检测高浓度AFP校正方法的应用探讨
作者：冯成全 任莉平 李多孚
单位：冯成全(南充市第五人民医院，四川南充 637000)；任莉平 李多孚(南充市中心医院，四川南充 637000)
关键词：
川北医学院学报000465 中图分类号：R446.61 文献标识码 ：E
文章编号：1005-3697(2000)04-0081-01
甲胎蛋白(AFP)对诊断或鉴别肝脏恶性病变具有重要的临床价值。目前检测AFP最广泛应用的是放射免疫法(RIA)，但由于部份病人血液中的AFP浓度可高达数千甚至上万ng/ml，而常用RIA试制盒的标准曲线范围最高仅可测1600ng/ml，因而很多标本必须经过一定稀释后才能测定。但是，较高浓度AFP血清经 不同倍数稀释后所得的结果相互差异甚大。因此笔者参考有关文献[1]对高浓度AFP血清经稀释测定校正后，其结果准确。现将结果报告如下。
, http://www.100md.com
1 材料和方法
1.1 2008PS型全自动r计数仪，西安262厂产品。
1.2 AFP RIA试剂盒由中国原子能研究院同位素所提供。
1.3 三份高浓度AFP血清来自本院门诊及住院病人。
1.3 方法：检测AFP均按试剂盒说明进行。
1.4 标本稀释：RIA采用0ng/ml血清稀释。
2 结 果
2.1 三份高AFP血清分别经不同倍数稀释后，不同稀释度结果(计算值)均存在明显差异见表1，高者可达2.8倍(如标本3)。但当释释度达一定值时，结果不再增大，反 而明显降低(表1*数据)。
, 百拇医药
2.2 按[1]方法，如表1三份标本最佳反应浓度分别为：111ng/ml、62ng/ml、255ng/ml与对应稀释度的计算值1779、4012、130918分别除以每一稀释度的计 算 值得校正系数，再将各校正系数乘以对应的实测值乘以稀释倍数，即为该标本的校正值。表1 三份标本各稀释度的实测值、计算值及校正值
原倍
1：2
1：4
1：8
1：16
1：32
1：64
1：128[ 〗1：256
, http://www.100md.com
1：512
1：1024
标本1
实测值
>1600
816
418
212
111
48*
-
-
-
, 百拇医药
-
-
计算值
1633
1675
1700
1779
1552
-
-
-
-
-
校正系数
, http://www.100md.com
1.08
1.06
1.04
1.0
1.14
-
-
-
-
-
校正值
1777
1775
, http://www.100md.com 1774
1779
1760
-
-
-
-
-
标本2
实侧值
>1600
>1600
787
400
, 百拇医药
231
118
62
2 5*
-
-
-
计算值
3151
2302
3697
3801
4012
, 百拇医药
3289
-
-
-
校正系数
1.27
1.25
1.08
1.06
1.00
1 .21
-
-
, 百拇医药
-
校正值
3997
4000
3991
4002
4012
3840
-
-
-
标本3
实侧值
, 百拇医药
>1600
>16 00
>1600[ 〗>1600
>1600
1452
1203
627
412
255
109*
计算值
46473
, 百拇医药 76998
80371
105600
130 918
112230
校正系数
2.8
1.7
1.62
1.23
1.0
1.16
校正值
, 百拇医药
130099
130886
130014
129730
130918
129474
3 讨 论
3.1 RIA是建立在标记抗原和非标记抗原对特异性抗体的竞争之上的。这种分子间的竞争很复杂，影响因素很多，特别是在液相RIA的反应中，常可出现因反应体系中抗 原 抗体分子“比率”不适引起的“Hook”效应[2]。因而RIA就可以存在如表1所示的 ，不同稀释度有不同结果这样的不准确性。文献方法[1]实际上就是通过校正曲线将不同稀释度的实测结果校正至反应体系中抗原抗体分子处于“最佳比率”时的浓度，通过校正，任一稀释度的标本都可得出相对准确的结果。笔者认为，此方 法的基础是正确的。
, http://www.100md.com
3.2 将表1三份标本分别与校正前各稀释度计算值与其校正值进行t检验，t值分别为t1=6.82,t2=3.80、t3=3.62,P值均<0.05，差异显著。三份标本分别为经校正后，各稀释度校正值与其最佳反应浓度的对应稀释度的计算值作t检验，其t值分别为t1＝0.06、t2＝0.03、t3＝0.73，P值均>0.05，无显著性差 异。
3.3 笔者用各标本的校正的校正系数分别校正了各份标本不同稀释度的结果，校正后各稀释度结果之间的校正值差异减小。但是不同标本不能使用同一校正系数，即校正系数不是通用值。
参考文献：
[1] 朱忆诚，陈伟英.因稀释所致甲胎蛋白检测值误差的校正方法[J].中华医学检验杂志，2000，23：118.
