大肠埃希菌耐药率及耐药趋势的探讨
作者：黄长武 陈维贤 唐波 杨秀英
单位：(重庆医科大学第二医院检验科 400010)
关键词：WHONET4；大肠杆菌；耐药性
重庆医学000304 摘 要 目的 利用“WHONET4”软件监测大肠杆菌对几类常用抗生素在1995年～1998年4年间耐药性的变迁。方法 采用常规鉴定技术鉴定细菌，K-B法测定抑菌环直径，利用“WHONET4”软件对结果进行录入和分析。结果 大肠杆菌对丁胺卡那在1996年和1998年的耐药率有显著差异(P<0.05)，丁胺卡那其他年份的耐药率及其他六种抗生素各年份间的耐药率无显著性意义(P>0.05)。庆大霉素、先锋Ⅴ、头孢呋欣、先锋必的耐药率分别为48.3%、28.6%、33.3%、28.6%，临床可继续使用。氨苄青霉素、氟哌酸的耐药率高达90.6%和63.1%，临床已不宜使用。丁胺卡那耐药性有逐年降低的趋势，庆大霉素、先锋Ⅴ、头孢呋欣、先锋必耐药性有逐年积累的趋势。结论 抑菌环直径变化比耐药率变化更能反映细菌耐药性及变化趋势。
, 百拇医药
Study of Resistance and its Resistant Trend of E. coll
Huamg Changwu Chen Weixian Tang Bo Yang Xiuying
(Department of examination,the Second College of Clinical Wedicine S the Second Affiliated Hospital of Chongqing Medical University. Chongqing, 400010)
Abstract Objective:This article is trying to study the change of resistance of E. coli to several common antibiotics by the software of whonet4. Methods:The bacteria were identified by routine techniques, the diameters of bacteria inhibiting loops were determined by K-B method, and data were sorted and analyzed by whonet4. Results:To amikacin, the resistant rate of E. coli had changed significantly in 1996 and 1998 (P<0.05). But in the other years it hadn't. The changes of resistant rate of gentamicin, cefazolin, cefuroxime, cefoperazone had no significance in the four years. The mean resistant rate of them were 48.3%,28.6%, 33.3%, 28.6%, so they can still be used in clinic. But resistant rate of ampicllin and norfloxacin arrived at 90.6% and 63.1%, they should be used controlledly. The resistance of amikacin decreased yearly, while the resistance of gentamicin, cefazolin, cefuroxime, cefoperazone have accumulating trends. Conclusion:The diameter of bacteria inhibiting loop is more sensitive than resistant rate to reflect resistance change and its trend.
, 百拇医药
Key words:Whonet4 E.coli Resistance
大肠杆菌是临床分离的最常见细菌之一，为临床主要的致病菌。由于抗生素长期、大量使用和不合理使用，导致大肠杆菌的耐药菌株越来越多，特别是耐三代头饱产超广谱β一内酰胺酶(HSBLs)的大肠杆菌，给临床治疗带来了很大的困难。因此，及时准确地了解大肠杆菌对常用抗生素耐药性变化，给临床提供相应信息，显得愈加重要。利用“WHONET4”软件，统计分析了我院1995年～1998年分离的359株大肠杆菌对常用的氨基糖甙、β一内酰胺类、头孢一代、头孢三代、头孢三代及喹诺酮六类抗生素的代表性药物耐药率及耐药趋势的变化，现报告如下。
1 材料和方法
1.1 试验菌株来源 均来自我院临床微生物室于1995年到1998年分离的大肠杆菌，共359株。
, http://www.100md.com 1.2 抗生素纸片 购自北京天坛生物技术开发公司。
1.3 药敏试验的方法和判定标准 采用K-B法[1]，按NCCLS每年公布的标准进行判定。
1.4 试验保证 每批药敏纸片用标准菌株(购自卫生部临检中心)ATCC25922(大肠杆菌)、ATCC25923(金黄色葡萄球菌)、ATCC27853(铜绿假单胞菌)测定抑菌环直径，符合要求方可使用。每周用标准菌株ATCC25922测定抑制菌环直径，符合要求，纸片继续使用。
