柿叶的化学成分研究(Ⅰ)
作者：陈光 徐绥绪 沙沂
单位：陈光 徐绥绪(沈阳药科大学中药系,沈阳 110015)；沙沂(沈阳药科大学测试中心,沈阳 110015)
关键词：
中国药物化学杂志000422 Studies on the Constituents of Diospyros kaki Leaves (Ⅰ)
Chen Guang，Xu Suixu
(Department of Traditional Chinese Medicines,Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 110015)
Sha Yi
, 百拇医药
(Test Center,Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 110015)
Abstract Five triterpenoidal compounds were isolated from the ethanol extracts of Diospyros kaki leaves and identified as uvaol(1),oleanolic acid(2),betulinic acid(3),19α-hydroxyursolic acid(4) and 19α,24-dihydroxyursolic acid(5).Compound 5 was isolated from Diospyros genus for the first time.
Key words Diospyros kaki leaves;triterpenoids;19α,24-dihydroxyursolic acid
, 百拇医药
柿叶为柿科柿属植物柿(Diospyros kaki L.)的新鲜或干燥叶，具有利尿、降压之功，用于治疗冠心病、心绞痛、功能性子宫出血等内脏出血证〔1〕.目前，对其活性成分研究较少.为此，本文作者进行其活性成分研究，由其氯仿提取物中分离得到了5个三萜类化合物，它们分别是乌苏醇(1)、齐墩果酸(2)、白桦酸(3)、19α-羟基乌苏酸(4)、19α，24-二羟基乌苏酸(5).其中，化合物(5)为首次从该属中分出.
提取与分离：取干燥柿叶1 kg，以70%乙醇回流提取两次，每次1.5 h，减压回收乙醇，得浸膏280 g，经氯仿萃取后得到的萃取物(60 g)通过硅胶柱色谱，以石油醚-氯仿、氯仿-甲醇梯度洗脱，得馏分Ⅱ(氯仿-甲醇，V∶V=50∶1)、馏分Ⅲ(氯仿-甲醇，V∶V=30∶1)、馏分Ⅳ(氯仿-甲醇，V∶V=15∶1).馏分Ⅱ经硅胶柱色谱，以石油醚-乙酸乙酯混合溶剂洗脱，经重结晶得化合物(1)，(2)，(3).馏分Ⅲ经硅胶柱色谱，以氯仿-乙酸乙酯混合溶剂洗脱，经重结晶得化合物(4).馏分Ⅳ经硅胶柱色谱，以氯仿-甲醇混合溶剂洗脱，经重结晶得化合物(5).
, http://www.100md.com
结果与讨论：化合物(5)：无色针状结晶(甲醇)，Liebermann-Burchard反应阳性，mp 295～298℃.13C-NMR谱中有30个碳信号，结合δ 140.0和δ 127.9的两个sp2杂化的碳信号，及δ 180.7的羰基碳信号，推测该化合物为乌苏酸类三萜化合物，1H-NMR谱中，δ 5.59(1H,br s)为环内烯氢质子,δ 4.50(1H，d,J=10.9 Hz)和δ 3.65(1H，d,J=10.9 Hz)为连在同一连氧碳上的两个质子,δ 3.25(1H,m)为另一个与氧相连的碳上的质子.由于一个高场区的甲基信号显著向低场位移，结合13C-NMR谱中δ 80.3，δ 72.7，δ 64.6三个连氧碳信号，推测结构中有三个羟基，且有一个羟基应与一个甲基同碳，另一个羟基取代在另一甲基上，与文献〔2〕中19α，24-二羟基乌苏酸的13C-NMR数据相对照基本一致，故鉴定该化合物为19α，24-二羟基乌苏酸.该化合物为首次由该属植物中分离得到.碳谱数据见表1.
, 百拇医药
Tab.1 The 13C-NMR data of compound (5) and literature
No.
(δ)/(Experiment(Literature))
No.
(δ)/(Experiment(Literature))
No.
