他莫昔芬逆转低氧性肺动脉高压的作用机制
作者：林勇 陈文彬 程德云 肖欣荣
单位：林勇(南京铁道医学院第一附属医院呼吸内科，210009)；陈文彬 程德云 肖欣荣(华西医科大学附属第一医院呼吸内科 610041 成都)
关键词：
中华医学杂志000332 低氧性肺动脉高压(HPH)的形成过程包括低氧性肺血管收缩和低氧性肺血管重建。前者为早期可逆性病变，后者主要表现为肺小动脉壁中膜平滑肌细胞增生肥厚，管腔狭窄，可逆性较差[1]。已知胰岛素样生长因子-1(IGF-1)可刺激血管平滑肌细胞生长，引起管壁增厚和管腔狭窄[2]。近来研究显示，他莫昔芬(tamoxifen，TAM)可阻抑靶细胞产生IGF-1[3]。本研究采用TAM处理HPH大鼠，观察其对低氧大鼠肺小动脉壁IGF-1表达和血清IGF-1水平的影响，旨在探讨TAM对HPH的防治效应与作用机制。
, http://www.100md.com
一、材料与方法
1. 动物：雄性Wistar大鼠50只均分为5组，分别采用下列方法处理：正常对照组：10只。TAM预防实验：20只，分为2组。(1)预防实验组10只，进行低氧处理，每天低氧前采用灌胃法灌服TAM 10 mg/kg，TAM用生理盐水2 ml稀释。共3周。(2)预防对照组10只，单纯进行低氧处理，每天低氧前灌服2 ml生理盐水，共3周。
2.TAM治疗实验：20只大鼠，先进行低氧处理，3周后停止低氧处理，分为2组。(1)治疗实验组，每天灌服TAM 10 mg/kg，TAM用生理盐水2 ml稀释，共7 d。(2)治疗对照组：每天灌服生理盐水2 ml，共7 d。
3.HPH大鼠模型按薛全福法[4]制作。经上述方法处理后，以导管法测定平均肺动脉压(mPAP)。然后抽取外周血2 ml备用。随后取右肺组织进行固定、包埋、切片。免疫组织化学染色采用ABC法。ABC试剂盒为美国Vector公司产品，IGF-1单克隆抗体购自Santa Cruz Biotechnology,Int。采用放射免疫法检测血清IGF-1含量，用MIAS 2000型医用图像分析仪(四川大学研制)对免疫组织化学染色切片染色强度进行定量分析。每张切片测量8～10条血管，其均数作为该只大鼠染色强度指标。
, http://www.100md.com
4.统计学处理：采用方差分析及q检验、秩和检验。
二、结果
1. TAM对低氧大鼠mPAP和肺小动脉壁IGF-1的影响结果(见表1)。
2. TAM对低氧大鼠血清IGF-1水平的影响见表2。
表1 TAM对低氧大鼠mPAP、肺小动脉壁
IGF-1的影响(
±s) 组 别
鼠数
mPAP
(mm Hg)
, http://www.100md.com
IGF-1灰度值
正常对照组
10
14.1±2.7
7.3±1.3
预防实验组
10
16.9±2.9*
9.5±1.5*
预防对照组
10
21.2±4.0*△▲
, 百拇医药
15.8±2.0*△▲
治疗实验组
10
17.2±3.0*
11.6±1.9*△
治疗对照组
10
20.2±2.8*
15.2±3.5*△▲
注：与正常对照组比较*P<0.05；与预防实验组比较△P<0.05；与治疗实验组比较▲P<0.05表2 TAM对低氧大鼠血清IGF-1水平的影响 组 别
, 百拇医药
鼠数
P25
(ng/ml)
M
(ng/ml)
P75
(ng/ml)
正常对照组
10
331.80
413.70
485.73
, 百拇医药
预防实验组
10
452.50
552.09
725.92
预防对照组
10
546.00
884.52
938.28
治疗实验组
10
, http://www.100md.com 429.03
521.33
657.62
治疗对照组
10
389.55
623.49
858.90
注：M为中位数，P25为下四分位数，P75为上四分位数，与预防对照组比较，*P<0.05；其余各组间差异无显著意义
三、讨论
, 百拇医药 本实验结果显示，HPH大鼠肺小动脉壁IGF-1多肽的表达和血清IGF-1水平明显增加，说明IGF-1与HPH形成关系密切；并且TAM对于HPH大鼠 mPAP具有明显的预防和治疗作用。本研究发现，TAM对低氧大鼠肺小动脉壁IGF-1多肽的表达具有一定的抑制作用；TAM亦明显降低治疗实验组和预防实验组血清IGF-1水平，二者之间无显著差异。目前认为，TAM降低循环IGF-1水平，主要是通过两种机制，首先通过抑制垂体生长激素的释放[5]，减少肝脏IGF-1基因表达；其次可直接抑制肝脏、肺脏等组织IGF-1的产生[6]，降低循环IGF-1水平。所以，我们认为TAM对HPH的阻抑作用主要是通过减少肺小动脉壁IGF-1的产生、降低循环IGF-1水平和抑制其活性所致，且以抑制肺小动脉壁IGF-1的产生为主。