1.5 结果分析 采用“WHONET4”软件进行结果的录入和统计分析，耐药率变化用x2检验，耐药趋势用平均抑菌环直径及不同抑菌环直径分布折线图进行分析。
2 结果
2.1 大肠杆菌在1995年～1998年对几类抗生素耐药率的变化情况，见表1。
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表1 大肠杆菌对几类抗生素的耐药率(%) 年份
庆大霉素
丁胺卡那
先锋Ⅴ
头孢呋欣
头孢哌酮
氨苄西林
氟哌酸
1995
36.7
12.2
46.7
47.8
, http://www.100md.com
21.2
87.5
61.2
1996
41.8
26.9
22.9
22.4
18.2
88.0
60.7
1997
52.6
, 百拇医药
11.9
45.5
45.9
29.0
100
56.7
1998
48.3
4.5
28.6
33.3
28.6
90.6
, 百拇医药
63.1
经x2检验，1995年～1998年4年间变化无显著性意义(P>0.05)的有庆大霉素、先锋Ⅴ、头孢呋欣、头孢哌酮、氨苄西林、氟哌酸；耐药率变化有显著性意义(P<0.05)的是丁胺卡那，其中1998年耐药率较1996年显著下降(P<0.05)。
2.2 大肠杆菌在1995年～1998年对常用抗生素平均抑菌环直径变化情况，见表2。
表2 大肠杆菌对几类抗生素抑菌环平均直径(mm)变化情况
年份
庆大霉素
丁胺卡那
先锋Ⅴ
, http://www.100md.com
头孢呋欣
头孢哌酮
氨苄西林
氟哌酸
1995
15.4
20.8
15.3
13.7
24.2
9.8
15.9
1996
, http://www.100md.com
16.3
19.6
11.6
18.1
24.2
8.9
15.1
1997
15.2
20.8
15.6
16.9
23.1
, 百拇医药
6.5
17.0
1998
14.1
21.3
16.0
17.2
22.9
8.2
14.9
2.3 先锋必抑菌环直径分布折线图
图1 先锋必抑菌环直径分布折线图
, http://www.100md.com
2.4 丁胺卡那抑菌环直径分布折线图
图2 丁胺卡那抑菌环直径分布折线图
3 讨论
3.1 目前，细菌耐药性变化的临床研究多从耐药率入手，通过耐药率的变化阐明耐药性的变化，而很少考虑细菌抑菌环直径的量变问题。事实上同为敏感结果，其抑菌环直径可以有很大的差异，在细菌敏感率未变的情况下，其抑菌环直径的分布可能已有较大的变化。因此，抑菌环直径分布的变化，可以比耐药率更早地反映耐药性的变化。微机及“WHONET4”软件的应用，使我们能方便地对抑菌环直径变化进行分析。本文不仅分析了细菌耐药率的变化，还详细分析了先锋必及丁胺卡那抑菌环直径变化，以期说明抑菌环直径变化的分析方法。
3.2 表1显示，1995年～1998年4年间，大肠杆菌对庆大霉素、先锋Ⅴ、头孢呋欣、头孢哌酮、氨苄西林及氟哌酸耐药率变化无显著意义，庆大霉素、先锋Ⅴ、头孢呋欣、头孢哌酮的耐药率分别为48.3%、28.6%、33.3%、28.6%，临床有继续使用的价值。氨苄西林、氟哌酸耐药率分别高达90.6%和63.1%，临床已无继续使用的价值，应采取措施，如强行停用半年或一年，待其耐药率降低后，再行使用，众多文献[2、3]认为这与该抗生素长期大量使用有关。丁胺卡那1995年～1998年的耐药率分别是12.2%、26.9%、11.9%和4.5%，其中1996年与1998年的变化有显著性差异，呈下降趋势。这可能与头孢类、亚氨硫霉素类及其他广谱抗生素的大量应用有关，减少了细菌对丁胺卡那的选择压力，使其耐药率呈现降低的变化。丁胺卡那对大肠杆菌感染的治疗，在考虑肾毒和耳毒的情况下应视为首选。
, 百拇医药
3.3 从表2可以看出大肠杆菌对庆大霉素、先锋Ⅴ、头孢呋欣、氟哌酸抑菌环的平均直径处于该抗生素的临界值范围。它们的耐药率均小于50%且变化无显著性差异，但其耐药性呈不断积累的趋势，一旦其耐药性积累达到一定程度将变为耐药菌株。因此，临床上虽有继续使用的价值，但宜少选用，以减少该菌的耐药性积累。氨苄西林平均抑菌环直径小于10mm，临床上不应继续使用该抗生素治疗大肠杆菌引起的感染。丁胺卡那、头孢哌酮的平均抑菌直径均大于其临界值，特别是丁胺卡那的平均抑菌环直径略有增加的趋势，这与表1耐药率变化一致，而头孢哌酮的平均抑菌环直径略有降低的趋势，这与表1的耐药率变化有一定的差异，对于丁胺卡那和头孢哌酮我们将作进一步探讨。
3.4 头孢三代用于大肠杆菌感染的治疗，国外以头孢他啶最为常用，国内以头孢噻肟最为常用，而我院以先锋必较为常用。大肠杆菌对头孢三代耐药提示有ESBLs的可能[4]，为此我们对头孢哌酮进行了细致的分析。表2显示平均抑菌环直径略有下降，图1显示抑菌环直径在12～15mm，21～23mm呈增加趋势，6～8mm、27～29mm、30～32mm呈降低趋势，总的有向左移的趋势。结合表1、2，说明虽然耐药率变化无显著意义，但有耐药性的积累，这也暗示大肠杆菌产生ESBLs的可能性增加[4、5]，应引起重视。
, 百拇医药