(δ)/(Experiment(Literature))
1
38.8(38.8)
11
, 百拇医药
24.3(24.3)
21
27.0(27.0)
2
28.5(28.5)
12
127.9(127.9)
22
38.5(38.6)
3
80.3(80.3)
13
, http://www.100md.com 140.0(140.0)
23
23.6(23.7)
4
43.2(43.2)
14
42.1(42.1)
24
64.6(64.6)
5
56.5(56.5)
15
29.3(29.1)
, 百拇医药
25
17.1(17.2)
6
19.3(19.3)
16
26.4(26.5)
26
16.8(16.8)
7
33.9(34.0)
17
48.3(48.4)
, 百拇医药 27
24.7(24.7)
8
40.4(40.4)
18
54.7(54.7)
28
180.7(180.7)
9
47.9(47.9)
19
72.7(72.8)
29
, http://www.100md.com
27.2(27.2)
10
37.1(37.2)
20
42.4(42.4)
30
16.1(16.1)
化合物(1)：无色针状结晶(氯仿)，Liebermann-Burchard反应阳性，mp 222～224℃.13C-NMR谱中有30个碳信号，结合δ 138.6和δ 125.0的两个sp2杂化的碳信号，推测该化合物为乌苏烷型三萜类化合物.1H-NMR谱中，δ 5.13(1H,br s)为环内烯氢质子，δ 3.53(1H，d,J=10.9 Hz)和δ 3.19(1H，d,J=10.9 Hz)为连在同一连氧碳上的两个质子，δ 3.25(1H,m)为另一个与氧相连的碳上的质子，结合碳谱中δ 79.0和δ 69.9的两个碳信号，推测该化合物中应有两个羟基，且有一个羟基应取代在甲基上，与文献〔3〕中乌苏醇的13C-NMR数据相对照基本一致，故鉴定该化合物为乌苏醇.
, http://www.100md.com
化合物(2)：无色针状结晶(氯仿)，Liebermann-Burchard反应阳性，mp 306～308℃.13C-NMR谱中有30个碳信号，结合δ 143.6和δ 122.6的两个sp2杂化的碳信号，及δ 183.3的羰基碳信号，推测该化合物为齐墩果酸.1H-NMR谱中，δ 5.28(1H,br s)为环内烯氢质子，δ 3.2(1H,m)为与氧相连的碳上的质子，与文献〔3〕中齐墩果酸的13C-NMR数据相对照基本一致，故鉴定该化合物为齐墩果酸.
化合物(3)：无色羽状结晶(甲醇)，Liebermann-Burchard反应阳性，mp 316～318℃.13C-NMR谱中有30个碳信号，结合δ 150.5和δ 108.9的两个sp2杂化的碳信号，及δ 178.7的羰基碳信号，1H-NMR谱中，δ 4.79(1H,br s)、δ 4.62(1H,br s)两个末端烯氢信号，推测该化合物为白桦酸，与文献〔3〕中白桦酸的13C-NMR数据相对照基本一致，故鉴定该化合物为白桦酸.
, http://www.100md.com
化合物(4)：无色粉末(甲醇)，Liebermann-Burchard反应阳性，mp 298～300℃.13C-NMR谱中有30个碳信号，结合δ 140.0和δ 128.1的两个sp2杂化的碳信号，及δ 180.7的羰基碳信号，推测该化合物为乌苏酸类三萜化合物，1H-NMR谱中，δ 5.61(1H,br s)为环内烯氢质子，δ 3.44(1H,m)为与氧相连的碳上的质子.由于一个高场区的甲基信号显著向低场位移，结合13C-NMR谱中δ 78.2和δ 720.7两个碳信号可以推测结构中可能有两个羟基，且有一个羟基应与甲基同碳，与文献〔4〕中19α-羟基乌苏酸的13C-NMR数据相对照基本一致，故鉴定该化合物为19α-羟基乌苏酸.
