原发性肝癌血清磷脂酶A2活性变化及临床意义
作者：廖璞 付晓 廖雪松 王淑琴 康格非
单位：廖璞 廖雪松 王淑琴(重庆市第三人民医院 400014)；付晓(重庆黔江地区中心医院);康格非(重庆医科大学检验系)
关键词：原发性肝癌；磷脂酶A2
重庆医学000305 摘 要 目的 探讨原发性肝癌(PLC)患者血清磷脂酶A2活性的变化及临床意义。方法 采用[3H]-油酸标记生物膜法检测了60例PLC患者(其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期肝癌患者分别为14例、23例、23例)以及16例手术切除肿瘤后和19例肝动脉栓塞化疗后患者血清PLA2的动态变化。结果 PLC患者血清PLA2活性29.27±4.15(%)明显高于对照组8.42±2.01(%)；且不同临床分期肝癌患者之间PLA2活性相差显著(P<0.05)，随患者病情加重，PLA2活性呈递增趋势；PLA2活性≥30.0(%)和<30.0(%)者一年生存率分别为32.0%和75.0%；手术切除肿瘤后和化疗有效者PLA2活性较治疗前均有明显降低(P<0.05)。结论 PLA2可作为PLC辅助诊断及估计病情的血清学指标之一，对了解PLC患者体内肿瘤体积大小、病程发展、疗效评价及预后估计有一定的作用。
, 百拇医药
The Change of Serum Phospholipase A2 Activity and its Clinical Significance in Patient with Primary Liver Cancer
Liao Pu Hu Xiao Liao Xuesong
(The Third People's Hospital of Chongqing, Chongqing, 400014)
Abstract:ObjectiveTo Study the change of serum phospholipase A2 activity and its clinical significance in patient with primary liver cancer.Methods:PLA2 activity was determined in 60 patients with PLC and in 35 cases of them after hepatectomy or prechemtherapy by [H]-oletate radioactivity.Results:PLA2 activity in stage Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ patients with PLC was significantly higher than that in control group (P<0.05), the increase of PLA2 activity was related with the clinical stage and the l-year survial rate PLA2 activity decreased significantly after treatment by hepatectomy or prechemotherapy (P<0.05).Conclusion:It is suggested that the level of PLA2 activity may be considered as one of the serologic parameter in diagnosis and classification of clinical stage of PLC, therefore, the activity of PLA2 in serum of PLC patients may be helpful for estimating the development of disease, the volume of the tumor, the curative affect and prognosis of the patients with PLC.
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Key words:Primary liver cancer Phospholipase A2
血清磷脂酶A2(Phospholipase A2，PLA2)是体内重要的代谢调节酶类，具有多种生物学活性。新近发现PLA2与细胞有丝分裂的信号传导过程有关，在肿瘤发生、发展的相关过程中起了重要的作用[1]。而有关此方面的内容，国内迄今尚未见公开文献报道。为此，我们检测了60例PLC患者血清PLA2活性，旨在探讨PLC患者血清PLA2活性变化与肿瘤临床分期及预后等方面的关系。
1 材料与方法
1.1 临床资料
PLC患者60例，所有患者均经手术、影像或病理学检查确诊。男性43例，女性17例，中位年龄57.5岁。肿瘤直径≤5cm者(小肝癌)25例，>5cm者(大肝癌)35例。临床分期按1977年全国肝癌防治研究协作会议肝癌临床分期方案。其中Ⅰ期14例，Ⅱ期23例，Ⅲ期23例。有门静脉栓塞者24例。16例手术切除肿瘤患者和19例肝动脉栓塞化疗者分别于术前和化疗前3日及术后和化疗后3～4周内取外周血3ml。对照组为35例健康体检者，男性20例，女性15例，中位年龄45.5岁。
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1.2 PLA2活性测定
患者外周血，离心后取血清，-20℃备用，参照Maki[2]等的方法测定PLA2活性，PLA2活性用水解率高低表示：
水解率=(测定管cpm-无酶对照组cpm)/底物总cmp×100%
1.3 统计学处理方法
检测结果以
±S表示，组间比较用t或X2检验。
2 结果
