氯化汞对人胎盘碱性磷酸酶紫外吸收光谱的影响(摘要)
作者：王秀丽 耿芳宋 宋扬 李馨
单位：王秀丽(青岛大学医学院生物化学教研室 青岛 266021)；耿芳宋(青岛大学医学院生物化学教研室 青岛 266021)；宋扬(青岛大学医学院营养研究所 青岛 266021)；李馨(青岛大学医学院生物化学教研室 青岛 266021)
关键词：氯化汞；人；胎盘；碱性磷酸酶；紫外吸收光谱；构象
齐鲁医学杂志000362 [中图分类号] Q566 [文献标识码] B
[文章编号] 1008-0341(2000)03-0164-01
资料和方法 探讨酶蛋白构象改变与活力变化之间的关系，对于阐明酶的结构与功能及其作用机制都具有重要意义，荧光光谱和紫外吸收光谱是检测酶构象的常用方法。本文采用紫外吸收光谱法对不同浓度HgCl2溶液中人胎盘碱性磷酸酶(PLAP)构象进行了测定。结果显示，随HgCl2浓度的增加，PLAP在218nm波长处的紫外吸收峰位逐渐红移，但峰值不变；280nm波长处的峰值逐渐增大。当HgCl2浓度为1.2mmol/L时，PLAP在257nm波长处又出现了一个新的紫外吸收峰；当HgCl2浓度为2.0mmol/L时，PLAP在257nm和280nm处的紫外吸收峰消失。
讨论 一般认为在230nm波长以下的紫外吸收光谱的变化反映酶蛋白主链构象的变化；240～300nm波长范围内的紫外吸收光谱的变化主要是色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸的作用。PLAP在280nm波长处的紫外吸收峰是色氨酸和酪氨酸共同作用的结果，随HgCl2浓度的增加，280nm波长处的峰值逐渐增大是由于酶分子中内埋较浅的色氨酸和酪氨酸的逐渐暴露所致；当HgCl2浓度为1.2mmol/L时，PLAP在257nm波长处新出现的紫外吸收峰是酶分子中内埋较浅的苯丙氨酸暴露的结果；当浓度为2.0mmol/L时，由于内埋较浅的色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸已完全暴露，故PLAP在280nm和257nm波长处的紫外吸收峰消失。至于PLAP分子中内埋较浅的色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸暴露的原因，可能是由于Hg2+与酶分子中的某些侧链基团(如巯基、咪唑基等)形成螯合物所致。结果也显示，不同浓度的HgCl2虽使PLAP在218nm波长处的紫外吸收峰位红移，但峰值不变，提示PLAP的整体构象并未破坏。
由于HgCl2使PLAP局部构象发生了改变，故使酶活力降低；PLAP是胎盘细胞膜的一个组分，其局部构象的改变也可影响细胞膜的结构与功能，关于这个问题有待进一步探讨。
作者简介 王秀丽，女，1963年7月生，实验师
(1999-10-11收稿 2000-04-29修回), 百拇医药
单位：王秀丽(青岛大学医学院生物化学教研室 青岛 266021)；耿芳宋(青岛大学医学院生物化学教研室 青岛 266021)；宋扬(青岛大学医学院营养研究所 青岛 266021)；李馨(青岛大学医学院生物化学教研室 青岛 266021)
关键词：氯化汞；人；胎盘；碱性磷酸酶；紫外吸收光谱；构象
齐鲁医学杂志000362 [中图分类号] Q566 [文献标识码] B
[文章编号] 1008-0341(2000)03-0164-01
资料和方法 探讨酶蛋白构象改变与活力变化之间的关系，对于阐明酶的结构与功能及其作用机制都具有重要意义，荧光光谱和紫外吸收光谱是检测酶构象的常用方法。本文采用紫外吸收光谱法对不同浓度HgCl2溶液中人胎盘碱性磷酸酶(PLAP)构象进行了测定。结果显示，随HgCl2浓度的增加，PLAP在218nm波长处的紫外吸收峰位逐渐红移，但峰值不变；280nm波长处的峰值逐渐增大。当HgCl2浓度为1.2mmol/L时，PLAP在257nm波长处又出现了一个新的紫外吸收峰；当HgCl2浓度为2.0mmol/L时，PLAP在257nm和280nm处的紫外吸收峰消失。
讨论 一般认为在230nm波长以下的紫外吸收光谱的变化反映酶蛋白主链构象的变化；240～300nm波长范围内的紫外吸收光谱的变化主要是色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸的作用。PLAP在280nm波长处的紫外吸收峰是色氨酸和酪氨酸共同作用的结果，随HgCl2浓度的增加，280nm波长处的峰值逐渐增大是由于酶分子中内埋较浅的色氨酸和酪氨酸的逐渐暴露所致；当HgCl2浓度为1.2mmol/L时，PLAP在257nm波长处新出现的紫外吸收峰是酶分子中内埋较浅的苯丙氨酸暴露的结果；当浓度为2.0mmol/L时，由于内埋较浅的色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸已完全暴露，故PLAP在280nm和257nm波长处的紫外吸收峰消失。至于PLAP分子中内埋较浅的色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸暴露的原因，可能是由于Hg2+与酶分子中的某些侧链基团(如巯基、咪唑基等)形成螯合物所致。结果也显示，不同浓度的HgCl2虽使PLAP在218nm波长处的紫外吸收峰位红移，但峰值不变，提示PLAP的整体构象并未破坏。
由于HgCl2使PLAP局部构象发生了改变，故使酶活力降低；PLAP是胎盘细胞膜的一个组分，其局部构象的改变也可影响细胞膜的结构与功能，关于这个问题有待进一步探讨。
作者简介 王秀丽，女，1963年7月生，实验师
(1999-10-11收稿 2000-04-29修回), 百拇医药