参 考 文 献
1，江维克，周涛.柿叶——一种具有巨大开发潜力的资源.贵阳中医学院学报，1997，19(2)：52～53
, 百拇医药
2，Nakatani M,Miyazaki Y,Iwashita T,et al.Triterpenes from Ilex rotunda fruits.Phytochemistry.1989,28(5)：1479～1482
3，Chou Chengjen.Studies on the constituents of Diospyros kaki leaves(1).Kuo Li Chung-kuo I Yao Yen Chiu So Yen Chiu Pao Kao.1984，25(7)：117～140
4，Matsura S,Iinuma M.Studies on the constituents of useful plants.Ⅳ The constituents of calyx of Diospyros kaki(1).Yakugaku Zasshi.1977,97(4):452～455
收稿日期:2000-07-11, 百拇医药
单位：陈光 徐绥绪(沈阳药科大学中药系,沈阳 110015)；沙沂(沈阳药科大学测试中心,沈阳 110015)
关键词：
中国药物化学杂志000422 Studies on the Constituents of Diospyros kaki Leaves (Ⅰ)
Chen Guang，Xu Suixu
(Department of Traditional Chinese Medicines,Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 110015)
Sha Yi
, 百拇医药
(Test Center,Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 110015)
Abstract Five triterpenoidal compounds were isolated from the ethanol extracts of Diospyros kaki leaves and identified as uvaol(1),oleanolic acid(2),betulinic acid(3),19α-hydroxyursolic acid(4) and 19α,24-dihydroxyursolic acid(5).Compound 5 was isolated from Diospyros genus for the first time.
Key words Diospyros kaki leaves;triterpenoids;19α,24-dihydroxyursolic acid
, 百拇医药
柿叶为柿科柿属植物柿(Diospyros kaki L.)的新鲜或干燥叶，具有利尿、降压之功，用于治疗冠心病、心绞痛、功能性子宫出血等内脏出血证〔1〕.目前，对其活性成分研究较少.为此，本文作者进行其活性成分研究，由其氯仿提取物中分离得到了5个三萜类化合物，它们分别是乌苏醇(1)、齐墩果酸(2)、白桦酸(3)、19α-羟基乌苏酸(4)、19α，24-二羟基乌苏酸(5).其中，化合物(5)为首次从该属中分出.
提取与分离：取干燥柿叶1 kg，以70%乙醇回流提取两次，每次1.5 h，减压回收乙醇，得浸膏280 g，经氯仿萃取后得到的萃取物(60 g)通过硅胶柱色谱，以石油醚-氯仿、氯仿-甲醇梯度洗脱，得馏分Ⅱ(氯仿-甲醇，V∶V=50∶1)、馏分Ⅲ(氯仿-甲醇，V∶V=30∶1)、馏分Ⅳ(氯仿-甲醇，V∶V=15∶1).馏分Ⅱ经硅胶柱色谱，以石油醚-乙酸乙酯混合溶剂洗脱，经重结晶得化合物(1)，(2)，(3).馏分Ⅲ经硅胶柱色谱，以氯仿-乙酸乙酯混合溶剂洗脱，经重结晶得化合物(4).馏分Ⅳ经硅胶柱色谱，以氯仿-甲醇混合溶剂洗脱，经重结晶得化合物(5).
, http://www.100md.com
结果与讨论：化合物(5)：无色针状结晶(甲醇)，Liebermann-Burchard反应阳性，mp 295～298℃.13C-NMR谱中有30个碳信号，结合δ 140.0和δ 127.9的两个sp2杂化的碳信号，及δ 180.7的羰基碳信号，推测该化合物为乌苏酸类三萜化合物，1H-NMR谱中，δ 5.59(1H,br s)为环内烯氢质子,δ 4.50(1H，d,J=10.9 Hz)和δ 3.65(1H，d,J=10.9 Hz)为连在同一连氧碳上的两个质子,δ 3.25(1H,m)为另一个与氧相连的碳上的质子.由于一个高场区的甲基信号显著向低场位移，结合13C-NMR谱中δ 80.3，δ 72.7，δ 64.6三个连氧碳信号，推测结构中有三个羟基，且有一个羟基应与一个甲基同碳，另一个羟基取代在另一甲基上，与文献〔2〕中19α，24-二羟基乌苏酸的13C-NMR数据相对照基本一致，故鉴定该化合物为19α，24-二羟基乌苏酸.该化合物为首次由该属植物中分离得到.碳谱数据见表1.
, 百拇医药
Tab.1 The 13C-NMR data of compound (5) and literature
No.
(δ)/(Experiment(Literature))
No.
(δ)/(Experiment(Literature))
No.
