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编号:10207971
反应性淋巴小结抑或恶性淋巴瘤非霍奇金淋巴瘤骨髓浸润的鉴别诊断
http://www.100md.com 《中德临床肿瘤学杂志(英文版)》 2000年第4期
     作者:武忠弼(译)

    单位:同济医科大学

    关键词:

    德国医学000422Reaktives Lymphkntchen oder malignes Lymphom Ein kurzer Leitfaden zur Differentialdiagnose von Knochenmarkinfiltrate n bei Non-Hodgkin-Lymphomen

    J.Thiele, H.M.Kvasnicka

    欲对复杂的骨髓中淋巴样细胞浸润加以定性,首要的是必须选定合适的方法学,使之能直接 与淋巴结的组织学表现作比较。因此,活检标本的固定和包埋必须能保证一系列的酶组化和 免疫组化方法,首先是单克隆抗体的方法得以应用。根据我们日常诊断工作的经验,首先仅 使用较少量的这类抗体,即能标记B和T淋巴细胞抗福尔马林表位的抗体(表1)。
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    表1 若干对福尔马林固定的骨髓标本的

    常规诊断 有价值的单克隆抗体 抗体

    CD分类

    有反应的细胞群

    L26

    CD20

    B淋巴细胞

    Mb-1蛋白

    CD79a

    前级B淋巴细胞至浆细胞

    A452

    CD3
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    T淋巴细胞

    Uchl-1

    CD45RO

    T淋巴细胞,单核组织细胞

    Ki-1(BerH2)

    CD30

    活化的淋巴细胞,Reed-Sternberg细胞

    Lewis

    CD15

    Reed-Sternberg细胞

    即使吉姆萨染色可以极好地显示组织学细节,但不仅对于辨认间质中淋巴样细胞浸润及其分 散的微小浸润灶,而且首先对于发现骨内膜上个别的异型性病变,基本上还需常规应用萘酚 -AS-D-氯乙酸-酯酶反应加以促进。此外,当欲对骨髓病变进行分期时,则除了吉姆萨 染色外,上述酶反应也是必需的。还有,将淋巴结的组织学表现与骨髓的相应改变作联系对 比,也是必需的。因此必须同时拥有两种活检材料。这特别是对于非霍奇金淋巴瘤尤为重 要,因为此时的淋巴结和骨髓病变表现及其分类完全可有显著的差异。这种情况约见于15% ~20%的病例,其中一部分常须分别隔一定时间后,再对淋巴结和骨髓分别重做检查。但在 汇集归类时,主要在中央母细胞-中央细胞(CB-CC)型及滤泡中央细胞淋巴瘤(FCL)型非霍 奇金淋巴瘤(NHL),还会出现相应的困难,因为有时往往在骨髓内会有小细胞(低度恶性)成分而在周围则有大细胞(较高恶性度)亚型出现。为了对细胞学检查结果作出较好的解释, 则有必要同时对周围血和骨髓涂片进行分析判断,这在NHL细胞并发白血病性外溢时尤为必 要,以便将慢性淋巴细胞白血病(CLL)与CB-CC的呈白血病经过的变型或淋巴浆细胞样细胞 型(所谓浆细胞白血病)的变型加以鉴别,或从而检出毛细胞白血病(HCL)时的毛细胞(借助抗 酒石酸的酸性磷酸酶反应和具有特征性的细胞突起)。
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    最后还要注意一点,而在文献中仅有少数报告注意及此,即关于正常骨髓中借免疫组化可予 以鉴别的B和T淋巴细胞的数目是有争议的,因为这与固定和包埋以及脱钙方法有关。一方面 在使用冷冻切片时,据报告CD4+和CD8+T细胞淋巴细胞对CD22+及CD19+B淋巴细 胞的比例约为9∶1.5;相反,另一报告用与我们相似方法所作石蜡包埋髂嵴活检得到的结果 则为CD45RO+T细胞与CD20+B淋巴细胞之比为4~5∶1。按我们对25名血液学健康的患 者所作石蜡包埋髂嵴活检的形态测量分析,其CD45RO+T淋巴细胞数为每平方毫米髓面积 中15.5±6.2,CD20+B淋巴细胞则为4.1±1.1,大致为4∶1,与此前所作检测相近。

    这样的定量检测是有意义的,因为根据两类淋巴细胞之比的偏移或倒转,也可对疾病过程作 出判断,例如在CD20+B细胞占优势时就可设想有小细胞性低度恶性NHL浸润存在。另方面 ,在出现CD45RO+T淋巴细胞的明显弥漫性增多时,则首先要考虑到不同疾病过程中的T淋 巴细胞反应,而作为第二位才考虑相应的肿瘤性改变。
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    运 用

