15
妊高征组
30
86±24
, 百拇医药
22±10
* 与对照组比较 P<0.01
3.2 VEGF与妊高征的关系 VEGF是一种糖蛋白二聚体，能特异地作用于血管内皮系统，是一种特异的、强烈的血管内皮细胞促分裂因子和血管生成因子，在体内对增加血管通透性及维持血管正常状态和完整性等具有重要意义[5]。此外，VEGF能抑制TNF-α所诱导的血管内皮的凋亡[4]。因而，VEGF对血管内皮细胞的生长和生存具有重要的作用。同时VEGF的升高有助于维持妊娠母体血管的完整性和正常通透性，在调节母体心血管系统对妊娠的适应能力方面有重要意义[6]。现已证明妊高征是一种与血管内皮细胞功能密切相关的一种疾病。目前，对VEGF在妊高征发病中的意义尚了解不多，且结果亦不一致。Lyall等[2]报道先兆子痫患者血中VEGF比正常孕妇低，并认为可能与VEGF受体变化有关。天然可溶性VEGF受体的作用在活体的表现为具有VEGF拮抗剂的作用，先兆子痫患者可容性VEGF受体生产过剩而抑制了VEGF分泌。亦有研究表明，胎盘中VEGF免疫组化染色强度减弱[7]，mRNA水平降低[8]。但也有报道妊高征患者血浆和脐血的VEGF水平高于正常孕妇[9]。VEGF又称血管通透性因子，能增加血管细胞的通透性，其对血管内皮功能的影响在妊高征发病中的意义有待于进一步研究。
, 百拇医药
血管内皮舒张功能的改变可能与妊高征血液中有“毒性因子”存在有关。有关的研究表明，在保护内皮细胞免受毒素诱导的程序化死亡中，TNF-α和VEGF对血管内皮细胞的凋亡的作用是一对相互对立的因子[4]，妊娠期双方的平衡可能在维持血管正常状态和完整性方面具有重要意义。此外，VEGF的下降间接地降低了内皮依赖性舒张因子一氧化氮(NO)的合成与释放，并且呈浓度依赖性[10]。本研究中所测定的妊高征患者血浆中TNF-α和VEGF有异常改变，可能是妊高征时血管内皮细胞的功能异常的重要环节之一，TNF-α和VEGF在妊高征发病中关系和作用仍有待于进一步深入研究。
参考文献
1，Haeger M, Unander M, Hansson NB, et al. Leukocyte activation in pre-eclampsia. Obstet Gynecol,1992,79:19
, 百拇医药
2，Lyall F, Young A, Boswell F, et al. Placental expression of vascular endothelial growth factor in placentae from pregnancies complicated by pre-eclampsia and intrauterine growth restriction does not support placental hypoxia at delivery. Placenta,1997,18:269
3，Kupferminc MJ, Peaceman AM, Wigton TR, et al. Tumor necrosis factor-α is elevated in plasma and amniotic fluid of patients with severe preeclampsia. Am J Obstet Gynecol 1994,170:1752
, http://www.100md.com
4，Spyridopoulos I, Brogi E, Kearney M, et al. Vascular endothelial growth factor inhibits endothelial cell apoptosis induced by tumor necrosis factor-alpha: balance between growth and death. J Mol Ceel Cardiol,1997,29:1321
5，Dor Y, Keshet E. Ischemia-driven angiogenesis. Trends Cariovasc Med, 1997,7:289
6，Evans PW, Wheeler T, Anthony FW, et al. A longitudinal study of maternal serum vascular endothelial growth factor in early pregnancy. Hum Reprod,1998,13:1057
, http://www.100md.com
7，Lyall F, Greer IA, Boswell F, et al. Suppression of serum vascular endothelial growth factor immunoreactivity in normal pregnancy and in pre-eclampsia. Br Obstet Gynecol,1997,104:223
8，Cooper JC, Sharkey AM, Charnock-Jones DS, et al. VEGF mRNA levels in placentae from pregnancies by pre-eclampsia. Br J Obstet Gynecol,1996,103:1191
9，Kupferminc MJ, Daniel Y, Englender T, et al. Vascular endothelial growth factor is increased in patients with preeclampsia. Am J Reprod Immunol,1997,38:302
10，Ahmed A, Dunk C, Kniss D, et al. Role of VEGF receptor-1(flt-1) in mediating calcium-dependent nitric oxide release and limiting DNA synthesis in human trophoblast cell. Lab Invest,1997,76:779
(收稿日期：1999-10-25), 百拇医药