山楂化学成分的研究
作者：时岩鹏 丁杏苞
单位：山东省医学科学院药物研究所 济南 250062
关键词：
中草药000307 山楂为蔷微科山楂属植物山里红Crataegus pinnatifida Bge.var.majcr N.E.Br.及大果山楂C.pinnatifida Bge.或野山楂C.cuneata Sieb.et Zucc.的干燥成熟果实。主要功能为消食健胃、行气散瘀，用于肉食积滞、胃脘胀满、泻痢腹痛、瘀血经闭、产后瘀阻、心腹刺痛、疝气瘀痛、高血脂症等。近年来，用其治疗心血管方面疾病的研究较多。其化学成分主要有三萜和黄酮两大类，尤其以黄酮类研究较多。为开发山东的山楂资源，我们对山东产山里红进行了系统的化学成分研究。从其干燥成熟果实中分离得到化合物12 个，经过理化性质、光谱的测定，与标准图谱或标准品比较等方法鉴定为正三十一烷(hentriacontane,I)、十六烷酸二十八烷醇酯(hexadecanoic acid,octaconsyl ester,Ⅲ)、二十烷酸三十八烷醇酯(eicosanoic acid,octatriacontyl ester,Ⅲ)、廿十九烷醇-10(nonacosan-10-ol,Ⅳ)、β-谷甾醇(β-sitosterol,Ⅴ)、熊果酸(ursolic acid,Ⅵ)、桦皮醇(betulin,Ⅶa)、熊果醇(urs-12-ene-3β,28-diol,Ⅶb)、双-[5-甲酰基-糠基]醚[bis-(5-formyl-furfuryl)-ether,Ⅷ]、胡萝卜苷(daucosterol,Ⅸ)、槲皮素(quercetin,Ⅹ)、金丝桃苷(hyperin,Ⅺ)、牡荆素(vitexin,Ⅻ)。其中化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶa、Ⅶb均为首次从该属植物中分离得到。
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1 仪器和试剂
熔点用XPR-2型熔点偏光显微镜测定，温度计未校正；紫外光谱用PU-8800型分光光度仪测定；红外光谱用Perkin-Elmer 783型红外光谱仪测定，KBr压片；核磁共振光谱用ACF-300型核磁共振仪测定；质谱用DMS-DX 300 型质谱仪测定。薄层层析及柱层析用硅胶，均为青岛海洋化工厂产品。
2 提取和分离
市售的干燥山楂果切片10 kg，分次置于索氏提取器中，以乙醇回流提取20 h。回收乙醇得浓浸膏，浓浸膏中加入适量蒸馏水混匀后依次用石油醚，氯仿萃取，分别回收后，得石油醚部分约250 g。氯仿部分70 g。余下水部分用硅胶拌样，干燥后置于索氏提取器中依次用丙酮、乙醇回流提取，丙酮提取液回收后得丙酮提取物约1 000 g。乙醇提取液回收后得乙醇提取物约800 g。
石油醚部分经多次硅胶柱层析，石油醚-丙酮、石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，薄层层析检测，相同流份合并，得晶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶa及Ⅶb。
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氯仿部分经多次硅胶柱析，石油醚-丙酮梯度洗脱，薄层层析检控，得晶Ⅷ、Ⅸ。
丙酮部分经多次硅胶柱层析，氯仿-甲醇梯度洗脱，薄层层析检控，得晶Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ。
3 鉴定
化合物Ⅰ：白色鳞片状晶体，mp58 ℃～60 ℃，IR，EIMS数据与文献〔1〕报道的正三十一烷数据基本一致，因此化合物Ⅰ推定为正三十一烷。
化合物Ⅱ：白色鳞片状晶体，mp60 ℃～61 ℃，质谱裂解具有长链酯类的裂解规律〔2〕，而且与同类化合物IR光谱比较一致〔3〕。根据以上数据，化合物Ⅱ推定为十六烷酸二十八烷醇酯。
化合物Ⅲ：白色粉末，mp76 ℃～77 ℃，质谱裂解具有长链酯类的裂解规律〔2〕，而且与同类化合物IR光谱比较一致〔3〕。根据以上数据，化合物Ⅲ推定为二十烷酸三十八烷醇酯。