2.1 PLC患者血清PLA2活性明显高于正常对照组，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期各组PLC患者血清PLA2活性均高于正常对照组，各期患者间PLA2活性相差非常显著，随病情加重，病变进展，PLA2活性呈递增趋势。大肝癌组较小肝癌组PLA2活性明显升高，门静脉癌栓组较无癌栓组PLA2活性明显升高。结果见表1。
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表1 PLC患者治疗前PLA2活性与肝癌病期，肝癌大小及门静脉癌栓的关系 (±S) 分组
例数
PLA(%)
P值
阳性率(%)※
P值
正常对照组
35
8.42±2.01
肝癌组
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60
29.27±4.15▲
<0.05
91.67
<0.05
Ⅰ期
14
16.59±3.20▲
<0.05
64.28
<0.05
Ⅱ期
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23
25.87±4.32▲△
<0.05
86.96
<0.05
Ⅲ期
23
33.49±6.12▲△☆
<0.05
100.00
<0.05
大肝癌组
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27
28.96±5.21▲★
<0.05
92.59
<0.05
小肝癌组
33
15.42±3.27▲
<0.05
63.64
<0.05
无癌栓组
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36
23.37±3.93▲
<0.05
83.33
<0.05
有部栓组
24
30.91±4.62▲●
<0.05
95.83
<0.05
注：▲与正常对照组相比；△与Ⅰ期患者比；☆与Ⅱ期患者比；★与小肝癌组比；
, 百拇医药
●与无癌栓组比，※PLA2活性高于正常对照组上限为阳性
2.2 16例行肿瘤切除术的PLC患者术后3～4周及8例化疗有效(指肿瘤缩小或无变化)者血清PLA2活性明显低于治疗前(P<0.05)，11例化疗无效(指肿瘤增大或播散)者血清PLA2活性较治疗前显著升高(P<0.05)。见图1。
图1 手术切除和化疗后患者血清PLA2活性变化
2.3 比较分析了PLC患者血清PLA2活性≥30.0(%)，<30.0(%)者一年存活率，结果提示二者死亡与生存病例数的构成比有显著差异(P<0.05)。见表2。
表2 血清不同PLA2活性中PLC患者死亡与存活者的分布 项 目
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PLA2(%)
≥30.0
<30.0
总例数
19
36
一年死亡例数
13
9
一年存活例数
6
27
一年生存率(%)
, 百拇医药
32
75
P值
<0.05
3 讨论
PLA2是作用于磷脂第二位置上脂酰键，产生自由脂肪酸和溶血卵磷脂进一步生成前列腺素、血栓素等生物活性物质的一系列酶的总称。Yamashita等根据初步的试验结果指出，各种恶性肿瘤患者血清中PLA2浓度均可增高，增高的水平与疾病病程相关，手术后PLA2水平甚至可降到正常水平[3]。本研究发现，PLC患者血清PLA2活性较正常对照组明显增高，证实肝癌患者血清PLA2存在高水平表达，且随着肿瘤生长，病情加重，血清PLA2活性呈明显增高的趋势。大肝癌组和合并门静脉癌栓组PLA2活性显著高于小肝癌组和无癌栓组进一步说明了这一点，同时，手术切除肿瘤后或化疗有效者PLA2活性明显下降，也表明PLA2活性与PLC肿瘤负荷及病情发展呈正相关。文献报告PLA2在人乳癌组织的过度表达与癌症的严重程度密切相关，PLA2含量高的乳癌患者其生存时间相应短，PLA2含量是估计预后最有价值的指标[4]。本文肝癌患者血清PLA2活性大于30.0(%)者一年生存率明显低于PLA2活性于30.0(%)者，也提示血清PLA2活性越高患者预后愈差。
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关于PLC患者血清PLA2活性升高的机理，我们认为可能与以下两点有关：(1)癌细胞引起的炎症刺激导致正常肝细胞产生PLA2增多。体外试验证实大多数癌细胞株均可产生炎症前细胞因子IL-1和IL-6，而IL-1和IL-6可刺激肝细胞表达PLA2。(2)癌细胞自身分泌PLA2，因此，病情重、恶化者癌细胞继续增殖，分泌和释放PLA2逐渐增多，血清PLA2活性持续升高，当肿瘤切除或缩小后血清PLA2减少。Kjyohara H[6]等用免疫组化技术发现硬癌组织中PLA2水平高于其他组织，且PLA2阳性细胞常定位在肿瘤的侵入带，此结果提示PLA2介导癌基质细胞在癌病理过程中起了重要作用。继后，Ruff R[1]在类似的研究中得出了相同的结论，并进一步揭示PLA2是间接或直接地通过前列腺素E2刺激基质细胞的有丝分裂，增生的基质细胞分泌大量细胞因子又可刺激癌细胞的增殖和PLA2的分泌，并且上述物质构成级联反应导致了癌细胞的增殖，在此反应过程中PLA2活性增高处于关键性环节。同时前列腺素E2还可抑制宿主的免疫反应，使肿瘤无节制生长。
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综上所述，PLA2活性升高在肿瘤的发病机理中有重要作用，PLA2活性的测定对PLC的早期辅助诊断、病情的估计、疗效和预后的评价具有重要临床意义和应用价值。
参考文献
1，Ruff R, Chasen MR, Long JE, et al. A phase Ⅱ study of oral clofazimine in unresectable and metastasus hepatocellular carcinoma. Anm Oncol, 1998,9(2):217～219
