眼镜蛇胆伪品的鉴别
作者：黄晓文 曾常青
单位：(广东药学院分析化学教研室 广州 510224)
关键词：蛇胆；鉴别
广东药学000412 摘要 通过胆囊外观性状，胆汁的K2Cr2O7沉淀、糠醛-硫酸显色反应以及薄层色谱试验，对一批眼镜蛇胆检品进行了鉴别；实验表明：此批检品与眼镜蛇胆有较大区别，而与鸡胆较接近，应为伪品。本实验方法简单，重现性好，专属性强，可作为真伪蛇胆的鉴别方法。
蛇胆是一种名贵中药材，味苦而甘凉，具有清热、解毒、化痰镇咳之功效[1]；不同种类的蛇胆，其功效也有差异，一般以毒蛇胆如眼镜蛇胆的药用价值较高，主要用于治疗小儿咳嗽痰喘、百日咳、支气管炎等多种疾病；由于眼镜蛇胆来自天然，价格昂贵，多从东南亚一带进口。最近，我们对一批进口眼镜蛇胆进行鉴别，发现是伪品，检品在外观性状、理化性质、薄层色谱试验结果与眼镜蛇胆均有较大差异，而与鸡胆较为接近，现报道如下。
, 百拇医药
1 实验材料和试剂
1.1 眼镜蛇胆、鸡胆、鸭胆 经鉴定后将活体处死，取其胆晾干。检品干胆由进口药材商提供。
1.2 供试液的制备
取检品干胆、眼镜蛇胆、鸡胆、鸭胆分别称重，剪碎，用甲醇浸泡、研磨、滤过，滤液合并各定容至2ml，作为供试液备用。
1.3 胆汁酸对照品
取胆酸(CA)，牛磺胆酸(TCA)，牛磺脱氧胆酸(TDCA)，牛磺鹅脱氧胆酸(TCDCA)，去氧胆酸(DCA)，甘氨胆酸(GCA)，鹅去氧胆酸(CDCA)对照品各1～2mg，用甲醇配成1mg/ml，等量混合，作对照品液。各种胆汁酸对照品均购自美国SIGMA化学公司。
实验用试剂均为分析纯。
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2 方法和结果
2.1 外观性状与化学鉴别
2.1.1 外观性状
眼镜蛇胆外形呈卵圆形，色棕黄，皮薄、光滑，胆管细长，软而有韧性，不粘手；胆皮不溶于甲醇；浸泡在60%乙醇中，溶液呈浅橙黄色，澄清、透明，胆囊不胀实，1年后观察不变；而检品外观性状与鸡胆、鸭胆一致：呈椭圆形，色草绿，皮厚、粗糙，胆管粗、硬、短，韧性差，易断，气腥；检品粘手，胆皮易溶于甲醇；浸泡在60%乙醇中，溶液呈草绿色，浑浊，有少量沉淀产生，胆囊胀实，1年后观察，溶液呈深棕色，浑浊，胆囊表面有溶出物；带烟熏腥味。
2.1.2 K2Cr2O7沉淀反应
取制备供试液时各种胆品的滤渣，挥干甲醇，用60～70℃热水提取，各得12ml滤液，分别取2ml滤液，加K2Cr2O7试液4份与稀盐酸1份混合液数滴，结果，眼镜蛇胆产生少许橙黄绿色沉淀；检品产生大量草黄绿色沉淀；鸡胆产生大量带泡沫的黄绿色絮状沉淀；鸭胆产生带泡沫草绿色沉淀。
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2.1.3 糠醛-硫酸显色反应[2]
分别取供试液各1滴，各加入新配1%糠醛溶液1ml，再加入50%硫酸液5ml，水浴(沸)加热10min，结果，眼镜蛇胆由黄褐色变成红紫色；检品均由黄棕色变成蓝黑色；鸡胆由浅黄绿色变成蓝黑色；鸭胆由黄墨绿色变成墨绿色。
从外观性状和化学反应可看出，检品与鸡胆接近，而与眼镜蛇胆有较大差别。
2.2 薄层色谱鉴别
2.2.1 薄层板制备
称取硅胶G(青岛海洋化工厂生产)10g，加入0.2%CMC-2Na溶液30ml，研匀。涂铺在15×20cm的玻璃板上，阴干，于105～110℃活化1h，放置在干燥器内备用。
2.2.2 点样、展开、检视
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2.2.2.1 取硅胶G板，分别点供试品液(眼镜蛇胆、检品)、混合胆汁酸对照品液各5μl，以异戊醇-醋酸-水(18∶10∶6)展开15cm，取出，晾干，喷以30%硫酸，于105℃烘10min。在日光下检视，结果见图1。
2.2.2.2 取检品干胆、眼镜蛇胆、鸭胆、鸡胆供试液与混合胆汁酸对照品液分别点5μl于硅胶G板上。展开剂及显色方法同前。结果见图2。从图1、图2可知检品均与鸡胆的斑点一致，而与眼镜蛇胆有明显的差异。
图1 检品、眼镜蛇胆的薄层色谱图
