生长抑素对应激性大鼠胃粘膜G、D细胞的作用
作者：王玉兰 铁振军 刘聪艳
单位：王玉兰(北京宣武医院内科 100053)；铁振军(北京宣武医院内科 100053)；刘聪艳(北京宣武医院内科 100053)
关键词：
北京医学000418 我们应用免疫组化PAP法，对经过SS保护的胃粘膜G、D细胞变化进行初步观察，并与血清胃泌素(GAS)浓度做比较，分析生长抑素(SS)对G、D细胞的影响。
材料与方法
1.材料：Wistar大鼠33只，雌雄不拘，体重180～220g，由首都医科大学实验动物部提供。
2.方法：①应激性胃粘膜损伤模型制备参照郭鹞法：大鼠分为三组，每组11只。A1和A2组大鼠禁食24小时不禁水。A1组大鼠腹腔注射2.5μg SS-14；A2组大鼠腹腔注射等量生理盐水，15分钟后乙醚吸入轻麻，将以上两组大鼠四肢束缚于铁代谢笼上，待大鼠清醒后放入20℃水中，水深平剑突，6小时后处死。A3组为不做任何处理的正常对照组。所有大鼠断头处死，收集血标本，分离出血清储存于-20℃冰箱中，以做GAS放射免疫测定(放免药盒由中国原子能研究所提供)。②免疫组化染色：取出的胃标本展平后放入Bouin液中固定，将胃窦部分切下，常规石蜡包埋，切成6μm厚，连续切片，进行免疫组化PAP法染色。光镜下观察其结果。
, 百拇医药
3.统计学方法：两组之间比较采用t检验。
结 果
1.SS保护作用：实验观察到受SS-14保护的大鼠胃粘膜受损较轻，未受SS-14保护的大鼠胃粘膜几乎100%受到损伤，胃粘膜可见大小不等的出血点及出血斑，而正常对照组胃粘膜则完全正常。
2.G、D细胞免疫组化特点：与正常组及A2组相比，A1组D细胞阳性显色数量较多，为
级。D细胞大多形状不规则，弥散分布在胃粘膜腺体之间，以邻近胃腔粘膜处居多。A2组D细胞较少，显色约为+级，分布不规则。A1组G细胞显色欠佳，细胞轮廓模糊，数量较少，显色为±级。与此相反，A2组的G细胞显色较深，着染G细胞亦较多，阳性显色约为级，呈不规则放射状向粘膜腔面排列。G细胞在近腺体底部显色较深，细胞形状也较大。阴性对照片未见阳性免疫细胞出现。
, 百拇医药
3.Wistar大鼠血清GAS浓度变化比较见附表。
附表 Wistar大鼠血清GAS浓度变化(
±s) 组别
例数
血清GAS(μg/L)
A1组
A2组
A3组
11
11
11
, 百拇医药
297.00±22.11*
388.50±114.33
271.00±15.56**
*P<0.05， **P<0.01
讨 论
由实验结果可知，SS对应激性胃粘膜损伤确实具有保护作用，其结果与已有文献报道相吻合。关于SS对胃粘膜细胞的保护机制，目前研究多集中于分子上的巯基对自由基的清除上，而对G、D细胞的影响却很少涉及。我们应用免疫组化PAP法，观察到SS保护的大鼠胃粘膜G细胞与D细胞之间似乎存在着一个负反馈系统。SS保护的大鼠胃粘膜D细胞显色较多较深，推测受保护的胃粘膜D细胞功能亢进，分泌较多的SS，通过旁分泌机制作用于邻近的G细胞，使G细胞功能受抑制，导致GAS分泌下降，胃酸和胃蛋白酶也随之下降，从而起到胃粘膜保护作用。SS可能是作用于G、D细胞膜上的SS受体，然后再激活与之相偶联的第二信使系统，如CAMP、离子通道、磷脂酸等而产生作用的。
收稿：1999-07-26
修回：1999-09-03, 百拇医药
单位：王玉兰(北京宣武医院内科 100053)；铁振军(北京宣武医院内科 100053)；刘聪艳(北京宣武医院内科 100053)
关键词：
北京医学000418 我们应用免疫组化PAP法，对经过SS保护的胃粘膜G、D细胞变化进行初步观察，并与血清胃泌素(GAS)浓度做比较，分析生长抑素(SS)对G、D细胞的影响。
材料与方法
1.材料：Wistar大鼠33只，雌雄不拘，体重180～220g，由首都医科大学实验动物部提供。
2.方法：①应激性胃粘膜损伤模型制备参照郭鹞法：大鼠分为三组，每组11只。A1和A2组大鼠禁食24小时不禁水。A1组大鼠腹腔注射2.5μg SS-14；A2组大鼠腹腔注射等量生理盐水，15分钟后乙醚吸入轻麻，将以上两组大鼠四肢束缚于铁代谢笼上，待大鼠清醒后放入20℃水中，水深平剑突，6小时后处死。A3组为不做任何处理的正常对照组。所有大鼠断头处死，收集血标本，分离出血清储存于-20℃冰箱中，以做GAS放射免疫测定(放免药盒由中国原子能研究所提供)。②免疫组化染色：取出的胃标本展平后放入Bouin液中固定，将胃窦部分切下，常规石蜡包埋，切成6μm厚，连续切片，进行免疫组化PAP法染色。光镜下观察其结果。
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3.统计学方法：两组之间比较采用t检验。
结 果
1.SS保护作用：实验观察到受SS-14保护的大鼠胃粘膜受损较轻，未受SS-14保护的大鼠胃粘膜几乎100%受到损伤，胃粘膜可见大小不等的出血点及出血斑，而正常对照组胃粘膜则完全正常。
2.G、D细胞免疫组化特点：与正常组及A2组相比，A1组D细胞阳性显色数量较多，为
级。D细胞大多形状不规则，弥散分布在胃粘膜腺体之间，以邻近胃腔粘膜处居多。A2组D细胞较少，显色约为+级，分布不规则。A1组G细胞显色欠佳，细胞轮廓模糊，数量较少，显色为±级。与此相反，A2组的G细胞显色较深，着染G细胞亦较多，阳性显色约为级，呈不规则放射状向粘膜腔面排列。G细胞在近腺体底部显色较深，细胞形状也较大。阴性对照片未见阳性免疫细胞出现。, 百拇医药
3.Wistar大鼠血清GAS浓度变化比较见附表。
附表 Wistar大鼠血清GAS浓度变化(
±s) 组别例数
血清GAS(μg/L)
A1组
A2组
A3组
11
11
11
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297.00±22.11*
388.50±114.33
271.00±15.56**
*P<0.05， **P<0.01
讨 论
由实验结果可知，SS对应激性胃粘膜损伤确实具有保护作用，其结果与已有文献报道相吻合。关于SS对胃粘膜细胞的保护机制，目前研究多集中于分子上的巯基对自由基的清除上，而对G、D细胞的影响却很少涉及。我们应用免疫组化PAP法，观察到SS保护的大鼠胃粘膜G细胞与D细胞之间似乎存在着一个负反馈系统。SS保护的大鼠胃粘膜D细胞显色较多较深，推测受保护的胃粘膜D细胞功能亢进，分泌较多的SS，通过旁分泌机制作用于邻近的G细胞，使G细胞功能受抑制，导致GAS分泌下降，胃酸和胃蛋白酶也随之下降，从而起到胃粘膜保护作用。SS可能是作用于G、D细胞膜上的SS受体，然后再激活与之相偶联的第二信使系统，如CAMP、离子通道、磷脂酸等而产生作用的。
收稿：1999-07-26
修回：1999-09-03, 百拇医药