[2] 曹文飞.试论HOOK效应的分子基础[J].免疫学杂志，1998，14：274～277.
(收稿日期：2000-10-19), 百拇医药
单位：冯成全(南充市第五人民医院，四川南充 637000)；任莉平 李多孚(南充市中心医院，四川南充 637000)
关键词：
川北医学院学报000465 中图分类号：R446.61 文献标识码 ：E
文章编号：1005-3697(2000)04-0081-01
甲胎蛋白(AFP)对诊断或鉴别肝脏恶性病变具有重要的临床价值。目前检测AFP最广泛应用的是放射免疫法(RIA)，但由于部份病人血液中的AFP浓度可高达数千甚至上万ng/ml，而常用RIA试制盒的标准曲线范围最高仅可测1600ng/ml，因而很多标本必须经过一定稀释后才能测定。但是，较高浓度AFP血清经 不同倍数稀释后所得的结果相互差异甚大。因此笔者参考有关文献[1]对高浓度AFP血清经稀释测定校正后，其结果准确。现将结果报告如下。
, http://www.100md.com
1 材料和方法
1.1 2008PS型全自动r计数仪，西安262厂产品。
1.2 AFP RIA试剂盒由中国原子能研究院同位素所提供。
1.3 三份高浓度AFP血清来自本院门诊及住院病人。
1.3 方法：检测AFP均按试剂盒说明进行。
1.4 标本稀释：RIA采用0ng/ml血清稀释。
2 结 果
2.1 三份高AFP血清分别经不同倍数稀释后，不同稀释度结果(计算值)均存在明显差异见表1，高者可达2.8倍(如标本3)。但当释释度达一定值时，结果不再增大，反 而明显降低(表1*数据)。
, 百拇医药
2.2 按[1]方法，如表1三份标本最佳反应浓度分别为：111ng/ml、62ng/ml、255ng/ml与对应稀释度的计算值1779、4012、130918分别除以每一稀释度的计 算 值得校正系数，再将各校正系数乘以对应的实测值乘以稀释倍数，即为该标本的校正值。表1 三份标本各稀释度的实测值、计算值及校正值
原倍
1：2
1：4
1：8
1：16
1：32
1：64
1：128[ 〗1：256
, http://www.100md.com
1：512
1：1024
标本1
实测值
>1600
816
418
212
111
48*
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, 百拇医药
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计算值
1633
1675
1700
1779
1552
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校正系数
, http://www.100md.com
1.08
1.06
1.04
1.0
1.14
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校正值
1777
1775
, http://www.100md.com 1774
1779
1760
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标本2
实侧值
>1600
>1600
787
400
, 百拇医药
231
118
62
2 5*
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计算值
3151
2302
3697
3801
4012
, 百拇医药
3289
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校正系数
1.27
1.25
1.08
1.06
1.00
1 .21
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, 百拇医药
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校正值
3997
4000
3991
4002
4012
3840
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标本3
实侧值
, 百拇医药
>1600
>16 00
>1600[ 〗>1600
>1600
1452
1203
627
412
255
109*
计算值
46473
, 百拇医药 76998
80371
105600
130 918
112230
校正系数
2.8
1.7
1.62
1.23
1.0
1.16
校正值
, 百拇医药
130099
130886
130014
129730
130918
129474
3 讨 论
3.1 RIA是建立在标记抗原和非标记抗原对特异性抗体的竞争之上的。这种分子间的竞争很复杂，影响因素很多，特别是在液相RIA的反应中，常可出现因反应体系中抗 原 抗体分子“比率”不适引起的“Hook”效应[2]。因而RIA就可以存在如表1所示的 ，不同稀释度有不同结果这样的不准确性。文献方法[1]实际上就是通过校正曲线将不同稀释度的实测结果校正至反应体系中抗原抗体分子处于“最佳比率”时的浓度，通过校正，任一稀释度的标本都可得出相对准确的结果。笔者认为，此方 法的基础是正确的。
, http://www.100md.com
3.2 将表1三份标本分别与校正前各稀释度计算值与其校正值进行t检验，t值分别为t1=6.82,t2=3.80、t3=3.62,P值均<0.05，差异显著。三份标本分别为经校正后，各稀释度校正值与其最佳反应浓度的对应稀释度的计算值作t检验，其t值分别为t1＝0.06、t2＝0.03、t3＝0.73，P值均>0.05，无显著性差 异。
3.3 笔者用各标本的校正的校正系数分别校正了各份标本不同稀释度的结果，校正后各稀释度结果之间的校正值差异减小。但是不同标本不能使用同一校正系数，即校正系数不是通用值。
参考文献：
[1] 朱忆诚，陈伟英.因稀释所致甲胎蛋白检测值误差的校正方法[J].中华医学检验杂志，2000，23：118.
[2] 曹文飞.试论HOOK效应的分子基础[J].免疫学杂志，1998，14：274～277.
(收稿日期：2000-10-19), 百拇医药