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化合物Ⅳ：白色针状结晶，mp77 ℃～78 ℃，其IR、EIMS数据与文献〔4〕报道的廿十九烷醇-10的数据基本一致，因此化合物Ⅳ推定为廿十九烷醇-10。
化合物Ⅴ：白色针状结晶，mp134 ℃～136 ℃，IRνKBrmax cm-1：3 435， 2 960，2 867，1 629，1 465，1 376。与已知化合物β-谷甾醇红外光谱及标准图谱〔5〕基本一致，且与已知共薄层层析只显示一个斑点，因此推定化合物Ⅴ为β-谷甾醇。
化合物Ⅵ：白色针状结晶，mp260 ℃～262 ℃，IRνKBrmax cm-1：3 429， 2 928，2 871，1 698，1 455，1 387，1 377，1 360，1 326，1 312，1 284，1 030，661；EIMS m/z：456(M+，C30H48O3)，438，410，248，208，207，203，190，189，175，133。13CNMR谱数据与文献报道〔6〕的熊果酸数据基本一致，因此推定化合物Ⅵ为熊果酸。
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化合物Ⅶ：白色粉末，mp206 ℃，IRνKBrmax cm-1：3 421， 2 943，2 868，1 641，1 456，1 388，1 376，1 247，1 028；EI-MS m/z：442(M+，C30H48O2)，234，204，203(基峰)，189，133，119，107，95，81，69，55，41；13CNMR谱出现46个峰(部分峰重叠)推测可能为2个三萜化合物的混合物，而且由109.70、150.46、125.06、138.30两对双键判断化合物Ⅶ为一个羽扇豆烷型三萜和一个乌苏烷型三萜的混合物且极性相近。经与已知化合物比较，化合物Ⅶ的碳谱数据与桦皮醇[7]和熊果醇〔8〕的碳谱基本一致，结合质谱裂解碎片〔9〕，推定化合物Ⅶ为桦皮醇和熊果醇的混合物。
化合物Ⅷ：淡黄色针晶，mp108 ℃～110 ℃，其UV、IR、MS、1H，13CNMR数据与文献〔10〕报道的双-[5-甲酰基-糠基]醚基本一致，因此推定化合物Ⅷ为双-[5-甲酰基-糠基]醚。
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化合物Ⅸ：白色结晶，mp270 ℃～272 ℃，与已知化合物胡萝卜苷红外光谱〔11〕对照基本一致，与之共薄层只显示一个斑点，因此推定化合物Ⅸ为胡萝卜苷。
化合物Ⅹ：黄色结晶，mp306 ℃～307 ℃，UV、IR、MS、1HNMR数据与文献报道〔12～14〕的槲皮素一致，而且化合物Ⅹ与槲皮素已知品共薄层只显示一个斑点，因此化合物Ⅹ推定为槲皮素。
化合物Ⅺ：淡黄色针晶，mp230 ℃～232 ℃，其UV、IR、MS、1HNMR光谱数据与文献〔13〕报道的金丝桃苷数据基本一致，而且晶Ⅺ与金丝桃苷已知品共薄层只显示一个斑点，经2 mol/L盐酸水解，EtoAc提取得黄色结晶，mp307 ℃～309 ℃，薄层层析苷元为槲皮素，糖为半乳糖，因此推定化合物Ⅺ为金丝桃苷。
化合物Ⅻ：黄色结晶，mp235 ℃～236 ℃，UVλMeOHmax nm：331，270；加NaOAc为394，330，279；加AlCl3为385(sh)，350，305，278；加AlCl3/HCl为382(sh)，343，304，278，加NaOAC为351，302(sh)，275；加NaOAC/H3BO3为338，271；IRνKBrmax cm-1：3 400～3 300， 1 655，1 610，1 510，1 360，1 295，1 180，1HNMR(DMSO-d6，TMS) δ：3.04～4.20(6H，m，葡萄糖C2～C6的6个H)，4.10(1H，d，J=10 Hz，葡萄糖1-H)，6.30(1H，s，6-H)，6.80(1H，s，3-H)，6.9(2H，d，J=8 Hz，3′，5′-2H)，8.09(2H，d，J=8 Hz，2′，6′-2H)，10.40(1H，s，4′-OH)，10.88(1H，s，7-H)，13.20(1H，s，5-OH)，后三个峰加F3CCOO11后消失；FD-MS m/z：414，396，378，284，283(基峰)，270，165，121，118。IR、UV、1HNMR、MS数据与文献〔15〕报道的牡荆素基本一致，而且化合物Ⅻ与牡荆素已知品共薄层只显示一个斑点，因此推定化合物Ⅻ为牡荆素。
