聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴别鹿血与其它动物血
作者：郭月秋 陈代贤 刘辉 王萍萍
单位：郭月秋(辽宁省大连市药品检验所 116021)；陈代贤(辽宁省大连市药品检验所 116021) 刘辉(大连医科大学，辽宁 大连 116027)；王萍萍(大连医科大学，辽宁 大连 116027)
关键词：鹿血；牛血；羊血；猪血；十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳；鉴别
时珍国医国药000340 提要 为探讨鹿血与其它动物血的鉴别方法，应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法，对鹿血、牛血、鸡血、羊血、猪血五种动物全血进行了鉴别研究。结果表明这五种动物全血的电泳谱带有差异，可作为鹿血与其它动物血的鉴别依据。
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1008-0805(2000)03-0232-01
, 百拇医药 随着我国保健事业的进步，鹿血的使用方式已由过去杀鹿取血，仅供帝王直接饮用，发展到今日市场上有制成鹿血酒、御鹿血酒、鹿血胶囊、新鲜鹿血液等多种剂型的鹿血制剂。有关鹿血的鉴别，虽有用免疫学抗原抗体沉淀法的报道[1]，但该法需要制备多种抗体，实验较为复杂。为了确保鹿血制剂原料药的准确而不至于误用其它动物血，我们采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)的方法，对5种不同动物全血进行电泳分析，结果证明鹿血与其它动物血之间存在较大的差异，可作为鹿血及其它动物血的鉴别依据。
1 材料与方法
1.1 样品来源及仪器：梅花鹿 Cervus nippon血采自辽宁西丰鹿场，牛 Bos taurus domesticus血、猪 Sus scrofa domesticus血、羊 Ovis aries血、鸡 Gallus gallus domesticus血均采自屠宰户；
DYY-Ⅲ2型稳压稳流电泳仪，DYY-Ⅲ23A型垂直板电泳模均为北京六一厂生产。
, 百拇医药
1.2 实验方法
1.2.1 试剂及凝胶制备：按常规配制12.5%凝胶液，具体参见文献[2]。
1.2.2 样品液制备：将采得的新鲜全血置阴凉处风干，粉碎，过6号筛成血粉，分别称取各种血粉1 g，加巴比妥-巴比妥钠缓冲剂4 ml，超声20 min，4000 r/min 离心20 min，倾出上清液。取上清液100 μl，加样本处理液100 μl，混匀，备用。
1.2.3 加样与电泳：于上样槽中加样10 μl，100 V稳压电泳，待示踪剂进入分辨胶5 cm后关闭电源，全程约2 h。
1.2.4 染色与脱色：将凝胶置染色液中，摇动染色5～6 h，换脱色液脱色至清晰止。
2 结果
, http://www.100md.com
五种动物全血的SDS-PAGE电泳图谱见图1。各区的蛋白带数与着色等级分区原则同文献[3]；其谱带数目分布、着色等级结果见表1。
图1 五种动物全血的SDS-PAGE电泳图谱
1.梅花鹿血 2.牛血 3.鸡血 4.羊血 5.猪血
表1 五种动物全血SDS-PAGE谱带数目分布、着色等级比较 样 品
A 区
B 区
C 区
总带
, 百拇医药 Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
鹿 血
2
, 百拇医药
1
4
1
/
1
1
2
1
/
/
/
13
牛 血
2
, http://www.100md.com
1
2
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1
1
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1
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8
鸡 血
1
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1
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1
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1
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1
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5
羊 血
2
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1
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1
1
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1
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6
猪 血
1
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1
3
3
/
1
/
1
1
/
/
/
11
3 讨论
3.1 由于动物细胞中的蛋白质普遍受遗传基因控制，而且具有种属的特异性和稳定性，故可通过SDS-PAGE的方法分析各种动物血中蛋白质组成的不同，据其电泳图谱的差别来达到使其相互区别的目的。
, 百拇医药
3.2 由试验结果表明，各种动物血的谱带均有差异。鹿血谱带数达13条，而牛、鸡、羊血谱带数依次为8，5，6条，相对较少，与鹿血相差悬殊。而猪血有11条谱带，在B区较鹿血少2条Ⅳ级带，且其它谱带级数(颜色深浅)与鹿血亦有差异，故也易于区别。以上动物全血均经5次重复试验，结果稳定一致，可作为鹿血与其它动物血的鉴别依据。
3.3 本试验提示，由于牛、鸡、羊、猪血所含成分与鹿血不同，临床疗效也就不能与鹿血相提并论，故需注意鉴别真伪。
作者简介：郭月秋(1965-)，女(汉族)，辽宁人，现任大连市药品检验所副主任中药师，硕士学位.