2，Marki F, Franson R. Endogenous suppression of neutral-active and calcium-dependent phospholipse A2 in human poly morphonuclear leukocytes. Biochem Biophys Acta, 1986, 879:149～156
, http://www.100md.com
3，Yamashita SI, Ogawa M, Sakamotok, et al. Elevation of serum group Ⅱ phospholipase A2 in patients with advanced cancer. Clinical Chimita Acta, 1994,228:91～99
4，Yamashita S, Yamashita J, Sakamoto K, et al. Increased expression of membrane-associated phospholipase A2 shows malignant potential of human breast cancer cells. Cancer, 1993,71:3058～3064
5，Ogawa M. Group Ⅱ phospholipase A2 in neoplastic disease. Prog Surg Basel Karger, 1997, 24:200～204
6，Kjyohara H, Egami H, Kako H, et al. Immunohistochemical localization of group Ⅱ phospholipase A2 in human pancreatic carcinoma. Int J Pacreatol, 1993,13:49～57, 百拇医药
单位：廖璞 廖雪松 王淑琴(重庆市第三人民医院 400014)；付晓(重庆黔江地区中心医院);康格非(重庆医科大学检验系)
关键词：原发性肝癌；磷脂酶A2
重庆医学000305 摘 要 目的 探讨原发性肝癌(PLC)患者血清磷脂酶A2活性的变化及临床意义。方法 采用[3H]-油酸标记生物膜法检测了60例PLC患者(其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期肝癌患者分别为14例、23例、23例)以及16例手术切除肿瘤后和19例肝动脉栓塞化疗后患者血清PLA2的动态变化。结果 PLC患者血清PLA2活性29.27±4.15(%)明显高于对照组8.42±2.01(%)；且不同临床分期肝癌患者之间PLA2活性相差显著(P<0.05)，随患者病情加重，PLA2活性呈递增趋势；PLA2活性≥30.0(%)和<30.0(%)者一年生存率分别为32.0%和75.0%；手术切除肿瘤后和化疗有效者PLA2活性较治疗前均有明显降低(P<0.05)。结论 PLA2可作为PLC辅助诊断及估计病情的血清学指标之一，对了解PLC患者体内肿瘤体积大小、病程发展、疗效评价及预后估计有一定的作用。
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The Change of Serum Phospholipase A2 Activity and its Clinical Significance in Patient with Primary Liver Cancer
Liao Pu Hu Xiao Liao Xuesong
(The Third People's Hospital of Chongqing, Chongqing, 400014)
Abstract:ObjectiveTo Study the change of serum phospholipase A2 activity and its clinical significance in patient with primary liver cancer.Methods:PLA2 activity was determined in 60 patients with PLC and in 35 cases of them after hepatectomy or prechemtherapy by [H]-oletate radioactivity.Results:PLA2 activity in stage Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ patients with PLC was significantly higher than that in control group (P<0.05), the increase of PLA2 activity was related with the clinical stage and the l-year survial rate PLA2 activity decreased significantly after treatment by hepatectomy or prechemotherapy (P<0.05).Conclusion:It is suggested that the level of PLA2 activity may be considered as one of the serologic parameter in diagnosis and classification of clinical stage of PLC, therefore, the activity of PLA2 in serum of PLC patients may be helpful for estimating the development of disease, the volume of the tumor, the curative affect and prognosis of the patients with PLC.
