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编号:10233760
脾虚证大鼠组织和血浆中SS,CCK,Mot含量的变化
http://www.100md.com 《世界华人消化杂志》 2000年第4期
     作者:任 平 黄 熙 李月彩 刘 芳 张 莉 王骊丽

    单位:任 平 黄 熙 李月彩 张 莉 王骊丽(中国人民解放军第四军医大学西京医院 陕西省西安市 710032);刘 芳(中国人民解放军454医院 江苏省南京市 210002)

    关键词:脾虚;血浆;胃肠激素类;放射免疫测定;四君子汤;治疗应用;大鼠;药物治疗;生长抑素;缩胆囊素

    摘 要摘 要:目的 探讨胃肠激素在脾虚证发病中的作用。方法 采用放射免疫分析法测定实验性脾虚证大鼠不同造模时间(7d,14d)胃窦、十二指肠、空肠、下丘脑及血浆中胃动素(Mot)、生长抑素(SS)、缩胆囊素(CCK)含量并与正常对照组和四君子汤预防组比较。结果 脾虚早期(7 d):SS在血浆、下丘脑中含量升高(106.5±13.9和143.1±8.5 vs 85.2±4.3和136.9±40.9)(p<0.01,P<0.05),外周组织中含量下降(27.5±1.6,22.7±1.2和19.5±2.4 vs 91.4±9.6,50.7±5.6和55.5±6.8,P<0.01);CCK<88.1±5.2.59.2±3.5,79.1±8.7,68.5±4.7和6.9±O.2)和Mot(76.4±8.0,51.2±1.9,37.2±7.3,63.2±2.2和99.8±6.5 vs 73.0±2.4,43.1±2.3,63.1±7.1,59.2±6.7,3.8±0.1和53.2±9.3,35.6±3.0,29.5±7.6,46.6±7.0,82.7±9.3)在组织和血浆中含量均升高(P<0.01,P<0.05).脾虚晚期(14d):SS在下丘脑(98.3±28.7)、血浆(68.2±2.6)中含量下降.外周组织中含量(119.3±5.2.98.4±9.2和88.2±2.8)升高(P<0.01);Mot在组织(32.5±5.6,27.9±1.8,21.62±6.2和32.3±5.1.P<0.01)和血浆(64.5±5.4,P<0.05)中含量均下降.CCK在下丘脑(84.1±1.5.P<0.01)及胃窦(54.2±6.4,p<0.01)组织中含量升高,在血浆(2.8±0.4)和肠道组织(43.2±2.3,36.5±3.3,p<0.01)中含量下降.经四君子汤预防性治疗的动物体内激素含量变化均无显著性意义。结论 脾虚证存在多部位多种激素的异常,且随病程发展呈动态变化.四君子汤对此有纠正作用。
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    Somatostatin, cholecystokinin and motilin levels in plasma and tissues in experimental Pixu rats

    Ping Ren ,Xi Huang ,Yue Cai Li

    (Department of Gereology,Xijing Hospital,Fourh Military Medical University,Xian 710033,Shaanxi Province,China)

    Fang Liu

    (Chinese PLA 454 Hospital,Nanjing 210002,Jiangsu Province,China)

    Li Zhang ,Wang Li Li
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    ( Department of Gereology,Xijing Hospital,Fourh Military Medical University,Xian 710033,Shaanxi Province,China)

    Abstract:AIM To explore the relationship between gastrointestinal hormones and pathogenesis of Pixu Spleen asthenia syndrome in traditional Chinese medicine (TCM).METHODS The rat Pixu models (n = 70) were treated by reserpine 0.3 mg/(kg.d) for seven days or fourteen days respectively. The SS, CCK and Mot levels in tissues and plasma of rat models were measured by RIA, compared with the normal group and the group prevented and treated by Sijunzi decoction (SMD).RESULTS In Pixu rat models of seven days, as compared with controls, the plasma and hypothalamus levels of SS increased (106.5±13.9 and 143.1±8.5 VS 85.2±4.3 and 136.9±40.9) and the peripheral levels decreased (27.5±1.6, 22.7±1.2 and 19.5±2.4 vs 91.4±9.6, 50.7±5.6 and 55.5±6.8, P<0.01); both tissues and plasma had higher levels of CCK (88.1±5.2, 59.2±3.5, 79.1±8.7,69.5±4.7 and 6.9±0.2) and Mot (76.4=8.0, 51.2±1.9,37.2±7.3, 63.2±2.2 and 99.8±6.5) than those of controls (73.0±2.4, 43.1±2.3, 63.1±7.1, 59.2±6.7,3.8= 0.1 and 53.2±9.3, 35.6±3.0, 29.5±7.6, 46.6±7.0, 82.7±9.3, P<0.0l,p<0.05). In Pixu rat models of fourteen days, as compared with controls, the SS levels was lowered in hypothalamus (98.3±28.7) and plasma(68.2±2.6), and in tissues (119.3±5.2, 98.4±9.2 and 88.2±2.8) was increeeed, the levels of Mot decreased in plasma (64.5±5.4, P<0.05) and tissues (27.9±1.8,21.62±6.2 and 32.3±5.1, P<0.01); CCK levels ware higher in stomach (54.2±6.4 ) and hypothelamus ( 84.1±1.5, P<0.01) and lower in plasma (2.8±0.4) and gut (43.2±2.3, 36.5±3.3, P<0.01) than tboee of controls.There was no significant disorder of SS, CCK and Mot in the group prevented and treated with SJZD.CONCLUSION The levels of SS, CCK and Mot varied with the development of TCM Spleen asthenia syndrome andcould be modulated by SJZD.
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    Keywords:spleen deficiency; plasma;gastrointestinal hormones; radioimmunoassay;Sijunzi decoction/therapeutic use; rats; drug therapy; somatostatin; cholecystokinin