参考文献：
1 Robert LV. Chronic hypoxic pulmonary hypertension: Cell to pathophysiology. Chest, 1994,106:236-243.
, http://www.100md.com
2 Jensen DE， Rich CB， Terpstra AJ, et al. Transcriptional regulation of the elastin gene by insulin-like growth factor-I involves disruption of Sp1 binding in aortic smooth muscle cells. J Biol Chem, 1995,270:6555-6563.
3 Howe SR, Pass HI, Ethier SP, et al. Presence of an insulin-like growth factor I autocrine loop predicts uterine fibroid responsiveness to tamoxifen. Cancer Res, 1996, 56: 4049-4055.
4 薛全福，谢剑鸣，胡长贵，等.常压低氧性大鼠肺动脉高压模型的建立.中华结核和呼吸杂志，1989，12：350-352.
, http://www.100md.com
5 Tannenbaum GS, Gurd W, Lapointe M, et al. Tamoxifen attenuates pulsatile growth hormone secretion: mediation in part by somoatostatin. Endocrinology, 1992,130:3395-3401.
6 Huynh H, Tetenes E, Wallace L, Pollak M. In Vivo inhibition of insulin-like growth factor gene expression by Tamoxifen. Cancer Res, 1993,53:1727-1730.
收稿日期：1999-08-26, 百拇医药
单位：林勇(南京铁道医学院第一附属医院呼吸内科，210009)；陈文彬 程德云 肖欣荣(华西医科大学附属第一医院呼吸内科 610041 成都)
关键词：
中华医学杂志000332 低氧性肺动脉高压(HPH)的形成过程包括低氧性肺血管收缩和低氧性肺血管重建。前者为早期可逆性病变，后者主要表现为肺小动脉壁中膜平滑肌细胞增生肥厚，管腔狭窄，可逆性较差[1]。已知胰岛素样生长因子-1(IGF-1)可刺激血管平滑肌细胞生长，引起管壁增厚和管腔狭窄[2]。近来研究显示，他莫昔芬(tamoxifen，TAM)可阻抑靶细胞产生IGF-1[3]。本研究采用TAM处理HPH大鼠，观察其对低氧大鼠肺小动脉壁IGF-1表达和血清IGF-1水平的影响，旨在探讨TAM对HPH的防治效应与作用机制。
, http://www.100md.com
一、材料与方法
1. 动物：雄性Wistar大鼠50只均分为5组，分别采用下列方法处理：正常对照组：10只。TAM预防实验：20只，分为2组。(1)预防实验组10只，进行低氧处理，每天低氧前采用灌胃法灌服TAM 10 mg/kg，TAM用生理盐水2 ml稀释。共3周。(2)预防对照组10只，单纯进行低氧处理，每天低氧前灌服2 ml生理盐水，共3周。
2.TAM治疗实验：20只大鼠，先进行低氧处理，3周后停止低氧处理，分为2组。(1)治疗实验组，每天灌服TAM 10 mg/kg，TAM用生理盐水2 ml稀释，共7 d。(2)治疗对照组：每天灌服生理盐水2 ml，共7 d。
3.HPH大鼠模型按薛全福法[4]制作。经上述方法处理后，以导管法测定平均肺动脉压(mPAP)。然后抽取外周血2 ml备用。随后取右肺组织进行固定、包埋、切片。免疫组织化学染色采用ABC法。ABC试剂盒为美国Vector公司产品，IGF-1单克隆抗体购自Santa Cruz Biotechnology,Int。采用放射免疫法检测血清IGF-1含量，用MIAS 2000型医用图像分析仪(四川大学研制)对免疫组织化学染色切片染色强度进行定量分析。每张切片测量8～10条血管，其均数作为该只大鼠染色强度指标。
, http://www.100md.com
4.统计学处理：采用方差分析及q检验、秩和检验。
二、结果
1. TAM对低氧大鼠mPAP和肺小动脉壁IGF-1的影响结果(见表1)。