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Key words:Primary liver cancer Phospholipase A2
血清磷脂酶A2(Phospholipase A2，PLA2)是体内重要的代谢调节酶类，具有多种生物学活性。新近发现PLA2与细胞有丝分裂的信号传导过程有关，在肿瘤发生、发展的相关过程中起了重要的作用[1]。而有关此方面的内容，国内迄今尚未见公开文献报道。为此，我们检测了60例PLC患者血清PLA2活性，旨在探讨PLC患者血清PLA2活性变化与肿瘤临床分期及预后等方面的关系。
1 材料与方法
1.1 临床资料
PLC患者60例，所有患者均经手术、影像或病理学检查确诊。男性43例，女性17例，中位年龄57.5岁。肿瘤直径≤5cm者(小肝癌)25例，>5cm者(大肝癌)35例。临床分期按1977年全国肝癌防治研究协作会议肝癌临床分期方案。其中Ⅰ期14例，Ⅱ期23例，Ⅲ期23例。有门静脉栓塞者24例。16例手术切除肿瘤患者和19例肝动脉栓塞化疗者分别于术前和化疗前3日及术后和化疗后3～4周内取外周血3ml。对照组为35例健康体检者，男性20例，女性15例，中位年龄45.5岁。
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1.2 PLA2活性测定
患者外周血，离心后取血清，-20℃备用，参照Maki[2]等的方法测定PLA2活性，PLA2活性用水解率高低表示：
水解率=(测定管cpm-无酶对照组cpm)/底物总cmp×100%
1.3 统计学处理方法
检测结果以
±S表示，组间比较用t或X2检验。2 结果
2.1 PLC患者血清PLA2活性明显高于正常对照组，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期各组PLC患者血清PLA2活性均高于正常对照组，各期患者间PLA2活性相差非常显著，随病情加重，病变进展，PLA2活性呈递增趋势。大肝癌组较小肝癌组PLA2活性明显升高，门静脉癌栓组较无癌栓组PLA2活性明显升高。结果见表1。
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表1 PLC患者治疗前PLA2活性与肝癌病期，肝癌大小及门静脉癌栓的关系 (
±S) 分组例数
PLA(%)
P值
阳性率(%)※
P值
正常对照组
35
8.42±2.01
肝癌组
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60
29.27±4.15▲
<0.05
91.67
<0.05
Ⅰ期
14
16.59±3.20▲
<0.05
64.28
<0.05
Ⅱ期
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23
25.87±4.32▲△
<0.05
86.96
<0.05
Ⅲ期
23
33.49±6.12▲△☆
<0.05
100.00
<0.05
大肝癌组
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27
28.96±5.21▲★
<0.05
92.59
<0.05
小肝癌组
33
15.42±3.27▲
<0.05
63.64
<0.05
无癌栓组
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36
23.37±3.93▲
<0.05
83.33
<0.05
有部栓组
24
30.91±4.62▲●
<0.05
95.83
<0.05
注：▲与正常对照组相比；△与Ⅰ期患者比；☆与Ⅱ期患者比；★与小肝癌组比；
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●与无癌栓组比，※PLA2活性高于正常对照组上限为阳性
2.2 16例行肿瘤切除术的PLC患者术后3～4周及8例化疗有效(指肿瘤缩小或无变化)者血清PLA2活性明显低于治疗前(P<0.05)，11例化疗无效(指肿瘤增大或播散)者血清PLA2活性较治疗前显著升高(P<0.05)。见图1。
图1 手术切除和化疗后患者血清PLA2活性变化
2.3 比较分析了PLC患者血清PLA2活性≥30.0(%)，<30.0(%)者一年存活率，结果提示二者死亡与生存病例数的构成比有显著差异(P<0.05)。见表2。
表2 血清不同PLA2活性中PLC患者死亡与存活者的分布 项 目
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PLA2(%)
≥30.0
<30.0
总例数
19
36
一年死亡例数
13
9
一年存活例数
6
27
一年生存率(%)
, 百拇医药
32
75
P值