    0引言中医脾与消化系统关系密切,脾虚时消化系统处于紊乱状态[1,2].胃肠激素作为一种人体内广泛分布的调节肽对胃肠生理功能有着重要的调节作用,为探讨脾虚证与胃肠激素的关系,我们用放射免疫分析法测定了实验性脾虚证大鼠下丘脑、胃窦、十二指肠、空肠及血浆中SS,CCK以及Mot含量的变化.采用多种激素多个部位同步检测,综合分析的方法,以便全面了解各激素在脾虚证时变化,及这种变化的相互关系.其次,通过测定不同造模时间(7d,14d)动物体内激素含量来观察胃肠激素在脾虚证病程中的动态变化.这对揭示胃肠激素在脾虚证发病中的作用,探索脾虚证的实质具有重要价值。1材料和方法1.1材料♂Wistar大鼠70只,体质量220g±20g,5周龄,本校实验动物中心提供,四君子汤按白参:炒白术:茯苓:炙甘草=2:2:2:1质量比例配制成水煎剂(含生药3kg/L).由本院中药房提供.利血干由上诲医科大学红旗制药厂提供.试剂125I-胃动素、125I-生长抑素放免分析试剂盒由天津千叶生物技术公司提供.125I-缩胆囊素为瑞典euro-diagnosticaah公司产品。2方法正常对照组15只,每只生理盐水0.2mL/d股四头肌注射,同时灌服蒸馏水0.2mL/d.脾虚模型组共30只,分为I,Ⅱ两组各15只,每只利血平0.3mg/(kg·d)股四头肌注射,并灌服蒸馏水2mL/d.I组造模时间7d,Ⅱ组造模时间14d.四君表1脾虚大鼠血浆和组织中SS含量的变化Ap<0.01vs正常对照组。表2脾虚大鼠血浆和组织中CCK含量的变化bp<0.01vs正常对照组。子汤治疗组15只,利血平用法用量同上,同时灌服匹君子汤2mL/d,共14d.于15d(其中脾虚I组为8d),在禁食不禁水一夜后,所有动物乙醚麻醉,颈总静脉取血2mL.然后剖腹取胃窦组织、距幽门下0.5cm取十二指肠组织、距十二指肠-空肠交界处下0.5cm取空肠组织各0.5cm长.并开颅取下丘脑组织,立即液氮冻存.血浆及组织样品(各称20g)预处理按RIA试剂盒说明进行.血浆、胃窦、十二指肠、空肠及下丘脑组织中SS,Mot,CCK含量测定均采用竞争性放射免疫非平衡法,按放免分析试剂盒中说明书的程序进行.质量控制管、批内差异、批间差异按试剂盒说明书进行,结果符合实验要求。2结果本实验室1990年开始用利血平制作脾虚证大鼠模型,实验条件掌握比较成熟.动物造4d开始出现类似人脾虚证症状:纳差、倦卧、腹泻、体温和体重下降等,7d时症状最重.10d后出现脱肛,腹泻停止,大便粘稠或成型软便,机体极度衰竭.我们发现脾虚早期(7d)SS在下丘脑、血浆中含量升高,外周组织中含量下降,脾虚晚期变化则相反(P<0.01,表1).脾虚早期(7d)CCK,Mot在组织和血浆中含量均升高(P<0.01,P<0.05,表2,3),脾虚晚期(14d),Mot在组织和血浆中含量均下降(p<0.0l,p<0.05).CCK在下丘脑及胃窦组织中含量升高,在血浆和肠道组织中含量下降(P<0.01).而经四君子汤预防性治疗的动物体内激素含量变化均无显著性意义,反证了脾虚证动物模型制作成功。(±S,湿组织;ng/g,血浆:ng/L)表3脾虚大鼠血浆和组织中Mot含量的变化Ap<0.05.Tp(0.01vs正常对照组。3讨论SS.Mot,CCK均为脑肠肚,广泛分布于中枢和胃肠组织.SS主要生理作用是抑制胃肠运动及各种胃肠激素的释放,SS在中枢含量变化与胃肠组织中恰好相反.胃肠组织中SS含量越高,中枢下丘脑含量越低,其对胃肠运动抑制程度越高;相反胃肠组织中SS含量越低下丘脑含量越高,则胃肠受抑程度就越低,本结果表明,SS在中枢和胃肠组织中的含量相应变化与上述观点吻合.CCK分泌细胞主要位于十二指肠近段和空肠粘膜,在体内的生理作用有抑制胃排空,抑制近端十二指肠蠕动,促进远端十二指肠和空肠蠕动,促进胆囊收缩等[3],Mot分泌细胞密集在十二指肠和近端空肠粘膜隐窝内.它具有强烈的刺激上消化道的机械运动和电活动的作用[4],并能刺激胃蛋白酶和胰液分泌.在消化间期Mot呈周期性释放,引起胃和小肠产生消化间期移行性复合运动波(IMC)Ⅲ相,并诱发胃强烈收缩和小肠明显的分节运动,加强回肠和结肠的运动,对胃肠腔内容起清扫作用[5].我们前面己做过的有关Mot与脾虚证关系的临床与实验研究多表明脾虚时Mot含量下降.这次则通过动态观察全面了解了Mot在脾虚证时的变化,并进一步验证了脾虚泄泻与Mot的关系[6,7].本实验中,脾虚造模7d,下丘脑、血浆中SS含量升高.外周组织含量均下降,对胃肠运动和胃肠激素释放的抑制减弱,CCK在组织和血浆中含量均升高,抑制胃排空和加速空肠蠕动的作用加强,与临床上腹胀、纳呆、泄泻症状符合;Mot在组织和血浆中含量均升高,促进小肠运动,在胃运动调节方面Mot单独作用为促进收缩,从本实验结果似可推测SS和CCK(作用大于Mot,因此总效应表现为胃运动减弱.脾虚造模14d,下丘脑、血浆SS含量下降,外周组织中含量升高.对胃肠运动和胃肠激素释放的抑制程度高.组织和血浆中Mot含量均下降,Mot不足导致胃肠平滑肌松弛,张力及蠕动减弱,胃排空时间延长,小肠运动减弱,胰腺外分泌功能障碍,从而导致脾虚时胃肠运动异常,消化功能低下.空肠和十二指肠为CCK分泌细胞密集处,血浆中激素均由内分泌细胞释放入血,因此血浆中激素变化与肠道组织同步.CCK在肠道组织与血浆中浓度下降,促进空肠蠕动作用下降可能为动物晚期出现腹泻消失,大便粘滞的原因之一.而在下丘脑、胃窦组织浓度升高的原因和作用尚有待于进一步研究,四君子汤治疗组激素变化无显著性差异。本研究表明,脾虚时存在多部位、多种胃肠激素的异常.而且胃肠激素的变化在脾虚证病程中存在动态改变.脾虚早期SS,Mot,CCK异常的综合效应为胃排空受抑,肠运动加速.动物表现为纳差、泄泻.脾虚晚期该三种激素异常的总效应为整个胃肠活动受抑,模型动物表现为腹泻消失,消化功能低下,机体衰竭.四君子汤治疗组3种激素的改变与正常对照组相比均无显著性差异.从而进一步揭示了脾虚证与胃肠激素异常的关系和四君子汤-调正胃肠激素水平-健脾三者间的效应关系。
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    基金项目:国家自然科学基金资助项目 No,39770886,39670865

