血浆保存条件对部分凝血因子测定的影响
作者：高洪国 李会
单位：高洪国(大庆油田总医院)；李会(大庆市第二医院)
关键词：PT；FIB
黑龙江医药科学000334 提要 本文对测定PT(凝血酶原时间)，FIB(纤维蛋白原)的血浆标本在不同温度条件下及不同时间，观察对凝血酶原，纤维蛋白原活性的影响。结果表明，凝血酶原活性最不稳定。在32℃和20℃条件下保存24h，其活性分别相当于即刻的32.2%和48%，纤维蛋白原在32℃条件下保存24h，其活性相当于即刻的46.5%。
随着止血和血栓检验技术的迅速发展，临床上已广泛应用于止血剂，抗凝和溶栓药物的治疗和监测，而PT是国内目前监测抗凝治疗前后状态的首选指标，FIB的含量可为血栓性疾病的诊断和治疗提供依据。因此测定PT.FIB活性的准确度十分重要。笔者对上述因子保存条件及时间影响进行了定量实验研究，旨在建立抗凝系统实验的质控，现报道如下。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 标本来源及处理
选择3例健康成年人，平均年龄30岁，经常规血液检查(WBC.RBC.PLT)及出血实验(APTT.TT)，结果均正常。顺利静脉采血6ml，3.8%枸橼酸钠抗凝度，9:1比例，分别放入普通塑料管中。
1.2 血浆保存
将上述标本立即离心上机测定PT，FIB活性，剩下血浆分别放在27个玻璃管中密封，分4组分别在32℃，20℃，4℃及-20℃条件保存，并在取血后2h，6h，24h进行测定。仪器采用：日本东亚CA-500型全自动凝血仪，由太平洋公司提供的THROMBCPLASTIN-DS和Fibrinogeon. Assay set试剂，每次测定均使用Level 1制作标准曲线。
2 试验结果
, 百拇医药
3例标本结果变化趋势如附表，3例标本各两次测定结果的总平均值作为最终结果，直接计算出不同时间，不同温度血浆活性变化相当于即刻因子活性的百分比。
附表 保存温度与时间对抗凝因子活性的影响 保存温度
时间
PT(s)
FIB(g/L)
X
%
X
%
32℃
即刻
, 百拇医药
11.63
-
2.99
2h
11.93
95.4
2.94
98.3
6h
15.23
57.8
2.74
91.6
, 百拇医药
24h
22.7
32.2
1.39
46.5
20℃
即刻
11.63
-
2.99
2h
11.67
99.6
, 百拇医药
2.96
99
6h
12.15
91.1
2.52
84
24h
17.25
48
2.30
77
4℃
, 百拇医药
即刻
11.63
-
2.99
2h
11.60
101
2.91
97
6h
11.53
104.5
2.81
, 百拇医药
94
24h
12.1
97
2.63
88
-20℃
即刻
11.63
-
2.99
24h
11.63
, 百拇医药
100
2.63
88
48h
12.4
87
2.24
75
注：%为即刻活性的百分率
4 讨论
目前随抗凝药物在临床上的广泛应用，监测病人服药前后情况的唯一途径是测定抗凝因子在体内的活性。因此确保实验结果的质量对疾病的诊断及治疗有重大意义。笔者使用CA-500型自动血凝仪观察了不同温度，不同时间的保存血浆对实验结果的影响。实验结果显示，凝血酶原活性在室温下不稳定，温度越高，破坏越快，在4℃保存2h，6h其活性不但不降低，反而增加。这可能是由于血浆Ⅷ因子在4℃～8℃保存时产生冷凝血活酶导致PT缩短，活性增加的缘故，但PT缩短的程度不明显，-20℃ 24h，48h测其活性分别为即刻的100%，87%。由此可见，保存血浆随着时间的延长，温度的升高凝血酶原活性呈下降势，而且温度越高下降越快，故采血后应立即测定，室温放置也应在2h内检测完毕，不得已时放在冰箱中4℃保存，也应在6h内检完。FIB是由肝实质细胞合成的一种β-γ G型蛋白质，低温贮存相对稳定。结果显示：不同温度下随时间延长FIB活性呈下降趋势，故采血后应立即测定。
综上所述，笔者认为在不冻溶的条件下，室温20℃保存血浆2h内检完PT和FIB，可得到满意的实验结果。