2. TAM对低氧大鼠血清IGF-1水平的影响见表2。
表1 TAM对低氧大鼠mPAP、肺小动脉壁
IGF-1的影响(
±s) 组 别鼠数
mPAP
(mm Hg)
, http://www.100md.com
IGF-1灰度值
正常对照组
10
14.1±2.7
7.3±1.3
预防实验组
10
16.9±2.9*
9.5±1.5*
预防对照组
10
21.2±4.0*△▲
, 百拇医药
15.8±2.0*△▲
治疗实验组
10
17.2±3.0*
11.6±1.9*△
治疗对照组
10
20.2±2.8*
15.2±3.5*△▲
注：与正常对照组比较*P<0.05；与预防实验组比较△P<0.05；与治疗实验组比较▲P<0.05表2 TAM对低氧大鼠血清IGF-1水平的影响 组 别
, 百拇医药
鼠数
P25
(ng/ml)
M
(ng/ml)
P75
(ng/ml)
正常对照组
10
331.80
413.70
485.73
, 百拇医药
预防实验组
10
452.50
552.09
725.92
预防对照组
10
546.00
884.52
938.28
治疗实验组
10
, http://www.100md.com 429.03
521.33
657.62
治疗对照组
10
389.55
623.49
858.90
注：M为中位数，P25为下四分位数，P75为上四分位数，与预防对照组比较，*P<0.05；其余各组间差异无显著意义
三、讨论
, 百拇医药 本实验结果显示，HPH大鼠肺小动脉壁IGF-1多肽的表达和血清IGF-1水平明显增加，说明IGF-1与HPH形成关系密切；并且TAM对于HPH大鼠 mPAP具有明显的预防和治疗作用。本研究发现，TAM对低氧大鼠肺小动脉壁IGF-1多肽的表达具有一定的抑制作用；TAM亦明显降低治疗实验组和预防实验组血清IGF-1水平，二者之间无显著差异。目前认为，TAM降低循环IGF-1水平，主要是通过两种机制，首先通过抑制垂体生长激素的释放[5]，减少肝脏IGF-1基因表达；其次可直接抑制肝脏、肺脏等组织IGF-1的产生[6]，降低循环IGF-1水平。所以，我们认为TAM对HPH的阻抑作用主要是通过减少肺小动脉壁IGF-1的产生、降低循环IGF-1水平和抑制其活性所致，且以抑制肺小动脉壁IGF-1的产生为主。
参考文献：
1 Robert LV. Chronic hypoxic pulmonary hypertension: Cell to pathophysiology. Chest, 1994,106:236-243.
, http://www.100md.com
2 Jensen DE， Rich CB， Terpstra AJ, et al. Transcriptional regulation of the elastin gene by insulin-like growth factor-I involves disruption of Sp1 binding in aortic smooth muscle cells. J Biol Chem, 1995,270:6555-6563.
3 Howe SR, Pass HI, Ethier SP, et al. Presence of an insulin-like growth factor I autocrine loop predicts uterine fibroid responsiveness to tamoxifen. Cancer Res, 1996, 56: 4049-4055.
4 薛全福，谢剑鸣，胡长贵，等.常压低氧性大鼠肺动脉高压模型的建立.中华结核和呼吸杂志，1989，12：350-352.
, http://www.100md.com
5 Tannenbaum GS, Gurd W, Lapointe M, et al. Tamoxifen attenuates pulsatile growth hormone secretion: mediation in part by somoatostatin. Endocrinology, 1992,130:3395-3401.
6 Huynh H, Tetenes E, Wallace L, Pollak M. In Vivo inhibition of insulin-like growth factor gene expression by Tamoxifen. Cancer Res, 1993,53:1727-1730.
收稿日期：1999-08-26, 百拇医药