    据报告,在随机提取的较大量的骨髓活检中,可见约5%~25%不同出现率的个别淋巴结淋巴样细胞浸润。其出现率明显地与患者的年龄、性别 , 尤其与患者资料的组成情况有关。如果仅为偶见现象并只有一个或少数浸润灶者,则应首先 在相应的切片层次上查清,是否有伴清楚生发中心的淋巴滤泡形成,或只有淋巴样细胞集聚 。淋巴滤泡增生主要仅见于反应性病变,例如广义的风湿样疾病、病毒性感染,以及中毒性 骨髓病和不同原因引起的免疫性疾病时。如果淋巴结被排除在外,则根据我们的经验,应对 照“检测表”进行系统的检查,以查明出现于骨髓腔的不同数量、不同大小和不同分布的局 灶性淋巴样细胞浸润的性质(表2)。

    表2 对骨髓淋巴样细胞浸润鉴别诊断的“检测表”例举的各 亚型按Kiel和REAL分类 举例

    良性

    指征
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    恶性

    示例

    类风湿性系统性疾病,血管周及中心-中间性

    1.局部组织学

    直接位于皮质下

    LP-IC,自身免疫性溶血性贫血

    脂肪组织,骨小梁旁,相邻或融合的浸润

    CB-CC ,MCL,FCL

    慢性髓增生性系统性

    疾病(CMPE)

    境界清楚

, 百拇医药     2.境界

    不清晰(蜘蛛样)在

    脂肪细胞间扩展

    B-CLL,LP-IC,MCL,F CL,病毒性感染

    (主要为肝炎及HIV)

    小及中间细胞性

    (部分见生发中心)

    3.细胞学

    小细胞性

    大细胞-母细胞

    混合FCL2级

    CLL,HCL,MCL,FCL1级
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    IB,LC,CB

    CB-CC,AIDS骨髓病

    正常

    4.浸润中有

    网织纤维

    增多

    CB-CC,HCL ,FCL,LP-IC,T细胞淋巴瘤

    增多

    正常

    B-CLL

    自身免疫性溶血性

    混合图像伴T淋巴细
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    5.免疫组化

    相同的反应模式伴B或T

    B或T细胞,NHL

    贫血,AIDS骨髓病,中毒性骨髓病

    胞优势,多克隆反应模

    式,胞浆免 疫球蛋白

    细胞优势(80%~90%),浆性免疫球蛋白表达

    LP-IC

    首先是淋巴样细胞浸润的模式,即其排列以及其与其余造血细胞的关系情况,具有决定性的 诊断价值。特别是常规应用萘芬-AS-D-氯乙酸-酯酶反应,就能在不加用免疫组化的情 况下,辨认出最小的灶状病变,并确定其界限。应当指出的是,那些直接位于骨皮质下并直 接出现于表面脂肪髓中的细胞浸润一般只见于NHL时。对那些互相靠拢并互相联结的淋巴结 则应考虑其具较高的恶性度。此外,淋巴样细胞在脂肪细胞间的浸润扩散,略呈筛状或蜘蛛 状模式,而无明显的边界者则表示为NHL。还有,由短至长的贴于骨内膜面上的细胞浸润, 则对诊断具有指导性意义。这种现象最常见于生发中心型NHL,并可能很狭窄,以致在吉姆 萨染色时难以显示。免疫组化检查时,可在正常情况下由中性粒细胞占据的骨小梁生成带上 ,检见镶边状的CD20+和个别 CD40RO-淋巴样细胞排列。另方面,淋巴浆细胞型免疫 细胞瘤的起初为局灶状的骨髓浸润中,一般可检见圆形灶状的位于骨小梁旁中间带的细胞浸 润。结节状的,大多位于中央血管周并也可呈多灶性的淋巴样细胞浸润,则常为淋巴细胞淋 巴瘤及早期B-CLL的特征。上述扩散模式不仅具有鉴别诊断意义,而且与预后指标有着密切 关系,这尤其在小细胞型淋巴细胞性NHL,即B-CLL已得到反复认定。
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    淋巴样细胞浸润的细胞学细节,可借助吉姆萨染色加以分析,其中伴随T及B淋巴细胞混合细 胞群的小淋巴样细胞成分,一般为反应性病变中占优势的改变。相反,小细胞型NHL及其亚 型则显示相对一致的由B或T淋巴细胞组成的浸润。这在从圆形细胞到带凹及多形小淋巴样细 胞的整个细胞谱中均可辨认,或含有浆细胞及淋巴浆细胞样过渡类型。与淋巴结的组织学相 比,在加用组化反应的情况下,将其归入Kiel和REAL分类的各个亚型在大多数病例是完全可 能的。当然,反应性淋巴样细胞浸润(例如在CMPE)可能十分广泛,甚至有时与(小细胞性)低 度恶性的B-NHL难以鉴别,因为在年龄较大的患者两种病变可同时出现。在CMPE的各个亚型 ,可见到出现率显著不同的灶状淋巴样细胞浸润(表3)。与此相关的是,这种由B及T 淋巴细 胞混合组成的小结与受免疫调控的髓纤维化的形成有多大关系。表3 慢性髓增生性系统性疾病(CMPE)时