(2000-02-21收稿), 百拇医药
单位：高洪国(大庆油田总医院)；李会(大庆市第二医院)
关键词：PT；FIB
黑龙江医药科学000334 提要 本文对测定PT(凝血酶原时间)，FIB(纤维蛋白原)的血浆标本在不同温度条件下及不同时间，观察对凝血酶原，纤维蛋白原活性的影响。结果表明，凝血酶原活性最不稳定。在32℃和20℃条件下保存24h，其活性分别相当于即刻的32.2%和48%，纤维蛋白原在32℃条件下保存24h，其活性相当于即刻的46.5%。
随着止血和血栓检验技术的迅速发展，临床上已广泛应用于止血剂，抗凝和溶栓药物的治疗和监测，而PT是国内目前监测抗凝治疗前后状态的首选指标，FIB的含量可为血栓性疾病的诊断和治疗提供依据。因此测定PT.FIB活性的准确度十分重要。笔者对上述因子保存条件及时间影响进行了定量实验研究，旨在建立抗凝系统实验的质控，现报道如下。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 标本来源及处理
选择3例健康成年人，平均年龄30岁，经常规血液检查(WBC.RBC.PLT)及出血实验(APTT.TT)，结果均正常。顺利静脉采血6ml，3.8%枸橼酸钠抗凝度，9:1比例，分别放入普通塑料管中。
1.2 血浆保存
将上述标本立即离心上机测定PT，FIB活性，剩下血浆分别放在27个玻璃管中密封，分4组分别在32℃，20℃，4℃及-20℃条件保存，并在取血后2h，6h，24h进行测定。仪器采用：日本东亚CA-500型全自动凝血仪，由太平洋公司提供的THROMBCPLASTIN-DS和Fibrinogeon. Assay set试剂，每次测定均使用Level 1制作标准曲线。
2 试验结果
, 百拇医药
3例标本结果变化趋势如附表，3例标本各两次测定结果的总平均值作为最终结果，直接计算出不同时间，不同温度血浆活性变化相当于即刻因子活性的百分比。
附表 保存温度与时间对抗凝因子活性的影响 保存温度
时间
PT(s)
FIB(g/L)
X
%
X
%
32℃
即刻
, 百拇医药
11.63
-
2.99
2h
11.93
95.4
2.94
98.3
6h
15.23
57.8
2.74
91.6
, 百拇医药
24h
22.7
32.2
1.39
46.5
20℃
即刻
11.63
-
2.99
2h
11.67
99.6
, 百拇医药
2.96
99
6h
12.15
91.1
2.52
84
24h
17.25
48
2.30
77
4℃
, 百拇医药
即刻
11.63
-
2.99
2h
11.60
101
2.91
97
6h
11.53
104.5
2.81
, 百拇医药
94
24h
12.1
97
2.63
88
-20℃
即刻
11.63
-
2.99
24h
11.63
, 百拇医药
100
2.63
88
48h
12.4
87
2.24
75
注：%为即刻活性的百分率
4 讨论
目前随抗凝药物在临床上的广泛应用，监测病人服药前后情况的唯一途径是测定抗凝因子在体内的活性。因此确保实验结果的质量对疾病的诊断及治疗有重大意义。笔者使用CA-500型自动血凝仪观察了不同温度，不同时间的保存血浆对实验结果的影响。实验结果显示，凝血酶原活性在室温下不稳定，温度越高，破坏越快，在4℃保存2h，6h其活性不但不降低，反而增加。这可能是由于血浆Ⅷ因子在4℃～8℃保存时产生冷凝血活酶导致PT缩短，活性增加的缘故，但PT缩短的程度不明显，-20℃ 24h，48h测其活性分别为即刻的100%，87%。由此可见，保存血浆随着时间的延长，温度的升高凝血酶原活性呈下降势，而且温度越高下降越快，故采血后应立即测定，室温放置也应在2h内检测完毕，不得已时放在冰箱中4℃保存，也应在6h内检完。FIB是由肝实质细胞合成的一种β-γ G型蛋白质，低温贮存相对稳定。结果显示：不同温度下随时间延长FIB活性呈下降趋势，故采血后应立即测定。
综上所述，笔者认为在不冻溶的条件下，室温20℃保存血浆2h内检完PT和FIB，可得到满意的实验结果。
(2000-02-21收稿), 百拇医药