3.5 丁胺卡那为氨基甙类的代表药物，庆大霉素同为氨基糖甙类，但其耐药率明显高于丁胺卡那，这是因为丁胺卡那对细菌产生的纯化酶稳定，大多数庆大霉素耐药的菌株仍敏感[6]。表2的平均抑菌环直径增加和表1说明其耐药率存在降低的趋势，图2中，抑菌环直径在6～8、15～16、20～22mm降低趋势和23～25、26～28mm升高也得出同样的结论，其抑菌环直径总的有向右移的趋势。因此，临床上在考虑其耐药性降低的情况下，应合理应用，以避免耐药性的积累而产生耐药菌株。
总之，对于细菌耐药性的监测和分析，我们不仅可以分析耐药率，也可以分析其平均抑菌环直径变化和不同抑菌环直径的变化，从而更早地揭示细菌耐药性的变化趋势。
参考文献
1，叶应妩，王毓三主编.全国临床检验操作规程.第一版.第二版.东南大学出版社出版
, 百拇医药 2，黄家权，高美英.大肠杆菌耐药现状与耐药质粒分析.中华传染病杂志，1996，5：70
3，张风凯，金沙鸿，吴钰，等.北京地区部分医院细菌对常用抗生素耐药性现状及变迁.中华医学杂志，1997，5：327
4，许锦民，苏丹红.大肠杆菌和克雷伯菌属产ESBL的检测.中华医学检验，1998，11：373
5，肖清华，汪能平，赖福才，等.医院感染产酶革蓝氏阴性杆菌β-内酰胺酶的分型研究.中国抗生素杂志，1998，1：74
6，戴自主编.实用抗菌药物学.上海科学技术出版社出版, 百拇医药
单位：(重庆医科大学第二医院检验科 400010)
关键词：WHONET4；大肠杆菌；耐药性
重庆医学000304 摘 要 目的 利用“WHONET4”软件监测大肠杆菌对几类常用抗生素在1995年～1998年4年间耐药性的变迁。方法 采用常规鉴定技术鉴定细菌，K-B法测定抑菌环直径，利用“WHONET4”软件对结果进行录入和分析。结果 大肠杆菌对丁胺卡那在1996年和1998年的耐药率有显著差异(P<0.05)，丁胺卡那其他年份的耐药率及其他六种抗生素各年份间的耐药率无显著性意义(P>0.05)。庆大霉素、先锋Ⅴ、头孢呋欣、先锋必的耐药率分别为48.3%、28.6%、33.3%、28.6%，临床可继续使用。氨苄青霉素、氟哌酸的耐药率高达90.6%和63.1%，临床已不宜使用。丁胺卡那耐药性有逐年降低的趋势，庆大霉素、先锋Ⅴ、头孢呋欣、先锋必耐药性有逐年积累的趋势。结论 抑菌环直径变化比耐药率变化更能反映细菌耐药性及变化趋势。
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Study of Resistance and its Resistant Trend of E. coll
Huamg Changwu Chen Weixian Tang Bo Yang Xiuying
(Department of examination,the Second College of Clinical Wedicine S the Second Affiliated Hospital of Chongqing Medical University. Chongqing, 400010)
Abstract Objective:This article is trying to study the change of resistance of E. coli to several common antibiotics by the software of whonet4. Methods:The bacteria were identified by routine techniques, the diameters of bacteria inhibiting loops were determined by K-B method, and data were sorted and analyzed by whonet4. Results:To amikacin, the resistant rate of E. coli had changed significantly in 1996 and 1998 (P<0.05). But in the other years it hadn't. The changes of resistant rate of gentamicin, cefazolin, cefuroxime, cefoperazone had no significance in the four years. The mean resistant rate of them were 48.3%,28.6%, 33.3%, 28.6%, so they can still be used in clinic. But resistant rate of ampicllin and norfloxacin arrived at 90.6% and 63.1%, they should be used controlledly. The resistance of amikacin decreased yearly, while the resistance of gentamicin, cefazolin, cefuroxime, cefoperazone have accumulating trends. Conclusion:The diameter of bacteria inhibiting loop is more sensitive than resistant rate to reflect resistance change and its trend.