1 眼镜蛇胆 2～11 检品1～10号 12 混合胆酸
a:TCA；b：TDCA+TCDCA;c：GCA；d：CDCA+DCA；e：CA
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图2 检品、眼镜蛇胆、鸭胆、鸡胆的薄层色谱图
1、3 眼镜蛇胆 2、4 检品 5 鸭胆 6、7 鸡胆
8 混合胆酸a:TCA；b：TDCA+TCDCA;c：GCA；d：CDCA+DCA；e：CA
3 讨论
3.1 从外观性状和化学反应比较来看，检品与鸡胆较相近。在做外观性状鉴别时，做了蜜胆实验[3]、K2Cr2O7沉淀实验和糠醛-硫酸显色反应。蜜胆实验结果呈阴性，这可排除检品是蜜胆的可能性。K2Cr2O7沉淀反应结果显示：检品胆囊内含物与眼镜蛇胆是不一致的。糠醛-硫酸显色反应结果显示：检品与眼镜蛇胆不一致而接近鸡胆所显的颜色，这说明检品所含的胆汁酸成分与鸡胆一致，而与眼镜蛇胆不同。
, 百拇医药
3.2 从薄层色谱图1可以看到，10个检品均以b(TCDCA+TDCA)斑点为主，而眼镜蛇胆则以a(TCA)斑点为主，b斑点较小。图2表明：虽然眼镜蛇胆、鸡胆、鸭胆均以a、b两个斑点为主，但每种样品两斑点含量的相对大小均有较大差异，眼镜蛇胆以a斑点为主，b斑点很小；鸡胆、鸭胆以b斑点为主，鸡胆a斑点也有一定量，而鸭胆a斑点则很小。显然，检品是与鸡胆相一致的。
3.3 各项检验结果均表明，检品可能为鸡胆干品，而非眼镜蛇胆。本文利用薄层色谱、胆囊外观性状和K2Cr2O7沉淀反应、糠醛-硫酸显色反应等进行眼镜蛇胆伪品鉴别，方法简单、重现性好、专属性强，可作为真伪蛇胆的鉴别方法。
参考文献
1.中国药典(95版)二部.1995：388
2.植达诗.真伪蛇胆的简易鉴别.中药通报.1988，5；13
3.张小来.伪劣蛇胆的鉴别.现代应用药学.1990，7(3)：20
(收稿：2000-04-01；修回：2000-04-19), 百拇医药
单位：(广东药学院分析化学教研室 广州 510224)
关键词：蛇胆；鉴别
广东药学000412 摘要 通过胆囊外观性状，胆汁的K2Cr2O7沉淀、糠醛-硫酸显色反应以及薄层色谱试验，对一批眼镜蛇胆检品进行了鉴别；实验表明：此批检品与眼镜蛇胆有较大区别，而与鸡胆较接近，应为伪品。本实验方法简单，重现性好，专属性强，可作为真伪蛇胆的鉴别方法。
蛇胆是一种名贵中药材，味苦而甘凉，具有清热、解毒、化痰镇咳之功效[1]；不同种类的蛇胆，其功效也有差异，一般以毒蛇胆如眼镜蛇胆的药用价值较高，主要用于治疗小儿咳嗽痰喘、百日咳、支气管炎等多种疾病；由于眼镜蛇胆来自天然，价格昂贵，多从东南亚一带进口。最近，我们对一批进口眼镜蛇胆进行鉴别，发现是伪品，检品在外观性状、理化性质、薄层色谱试验结果与眼镜蛇胆均有较大差异，而与鸡胆较为接近，现报道如下。
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1 实验材料和试剂
1.1 眼镜蛇胆、鸡胆、鸭胆 经鉴定后将活体处死，取其胆晾干。检品干胆由进口药材商提供。
1.2 供试液的制备
取检品干胆、眼镜蛇胆、鸡胆、鸭胆分别称重，剪碎，用甲醇浸泡、研磨、滤过，滤液合并各定容至2ml，作为供试液备用。
1.3 胆汁酸对照品
取胆酸(CA)，牛磺胆酸(TCA)，牛磺脱氧胆酸(TDCA)，牛磺鹅脱氧胆酸(TCDCA)，去氧胆酸(DCA)，甘氨胆酸(GCA)，鹅去氧胆酸(CDCA)对照品各1～2mg，用甲醇配成1mg/ml，等量混合，作对照品液。各种胆汁酸对照品均购自美国SIGMA化学公司。
实验用试剂均为分析纯。
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2 方法和结果
2.1 外观性状与化学鉴别
2.1.1 外观性状
眼镜蛇胆外形呈卵圆形，色棕黄，皮薄、光滑，胆管细长，软而有韧性，不粘手；胆皮不溶于甲醇；浸泡在60%乙醇中，溶液呈浅橙黄色，澄清、透明，胆囊不胀实，1年后观察不变；而检品外观性状与鸡胆、鸭胆一致：呈椭圆形，色草绿，皮厚、粗糙，胆管粗、硬、短，韧性差，易断，气腥；检品粘手，胆皮易溶于甲醇；浸泡在60%乙醇中，溶液呈草绿色，浑浊，有少量沉淀产生，胆囊胀实，1年后观察，溶液呈深棕色，浑浊，胆囊表面有溶出物；带烟熏腥味。