    作者简介:王平,女,1962年11月28日生,湖南省长沙市人,汉族.1984年湖南中医学院毕业,学士,1991年第四军医大学硕士,现任老年病科主治医师、讲师,从事中西医结合临床、脾虚证本质研究10年,发表论文46篇。

    参考文献:

    [1]Hu YJ,Qiao FQ,Stady on Pixu mechanism for 10 years.Zhongguo Yiyao Xuebao,1991;6:51-53

    [2]Tao YQ,Huo HR,Zhou AX,Li XQ,Guo SY,Tian JL,He YZ,Jiang YL.Experimental study of Guizhi Tang(cinnamon Twig decction)on duai-direction regulation of gastrointestinal motility IV effect on gastrin and motilin.Zhongyao Yaoli Yu Linchuang,1998;14:1-4
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    [3]Zhu JZ,Chen DF,Leng ER,The effect of gastrointestinal peptide on regulating gastroineestinal motility.Shijie Huaren Xiaohua Zazhi,1999;7:687-688

    [4]Zhang ZY,Hou ZJ,Guo JY.Gut hormones and clinical using.Huaren Xiaohua Zazhi,1998;6:447-478

    [5]Pan XZ,Cai LM Curent status of Gastrointestinal hormones.Shijie Huaren Xiaohua Zazhi,1999;7:464-466

    [6]Ren P, Song GZ, Xia T, Huang X, Zhang ZB,Hu JL,Suen AH,Li CL.Changes of Motilin and PGE2 Spleen-asthenia with Chronic Diarrhea.Zhongguo Yiyao Xuebao,1993;8:22-24

    [7]Rer P, Huang X,Xie LJ.Effect of SJZD on Mot and PGE2 levels in pixu rat.Zhongyao Yu Linchuang,1994;10:7-8

    收稿日期:1999-12-07, 百拇医药


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