    出现的反应 性(小结节性)细胞浸润

    患者数
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    %

    特发性(出血性)血小板增多症(ET)

    50

    1

    慢性髓性白血病(CML)

    604

    4

    特发性(原发性)骨髓纤维化(IMF)

    450

    12

    真性红细胞增多症(PV)

    180
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    18

    关于在NHL各个亚型中出现的网织纤维含量的研究,迄今仅见个别报告,并且在B-CLL及HCL 的研究结果还互相矛盾。与LP-IC和滤泡型淋巴瘤(CB-CC及FCL,MCL)以及HCL和T细胞淋巴 瘤等相反,在B-CLL一般不见网硬蛋白(reticulin)的增多。在大细胞型淋巴瘤,主要 是IB与CB及LC病例,则大多可见致密的网织纤维网。除AIDS的淋巴样细胞浸润外,在其他各 种反应性病变中一般均不见或仅见临界量的网织纤维增多。

    在经适当方法处理的活检标本作免疫组化检测的可能性,打开了较好地对NHL作亚分型的大 门,并从而可通过与淋巴结组织学对比而加以确诊。这样就不仅可将淋巴结反应性病变与 肿瘤性病变加以鉴别,而且还可对各种病变进行归类,以及揭示骨髓浸润与淋巴结改变之间 的分歧。虽然迄今在本领域内用冷冻切片进行的研究是一项不应低估的开创性工作,但也不 可忽视只是在应用了可鉴定抗福尔马林表位的相应单克隆抗体后,才获得决定性的突破。这 就不仅可以明确地鉴定B和T淋巴细胞系列,而且偶尔还可将混合型者,如富于T细胞的B细胞 淋巴瘤加以显示。但首先是可将性质不明的个别局部淋巴小结节加以明确的鉴定,以确定其 究竟是反应性的还是肿瘤性的病变。在LP-IC时,除相应的细胞学改变外,胞浆单型免疫球 蛋白的表达对于此亚型也是一个诊断指标。
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    总的说,在表2 所列举的诊断指征中,没有一个可单独确证NHL的骨髓浸润。注意到这一特 点,故在常规诊断中大多采用上述“检测表”(表2)主要指标中的两个,来对病变性质作出 可靠的判断,首先是组织学局部改变和免疫组化反应。根据我们的经验,这一方法对于阐明 骨髓内局灶性淋巴样细胞浸润的性质,很有帮助。

    提 示

    欲鉴别骨髓内反应性及肿瘤性淋巴样细胞浸润,前提是要对活检材料作合适的处理,以便将 应用于淋巴结的方法(如单克隆抗体)也可应用于骨髓,其中有一系列重要的可指导诊断的指 标,可用以对恶性淋巴瘤与反应性病变加以鉴别。

    附 录

    缩写词含义

    NHL 非霍奇金淋巴瘤及其Kiel和REAL分类

, 百拇医药     CLL 慢性淋巴细胞性白血病

    CB-CC 中心母细胞-中心细胞性淋巴瘤

    FCL 滤泡中心细胞淋巴瘤

    LP-IC 淋巴浆细胞样免疫细胞瘤

    MCL 外衣细胞淋巴瘤

    HCL 毛细胞白血病

    AILD 血管免疫母细胞性淋巴结病及T 细胞淋巴瘤

    CB 中心母细胞性淋巴瘤

    IB 免疫母细胞性淋巴瘤

    LC 大细胞型B细胞淋巴瘤

    CMPE 慢性髓增生性系统性疾病

    Zentrum für Pathologie,Universität zu Köln,Joseph-Stelzmannstraβe 9,D-50924 Köln,Germany, http://www.100md.com