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Key words:Whonet4 E.coli Resistance
大肠杆菌是临床分离的最常见细菌之一，为临床主要的致病菌。由于抗生素长期、大量使用和不合理使用，导致大肠杆菌的耐药菌株越来越多，特别是耐三代头饱产超广谱β一内酰胺酶(HSBLs)的大肠杆菌，给临床治疗带来了很大的困难。因此，及时准确地了解大肠杆菌对常用抗生素耐药性变化，给临床提供相应信息，显得愈加重要。利用“WHONET4”软件，统计分析了我院1995年～1998年分离的359株大肠杆菌对常用的氨基糖甙、β一内酰胺类、头孢一代、头孢三代、头孢三代及喹诺酮六类抗生素的代表性药物耐药率及耐药趋势的变化，现报告如下。
1 材料和方法
1.1 试验菌株来源 均来自我院临床微生物室于1995年到1998年分离的大肠杆菌，共359株。
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1.3 药敏试验的方法和判定标准 采用K-B法[1]，按NCCLS每年公布的标准进行判定。
1.4 试验保证 每批药敏纸片用标准菌株(购自卫生部临检中心)ATCC25922(大肠杆菌)、ATCC25923(金黄色葡萄球菌)、ATCC27853(铜绿假单胞菌)测定抑菌环直径，符合要求方可使用。每周用标准菌株ATCC25922测定抑制菌环直径，符合要求，纸片继续使用。
1.5 结果分析 采用“WHONET4”软件进行结果的录入和统计分析，耐药率变化用x2检验，耐药趋势用平均抑菌环直径及不同抑菌环直径分布折线图进行分析。
2 结果
2.1 大肠杆菌在1995年～1998年对几类抗生素耐药率的变化情况，见表1。
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表1 大肠杆菌对几类抗生素的耐药率(%) 年份
庆大霉素
丁胺卡那
先锋Ⅴ
头孢呋欣
头孢哌酮
氨苄西林
氟哌酸
1995
36.7
12.2
46.7
47.8
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21.2
87.5
61.2
1996
41.8
26.9
22.9
22.4
18.2
88.0
60.7
1997
52.6
, 百拇医药
11.9
45.5
45.9
29.0
100
56.7
1998
48.3
4.5
28.6
33.3
28.6
90.6
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63.1
经x2检验，1995年～1998年4年间变化无显著性意义(P>0.05)的有庆大霉素、先锋Ⅴ、头孢呋欣、头孢哌酮、氨苄西林、氟哌酸；耐药率变化有显著性意义(P<0.05)的是丁胺卡那，其中1998年耐药率较1996年显著下降(P<0.05)。
2.2 大肠杆菌在1995年～1998年对常用抗生素平均抑菌环直径变化情况，见表2。
表2 大肠杆菌对几类抗生素抑菌环平均直径(mm)变化情况
年份
庆大霉素
丁胺卡那
先锋Ⅴ
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头孢呋欣
头孢哌酮
氨苄西林
氟哌酸
1995
15.4
20.8
15.3
13.7
24.2
9.8
15.9
1996
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16.3
19.6
11.6
18.1
24.2
8.9
15.1
1997
15.2
20.8
15.6
16.9
23.1
, 百拇医药
6.5
17.0
1998
14.1
21.3
16.0
17.2
22.9
8.2
14.9
2.3 先锋必抑菌环直径分布折线图
图1 先锋必抑菌环直径分布折线图
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2.4 丁胺卡那抑菌环直径分布折线图
图2 丁胺卡那抑菌环直径分布折线图
3 讨论