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致谢：中国医学科学院药物研究所国家药物与代谢产物分析测试中心，金陵石化分析测试中心，山东医科大学药学系中心实验室分别代测质谱，核磁共振动和红外光谱。
参考文献
1，The Sadtler Standard Spectra Infrared Spectrum Prism 45743
2，洪山海，等.光谱解析在有机化学中的应用.北京：科学出版社，1980：294
3，Sadtler Research Labonatories Inc: Standard Infrared Grating Spectra,Vol 27-28，2721TK，1974
4，罗士德.药学学报，1982，17(9)：699
, 百拇医药
5，The Sadtler Standard Spectra Standard Infrared Spectra Prism 74913
6，Seo S et al.Tetrahedron Lett,1975：7
7，陈德昌编著.碳谱及其在中草药化学中的应用，北京：人民卫生出版社，1991：322
8，孟正木，等.中国药科大学学报，1995，26(6)：329
9，刘卫国，等.南京药学院学报，1985，16(4)：69
10，张涵庆，等.植物学报，1987，29(4)：429
11，周 俊，等.植物学报，1983，25(6)：568
12，中国科学院上海药物研究所植物化学研究室.黄酮体化合物鉴定手册.北京：科学出版社，1981：479
13，谢玉如，等.植物学报，1981，23(9)：383
14，郭洁长，等.河南医科大学学报，1992，27(4)：312
15，董英杰，等.沈阳药科大学学报，1998，13(1)：31，72
(收稿日期：1999-12-25), http://www.100md.com
单位：山东省医学科学院药物研究所 济南 250062
关键词：
中草药000307 山楂为蔷微科山楂属植物山里红Crataegus pinnatifida Bge.var.majcr N.E.Br.及大果山楂C.pinnatifida Bge.或野山楂C.cuneata Sieb.et Zucc.的干燥成熟果实。主要功能为消食健胃、行气散瘀，用于肉食积滞、胃脘胀满、泻痢腹痛、瘀血经闭、产后瘀阻、心腹刺痛、疝气瘀痛、高血脂症等。近年来，用其治疗心血管方面疾病的研究较多。其化学成分主要有三萜和黄酮两大类，尤其以黄酮类研究较多。为开发山东的山楂资源，我们对山东产山里红进行了系统的化学成分研究。从其干燥成熟果实中分离得到化合物12 个，经过理化性质、光谱的测定，与标准图谱或标准品比较等方法鉴定为正三十一烷(hentriacontane,I)、十六烷酸二十八烷醇酯(hexadecanoic acid,octaconsyl ester,Ⅲ)、二十烷酸三十八烷醇酯(eicosanoic acid,octatriacontyl ester,Ⅲ)、廿十九烷醇-10(nonacosan-10-ol,Ⅳ)、β-谷甾醇(β-sitosterol,Ⅴ)、熊果酸(ursolic acid,Ⅵ)、桦皮醇(betulin,Ⅶa)、熊果醇(urs-12-ene-3β,28-diol,Ⅶb)、双-[5-甲酰基-糠基]醚[bis-(5-formyl-furfuryl)-ether,Ⅷ]、胡萝卜苷(daucosterol,Ⅸ)、槲皮素(quercetin,Ⅹ)、金丝桃苷(hyperin,Ⅺ)、牡荆素(vitexin,Ⅻ)。其中化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶa、Ⅶb均为首次从该属植物中分离得到。
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1 仪器和试剂
熔点用XPR-2型熔点偏光显微镜测定，温度计未校正；紫外光谱用PU-8800型分光光度仪测定；红外光谱用Perkin-Elmer 783型红外光谱仪测定，KBr压片；核磁共振光谱用ACF-300型核磁共振仪测定；质谱用DMS-DX 300 型质谱仪测定。薄层层析及柱层析用硅胶，均为青岛海洋化工厂产品。