参考文献：
[1]张振学.鹿血鉴别新方法[J].中药材，1996，19(2)∶96～97
[2]杨延彬.实用免疫学[M].长春：长春出版社，1994∶424
[3]李 峰，张振秋，冯夏红，等.熊胆及其它动物胆汁的电泳鉴别[J].中国中药杂志，1996，21(10)∶589～590
收稿日期：1999-09-07
修订日期：1999-11-19, http://www.100md.com
单位：郭月秋(辽宁省大连市药品检验所 116021)；陈代贤(辽宁省大连市药品检验所 116021) 刘辉(大连医科大学，辽宁 大连 116027)；王萍萍(大连医科大学，辽宁 大连 116027)
关键词：鹿血；牛血；羊血；猪血；十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳；鉴别
时珍国医国药000340 提要 为探讨鹿血与其它动物血的鉴别方法，应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法，对鹿血、牛血、鸡血、羊血、猪血五种动物全血进行了鉴别研究。结果表明这五种动物全血的电泳谱带有差异，可作为鹿血与其它动物血的鉴别依据。
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1008-0805(2000)03-0232-01
, 百拇医药 随着我国保健事业的进步，鹿血的使用方式已由过去杀鹿取血，仅供帝王直接饮用，发展到今日市场上有制成鹿血酒、御鹿血酒、鹿血胶囊、新鲜鹿血液等多种剂型的鹿血制剂。有关鹿血的鉴别，虽有用免疫学抗原抗体沉淀法的报道[1]，但该法需要制备多种抗体，实验较为复杂。为了确保鹿血制剂原料药的准确而不至于误用其它动物血，我们采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)的方法，对5种不同动物全血进行电泳分析，结果证明鹿血与其它动物血之间存在较大的差异，可作为鹿血及其它动物血的鉴别依据。
1 材料与方法
1.1 样品来源及仪器：梅花鹿 Cervus nippon血采自辽宁西丰鹿场，牛 Bos taurus domesticus血、猪 Sus scrofa domesticus血、羊 Ovis aries血、鸡 Gallus gallus domesticus血均采自屠宰户；
DYY-Ⅲ2型稳压稳流电泳仪，DYY-Ⅲ23A型垂直板电泳模均为北京六一厂生产。
, 百拇医药
1.2 实验方法
1.2.1 试剂及凝胶制备：按常规配制12.5%凝胶液，具体参见文献[2]。
1.2.2 样品液制备：将采得的新鲜全血置阴凉处风干，粉碎，过6号筛成血粉，分别称取各种血粉1 g，加巴比妥-巴比妥钠缓冲剂4 ml，超声20 min，4000 r/min 离心20 min，倾出上清液。取上清液100 μl，加样本处理液100 μl，混匀，备用。
1.2.3 加样与电泳：于上样槽中加样10 μl，100 V稳压电泳，待示踪剂进入分辨胶5 cm后关闭电源，全程约2 h。
1.2.4 染色与脱色：将凝胶置染色液中，摇动染色5～6 h，换脱色液脱色至清晰止。
2 结果
, http://www.100md.com
五种动物全血的SDS-PAGE电泳图谱见图1。各区的蛋白带数与着色等级分区原则同文献[3]；其谱带数目分布、着色等级结果见表1。
图1 五种动物全血的SDS-PAGE电泳图谱
1.梅花鹿血 2.牛血 3.鸡血 4.羊血 5.猪血
表1 五种动物全血SDS-PAGE谱带数目分布、着色等级比较 样 品
A 区
B 区
C 区
总带
, 百拇医药 Ⅰ
Ⅱ
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鹿 血
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3 讨论
3.1 由于动物细胞中的蛋白质普遍受遗传基因控制，而且具有种属的特异性和稳定性，故可通过SDS-PAGE的方法分析各种动物血中蛋白质组成的不同，据其电泳图谱的差别来达到使其相互区别的目的。
, 百拇医药
3.2 由试验结果表明，各种动物血的谱带均有差异。鹿血谱带数达13条，而牛、鸡、羊血谱带数依次为8，5，6条，相对较少，与鹿血相差悬殊。而猪血有11条谱带，在B区较鹿血少2条Ⅳ级带，且其它谱带级数(颜色深浅)与鹿血亦有差异，故也易于区别。以上动物全血均经5次重复试验，结果稳定一致，可作为鹿血与其它动物血的鉴别依据。
3.3 本试验提示，由于牛、鸡、羊、猪血所含成分与鹿血不同，临床疗效也就不能与鹿血相提并论，故需注意鉴别真伪。
作者简介：郭月秋(1965-)，女(汉族)，辽宁人，现任大连市药品检验所副主任中药师，硕士学位.
参考文献：
[1]张振学.鹿血鉴别新方法[J].中药材，1996，19(2)∶96～97
[2]杨延彬.实用免疫学[M].长春：长春出版社，1994∶424
[3]李 峰，张振秋，冯夏红，等.熊胆及其它动物胆汁的电泳鉴别[J].中国中药杂志，1996，21(10)∶589～590
收稿日期：1999-09-07
修订日期：1999-11-19, http://www.100md.com