2.1.2 K2Cr2O7沉淀反应
取制备供试液时各种胆品的滤渣，挥干甲醇，用60～70℃热水提取，各得12ml滤液，分别取2ml滤液，加K2Cr2O7试液4份与稀盐酸1份混合液数滴，结果，眼镜蛇胆产生少许橙黄绿色沉淀；检品产生大量草黄绿色沉淀；鸡胆产生大量带泡沫的黄绿色絮状沉淀；鸭胆产生带泡沫草绿色沉淀。
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2.1.3 糠醛-硫酸显色反应[2]
分别取供试液各1滴，各加入新配1%糠醛溶液1ml，再加入50%硫酸液5ml，水浴(沸)加热10min，结果，眼镜蛇胆由黄褐色变成红紫色；检品均由黄棕色变成蓝黑色；鸡胆由浅黄绿色变成蓝黑色；鸭胆由黄墨绿色变成墨绿色。
从外观性状和化学反应可看出，检品与鸡胆接近，而与眼镜蛇胆有较大差别。
2.2 薄层色谱鉴别
2.2.1 薄层板制备
称取硅胶G(青岛海洋化工厂生产)10g，加入0.2%CMC-2Na溶液30ml，研匀。涂铺在15×20cm的玻璃板上，阴干，于105～110℃活化1h，放置在干燥器内备用。
2.2.2 点样、展开、检视
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2.2.2.1 取硅胶G板，分别点供试品液(眼镜蛇胆、检品)、混合胆汁酸对照品液各5μl，以异戊醇-醋酸-水(18∶10∶6)展开15cm，取出，晾干，喷以30%硫酸，于105℃烘10min。在日光下检视，结果见图1。
2.2.2.2 取检品干胆、眼镜蛇胆、鸭胆、鸡胆供试液与混合胆汁酸对照品液分别点5μl于硅胶G板上。展开剂及显色方法同前。结果见图2。从图1、图2可知检品均与鸡胆的斑点一致，而与眼镜蛇胆有明显的差异。
图1 检品、眼镜蛇胆的薄层色谱图
1 眼镜蛇胆 2～11 检品1～10号 12 混合胆酸
a:TCA；b：TDCA+TCDCA;c：GCA；d：CDCA+DCA；e：CA
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图2 检品、眼镜蛇胆、鸭胆、鸡胆的薄层色谱图
1、3 眼镜蛇胆 2、4 检品 5 鸭胆 6、7 鸡胆
8 混合胆酸a:TCA；b：TDCA+TCDCA;c：GCA；d：CDCA+DCA；e：CA
3 讨论
3.1 从外观性状和化学反应比较来看，检品与鸡胆较相近。在做外观性状鉴别时，做了蜜胆实验[3]、K2Cr2O7沉淀实验和糠醛-硫酸显色反应。蜜胆实验结果呈阴性，这可排除检品是蜜胆的可能性。K2Cr2O7沉淀反应结果显示：检品胆囊内含物与眼镜蛇胆是不一致的。糠醛-硫酸显色反应结果显示：检品与眼镜蛇胆不一致而接近鸡胆所显的颜色，这说明检品所含的胆汁酸成分与鸡胆一致，而与眼镜蛇胆不同。
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3.2 从薄层色谱图1可以看到，10个检品均以b(TCDCA+TDCA)斑点为主，而眼镜蛇胆则以a(TCA)斑点为主，b斑点较小。图2表明：虽然眼镜蛇胆、鸡胆、鸭胆均以a、b两个斑点为主，但每种样品两斑点含量的相对大小均有较大差异，眼镜蛇胆以a斑点为主，b斑点很小；鸡胆、鸭胆以b斑点为主，鸡胆a斑点也有一定量，而鸭胆a斑点则很小。显然，检品是与鸡胆相一致的。
3.3 各项检验结果均表明，检品可能为鸡胆干品，而非眼镜蛇胆。本文利用薄层色谱、胆囊外观性状和K2Cr2O7沉淀反应、糠醛-硫酸显色反应等进行眼镜蛇胆伪品鉴别，方法简单、重现性好、专属性强，可作为真伪蛇胆的鉴别方法。
参考文献
1.中国药典(95版)二部.1995：388
2.植达诗.真伪蛇胆的简易鉴别.中药通报.1988，5；13
3.张小来.伪劣蛇胆的鉴别.现代应用药学.1990，7(3)：20
(收稿：2000-04-01；修回：2000-04-19), 百拇医药