2 提取和分离
市售的干燥山楂果切片10 kg，分次置于索氏提取器中，以乙醇回流提取20 h。回收乙醇得浓浸膏，浓浸膏中加入适量蒸馏水混匀后依次用石油醚，氯仿萃取，分别回收后，得石油醚部分约250 g。氯仿部分70 g。余下水部分用硅胶拌样，干燥后置于索氏提取器中依次用丙酮、乙醇回流提取，丙酮提取液回收后得丙酮提取物约1 000 g。乙醇提取液回收后得乙醇提取物约800 g。
石油醚部分经多次硅胶柱层析，石油醚-丙酮、石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，薄层层析检测，相同流份合并，得晶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶa及Ⅶb。
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氯仿部分经多次硅胶柱析，石油醚-丙酮梯度洗脱，薄层层析检控，得晶Ⅷ、Ⅸ。
丙酮部分经多次硅胶柱层析，氯仿-甲醇梯度洗脱，薄层层析检控，得晶Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ。
3 鉴定
化合物Ⅰ：白色鳞片状晶体，mp58 ℃～60 ℃，IR，EIMS数据与文献〔1〕报道的正三十一烷数据基本一致，因此化合物Ⅰ推定为正三十一烷。
化合物Ⅱ：白色鳞片状晶体，mp60 ℃～61 ℃，质谱裂解具有长链酯类的裂解规律〔2〕，而且与同类化合物IR光谱比较一致〔3〕。根据以上数据，化合物Ⅱ推定为十六烷酸二十八烷醇酯。
化合物Ⅲ：白色粉末，mp76 ℃～77 ℃，质谱裂解具有长链酯类的裂解规律〔2〕，而且与同类化合物IR光谱比较一致〔3〕。根据以上数据，化合物Ⅲ推定为二十烷酸三十八烷醇酯。
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化合物Ⅳ：白色针状结晶，mp77 ℃～78 ℃，其IR、EIMS数据与文献〔4〕报道的廿十九烷醇-10的数据基本一致，因此化合物Ⅳ推定为廿十九烷醇-10。
化合物Ⅴ：白色针状结晶，mp134 ℃～136 ℃，IRνKBrmax cm-1：3 435， 2 960，2 867，1 629，1 465，1 376。与已知化合物β-谷甾醇红外光谱及标准图谱〔5〕基本一致，且与已知共薄层层析只显示一个斑点，因此推定化合物Ⅴ为β-谷甾醇。
化合物Ⅵ：白色针状结晶，mp260 ℃～262 ℃，IRνKBrmax cm-1：3 429， 2 928，2 871，1 698，1 455，1 387，1 377，1 360，1 326，1 312，1 284，1 030，661；EIMS m/z：456(M+，C30H48O3)，438，410，248，208，207，203，190，189，175，133。13CNMR谱数据与文献报道〔6〕的熊果酸数据基本一致，因此推定化合物Ⅵ为熊果酸。
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化合物Ⅶ：白色粉末，mp206 ℃，IRνKBrmax cm-1：3 421， 2 943，2 868，1 641，1 456，1 388，1 376，1 247，1 028；EI-MS m/z：442(M+，C30H48O2)，234，204，203(基峰)，189，133，119，107，95，81，69，55，41；13CNMR谱出现46个峰(部分峰重叠)推测可能为2个三萜化合物的混合物，而且由109.70、150.46、125.06、138.30两对双键判断化合物Ⅶ为一个羽扇豆烷型三萜和一个乌苏烷型三萜的混合物且极性相近。经与已知化合物比较，化合物Ⅶ的碳谱数据与桦皮醇[7]和熊果醇〔8〕的碳谱基本一致，结合质谱裂解碎片〔9〕，推定化合物Ⅶ为桦皮醇和熊果醇的混合物。
化合物Ⅷ：淡黄色针晶，mp108 ℃～110 ℃，其UV、IR、MS、1H，13CNMR数据与文献〔10〕报道的双-[5-甲酰基-糠基]醚基本一致，因此推定化合物Ⅷ为双-[5-甲酰基-糠基]醚。