<0.05
3 讨论
PLA2是作用于磷脂第二位置上脂酰键，产生自由脂肪酸和溶血卵磷脂进一步生成前列腺素、血栓素等生物活性物质的一系列酶的总称。Yamashita等根据初步的试验结果指出，各种恶性肿瘤患者血清中PLA2浓度均可增高，增高的水平与疾病病程相关，手术后PLA2水平甚至可降到正常水平[3]。本研究发现，PLC患者血清PLA2活性较正常对照组明显增高，证实肝癌患者血清PLA2存在高水平表达，且随着肿瘤生长，病情加重，血清PLA2活性呈明显增高的趋势。大肝癌组和合并门静脉癌栓组PLA2活性显著高于小肝癌组和无癌栓组进一步说明了这一点，同时，手术切除肿瘤后或化疗有效者PLA2活性明显下降，也表明PLA2活性与PLC肿瘤负荷及病情发展呈正相关。文献报告PLA2在人乳癌组织的过度表达与癌症的严重程度密切相关，PLA2含量高的乳癌患者其生存时间相应短，PLA2含量是估计预后最有价值的指标[4]。本文肝癌患者血清PLA2活性大于30.0(%)者一年生存率明显低于PLA2活性于30.0(%)者，也提示血清PLA2活性越高患者预后愈差。
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关于PLC患者血清PLA2活性升高的机理，我们认为可能与以下两点有关：(1)癌细胞引起的炎症刺激导致正常肝细胞产生PLA2增多。体外试验证实大多数癌细胞株均可产生炎症前细胞因子IL-1和IL-6，而IL-1和IL-6可刺激肝细胞表达PLA2。(2)癌细胞自身分泌PLA2，因此，病情重、恶化者癌细胞继续增殖，分泌和释放PLA2逐渐增多，血清PLA2活性持续升高，当肿瘤切除或缩小后血清PLA2减少。Kjyohara H[6]等用免疫组化技术发现硬癌组织中PLA2水平高于其他组织，且PLA2阳性细胞常定位在肿瘤的侵入带，此结果提示PLA2介导癌基质细胞在癌病理过程中起了重要作用。继后，Ruff R[1]在类似的研究中得出了相同的结论，并进一步揭示PLA2是间接或直接地通过前列腺素E2刺激基质细胞的有丝分裂，增生的基质细胞分泌大量细胞因子又可刺激癌细胞的增殖和PLA2的分泌，并且上述物质构成级联反应导致了癌细胞的增殖，在此反应过程中PLA2活性增高处于关键性环节。同时前列腺素E2还可抑制宿主的免疫反应，使肿瘤无节制生长。
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综上所述，PLA2活性升高在肿瘤的发病机理中有重要作用，PLA2活性的测定对PLC的早期辅助诊断、病情的估计、疗效和预后的评价具有重要临床意义和应用价值。
参考文献
1，Ruff R, Chasen MR, Long JE, et al. A phase Ⅱ study of oral clofazimine in unresectable and metastasus hepatocellular carcinoma. Anm Oncol, 1998,9(2):217～219
2，Marki F, Franson R. Endogenous suppression of neutral-active and calcium-dependent phospholipse A2 in human poly morphonuclear leukocytes. Biochem Biophys Acta, 1986, 879:149～156
, http://www.100md.com
3，Yamashita SI, Ogawa M, Sakamotok, et al. Elevation of serum group Ⅱ phospholipase A2 in patients with advanced cancer. Clinical Chimita Acta, 1994,228:91～99
4，Yamashita S, Yamashita J, Sakamoto K, et al. Increased expression of membrane-associated phospholipase A2 shows malignant potential of human breast cancer cells. Cancer, 1993,71:3058～3064
5，Ogawa M. Group Ⅱ phospholipase A2 in neoplastic disease. Prog Surg Basel Karger, 1997, 24:200～204
6，Kjyohara H, Egami H, Kako H, et al. Immunohistochemical localization of group Ⅱ phospholipase A2 in human pancreatic carcinoma. Int J Pacreatol, 1993,13:49～57, 百拇医药