(δ)/(Experiment(Literature))
1
38.8(38.8)
11
, 百拇医药
24.3(24.3)
21
27.0(27.0)
2
28.5(28.5)
12
127.9(127.9)
22
38.5(38.6)
3
80.3(80.3)
13
, http://www.100md.com 140.0(140.0)
23
23.6(23.7)
4
43.2(43.2)
14
42.1(42.1)
24
64.6(64.6)
5
56.5(56.5)
15
29.3(29.1)
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6
19.3(19.3)
16
26.4(26.5)
26
16.8(16.8)
7
33.9(34.0)
17
48.3(48.4)
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24.7(24.7)
8
40.4(40.4)
18
54.7(54.7)
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180.7(180.7)
9
47.9(47.9)
19
72.7(72.8)
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27.2(27.2)
10
37.1(37.2)
20
42.4(42.4)
30
16.1(16.1)
化合物(1)：无色针状结晶(氯仿)，Liebermann-Burchard反应阳性，mp 222～224℃.13C-NMR谱中有30个碳信号，结合δ 138.6和δ 125.0的两个sp2杂化的碳信号，推测该化合物为乌苏烷型三萜类化合物.1H-NMR谱中，δ 5.13(1H,br s)为环内烯氢质子，δ 3.53(1H，d,J=10.9 Hz)和δ 3.19(1H，d,J=10.9 Hz)为连在同一连氧碳上的两个质子，δ 3.25(1H,m)为另一个与氧相连的碳上的质子，结合碳谱中δ 79.0和δ 69.9的两个碳信号，推测该化合物中应有两个羟基，且有一个羟基应取代在甲基上，与文献〔3〕中乌苏醇的13C-NMR数据相对照基本一致，故鉴定该化合物为乌苏醇.
, http://www.100md.com
化合物(2)：无色针状结晶(氯仿)，Liebermann-Burchard反应阳性，mp 306～308℃.13C-NMR谱中有30个碳信号，结合δ 143.6和δ 122.6的两个sp2杂化的碳信号，及δ 183.3的羰基碳信号，推测该化合物为齐墩果酸.1H-NMR谱中，δ 5.28(1H,br s)为环内烯氢质子，δ 3.2(1H,m)为与氧相连的碳上的质子，与文献〔3〕中齐墩果酸的13C-NMR数据相对照基本一致，故鉴定该化合物为齐墩果酸.
化合物(3)：无色羽状结晶(甲醇)，Liebermann-Burchard反应阳性，mp 316～318℃.13C-NMR谱中有30个碳信号，结合δ 150.5和δ 108.9的两个sp2杂化的碳信号，及δ 178.7的羰基碳信号，1H-NMR谱中，δ 4.79(1H,br s)、δ 4.62(1H,br s)两个末端烯氢信号，推测该化合物为白桦酸，与文献〔3〕中白桦酸的13C-NMR数据相对照基本一致，故鉴定该化合物为白桦酸.
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化合物(4)：无色粉末(甲醇)，Liebermann-Burchard反应阳性，mp 298～300℃.13C-NMR谱中有30个碳信号，结合δ 140.0和δ 128.1的两个sp2杂化的碳信号，及δ 180.7的羰基碳信号，推测该化合物为乌苏酸类三萜化合物，1H-NMR谱中，δ 5.61(1H,br s)为环内烯氢质子，δ 3.44(1H,m)为与氧相连的碳上的质子.由于一个高场区的甲基信号显著向低场位移，结合13C-NMR谱中δ 78.2和δ 720.7两个碳信号可以推测结构中可能有两个羟基，且有一个羟基应与甲基同碳，与文献〔4〕中19α-羟基乌苏酸的13C-NMR数据相对照基本一致，故鉴定该化合物为19α-羟基乌苏酸.
参 考 文 献
1，江维克，周涛.柿叶——一种具有巨大开发潜力的资源.贵阳中医学院学报，1997，19(2)：52～53
, 百拇医药
2，Nakatani M,Miyazaki Y,Iwashita T,et al.Triterpenes from Ilex rotunda fruits.Phytochemistry.1989,28(5)：1479～1482
3，Chou Chengjen.Studies on the constituents of Diospyros kaki leaves(1).Kuo Li Chung-kuo I Yao Yen Chiu So Yen Chiu Pao Kao.1984，25(7)：117～140
4，Matsura S,Iinuma M.Studies on the constituents of useful plants.Ⅳ The constituents of calyx of Diospyros kaki(1).Yakugaku Zasshi.1977,97(4):452～455
收稿日期:2000-07-11, 百拇医药