3.1 目前，细菌耐药性变化的临床研究多从耐药率入手，通过耐药率的变化阐明耐药性的变化，而很少考虑细菌抑菌环直径的量变问题。事实上同为敏感结果，其抑菌环直径可以有很大的差异，在细菌敏感率未变的情况下，其抑菌环直径的分布可能已有较大的变化。因此，抑菌环直径分布的变化，可以比耐药率更早地反映耐药性的变化。微机及“WHONET4”软件的应用，使我们能方便地对抑菌环直径变化进行分析。本文不仅分析了细菌耐药率的变化，还详细分析了先锋必及丁胺卡那抑菌环直径变化，以期说明抑菌环直径变化的分析方法。
3.2 表1显示，1995年～1998年4年间，大肠杆菌对庆大霉素、先锋Ⅴ、头孢呋欣、头孢哌酮、氨苄西林及氟哌酸耐药率变化无显著意义，庆大霉素、先锋Ⅴ、头孢呋欣、头孢哌酮的耐药率分别为48.3%、28.6%、33.3%、28.6%，临床有继续使用的价值。氨苄西林、氟哌酸耐药率分别高达90.6%和63.1%，临床已无继续使用的价值，应采取措施，如强行停用半年或一年，待其耐药率降低后，再行使用，众多文献[2、3]认为这与该抗生素长期大量使用有关。丁胺卡那1995年～1998年的耐药率分别是12.2%、26.9%、11.9%和4.5%，其中1996年与1998年的变化有显著性差异，呈下降趋势。这可能与头孢类、亚氨硫霉素类及其他广谱抗生素的大量应用有关，减少了细菌对丁胺卡那的选择压力，使其耐药率呈现降低的变化。丁胺卡那对大肠杆菌感染的治疗，在考虑肾毒和耳毒的情况下应视为首选。
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3.3 从表2可以看出大肠杆菌对庆大霉素、先锋Ⅴ、头孢呋欣、氟哌酸抑菌环的平均直径处于该抗生素的临界值范围。它们的耐药率均小于50%且变化无显著性差异，但其耐药性呈不断积累的趋势，一旦其耐药性积累达到一定程度将变为耐药菌株。因此，临床上虽有继续使用的价值，但宜少选用，以减少该菌的耐药性积累。氨苄西林平均抑菌环直径小于10mm，临床上不应继续使用该抗生素治疗大肠杆菌引起的感染。丁胺卡那、头孢哌酮的平均抑菌直径均大于其临界值，特别是丁胺卡那的平均抑菌环直径略有增加的趋势，这与表1耐药率变化一致，而头孢哌酮的平均抑菌环直径略有降低的趋势，这与表1的耐药率变化有一定的差异，对于丁胺卡那和头孢哌酮我们将作进一步探讨。
3.4 头孢三代用于大肠杆菌感染的治疗，国外以头孢他啶最为常用，国内以头孢噻肟最为常用，而我院以先锋必较为常用。大肠杆菌对头孢三代耐药提示有ESBLs的可能[4]，为此我们对头孢哌酮进行了细致的分析。表2显示平均抑菌环直径略有下降，图1显示抑菌环直径在12～15mm，21～23mm呈增加趋势，6～8mm、27～29mm、30～32mm呈降低趋势，总的有向左移的趋势。结合表1、2，说明虽然耐药率变化无显著意义，但有耐药性的积累，这也暗示大肠杆菌产生ESBLs的可能性增加[4、5]，应引起重视。
, 百拇医药
3.5 丁胺卡那为氨基甙类的代表药物，庆大霉素同为氨基糖甙类，但其耐药率明显高于丁胺卡那，这是因为丁胺卡那对细菌产生的纯化酶稳定，大多数庆大霉素耐药的菌株仍敏感[6]。表2的平均抑菌环直径增加和表1说明其耐药率存在降低的趋势，图2中，抑菌环直径在6～8、15～16、20～22mm降低趋势和23～25、26～28mm升高也得出同样的结论，其抑菌环直径总的有向右移的趋势。因此，临床上在考虑其耐药性降低的情况下，应合理应用，以避免耐药性的积累而产生耐药菌株。
总之，对于细菌耐药性的监测和分析，我们不仅可以分析耐药率，也可以分析其平均抑菌环直径变化和不同抑菌环直径的变化，从而更早地揭示细菌耐药性的变化趋势。
参考文献
1，叶应妩，王毓三主编.全国临床检验操作规程.第一版.第二版.东南大学出版社出版
, 百拇医药 2，黄家权，高美英.大肠杆菌耐药现状与耐药质粒分析.中华传染病杂志，1996，5：70
3，张风凯，金沙鸿，吴钰，等.北京地区部分医院细菌对常用抗生素耐药性现状及变迁.中华医学杂志，1997，5：327
4，许锦民，苏丹红.大肠杆菌和克雷伯菌属产ESBL的检测.中华医学检验，1998，11：373
5，肖清华，汪能平，赖福才，等.医院感染产酶革蓝氏阴性杆菌β-内酰胺酶的分型研究.中国抗生素杂志，1998，1：74
6，戴自主编.实用抗菌药物学.上海科学技术出版社出版, 百拇医药