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化合物Ⅸ：白色结晶，mp270 ℃～272 ℃，与已知化合物胡萝卜苷红外光谱〔11〕对照基本一致，与之共薄层只显示一个斑点，因此推定化合物Ⅸ为胡萝卜苷。
化合物Ⅹ：黄色结晶，mp306 ℃～307 ℃，UV、IR、MS、1HNMR数据与文献报道〔12～14〕的槲皮素一致，而且化合物Ⅹ与槲皮素已知品共薄层只显示一个斑点，因此化合物Ⅹ推定为槲皮素。
化合物Ⅺ：淡黄色针晶，mp230 ℃～232 ℃，其UV、IR、MS、1HNMR光谱数据与文献〔13〕报道的金丝桃苷数据基本一致，而且晶Ⅺ与金丝桃苷已知品共薄层只显示一个斑点，经2 mol/L盐酸水解，EtoAc提取得黄色结晶，mp307 ℃～309 ℃，薄层层析苷元为槲皮素，糖为半乳糖，因此推定化合物Ⅺ为金丝桃苷。
化合物Ⅻ：黄色结晶，mp235 ℃～236 ℃，UVλMeOHmax nm：331，270；加NaOAc为394，330，279；加AlCl3为385(sh)，350，305，278；加AlCl3/HCl为382(sh)，343，304，278，加NaOAC为351，302(sh)，275；加NaOAC/H3BO3为338，271；IRνKBrmax cm-1：3 400～3 300， 1 655，1 610，1 510，1 360，1 295，1 180，1HNMR(DMSO-d6，TMS) δ：3.04～4.20(6H，m，葡萄糖C2～C6的6个H)，4.10(1H，d，J=10 Hz，葡萄糖1-H)，6.30(1H，s，6-H)，6.80(1H，s，3-H)，6.9(2H，d，J=8 Hz，3′，5′-2H)，8.09(2H，d，J=8 Hz，2′，6′-2H)，10.40(1H，s，4′-OH)，10.88(1H，s，7-H)，13.20(1H，s，5-OH)，后三个峰加F3CCOO11后消失；FD-MS m/z：414，396，378，284，283(基峰)，270，165，121，118。IR、UV、1HNMR、MS数据与文献〔15〕报道的牡荆素基本一致，而且化合物Ⅻ与牡荆素已知品共薄层只显示一个斑点，因此推定化合物Ⅻ为牡荆素。
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致谢：中国医学科学院药物研究所国家药物与代谢产物分析测试中心，金陵石化分析测试中心，山东医科大学药学系中心实验室分别代测质谱，核磁共振动和红外光谱。
参考文献
1，The Sadtler Standard Spectra Infrared Spectrum Prism 45743
2，洪山海，等.光谱解析在有机化学中的应用.北京：科学出版社，1980：294
3，Sadtler Research Labonatories Inc: Standard Infrared Grating Spectra,Vol 27-28，2721TK，1974
4，罗士德.药学学报，1982，17(9)：699
, 百拇医药
5，The Sadtler Standard Spectra Standard Infrared Spectra Prism 74913
6，Seo S et al.Tetrahedron Lett,1975：7
7，陈德昌编著.碳谱及其在中草药化学中的应用，北京：人民卫生出版社，1991：322
8，孟正木，等.中国药科大学学报，1995，26(6)：329
9，刘卫国，等.南京药学院学报，1985，16(4)：69
10，张涵庆，等.植物学报，1987，29(4)：429
11，周 俊，等.植物学报，1983，25(6)：568
12，中国科学院上海药物研究所植物化学研究室.黄酮体化合物鉴定手册.北京：科学出版社，1981：479
13，谢玉如，等.植物学报，1981，23(9)：383
14，郭洁长，等.河南医科大学学报，1992，27(4)：312
15，董英杰，等.沈阳药科大学学报，1998，13(1)：31，72
(收稿日期：1999-12-25), http://www.100md.com
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