利巴韦林葡萄糖注射液内毒素检测

http://www.100md.com 《广东医学》 2000年第4期

     作者：林晓霞 盛晓玫 王晓燕

    单位：(珠海市药品检验所 广东 519000)

    关键词：利巴韦林葡萄糖注射液；细菌内毒素；鲎试剂

    广东药学000409 摘要 探讨细菌内毒素检查法检测利巴韦林葡萄糖注射液中内毒素的可行性。结果：利巴韦林葡萄糖注射液经4倍稀释后对鲎试剂无干扰，可选用灵敏度为0.125Eu/ml的鲎试剂检测利巴韦林葡萄注射液的细菌内毒素。

    探讨利巴韦林葡萄糖注射液应用细菌内毒素检查法检测其中内毒素的可行性，实验表明，利巴韦林葡萄糖注射液具有一定的干扰作用，但可通过稀释清除干扰。

    1 实验部分

    1.1 实验材料

    1.1.1 细菌内毒素工作标准品 10Eu/支，批号9906，中国生物制品检定所制。

    1.1.2 鲎试剂 灵敏度0.125 Eu/ml，0.1ml/支，批号981211B；

    无热原水 5ml/支，批号990723。

    均为湛江安度斯生物有限公司生产。

    1.1.3 利巴韦林葡萄糖注射液3批(批号990511，990604，990617)均为珠海市人民医院制剂室生产。

    1.1.4 仪器XW-80A型旋涡混合器(上海医科大学仪器厂)，BHW电热恒温水箱(北京医疗设备厂)，所用器皿经180℃干燥2h除去外源性内毒素。

    1.2 实验方法和结果

    1.2.1 细菌内毒素限值(L)的确定

    药品的细菌内毒素限值按如下公式确定L=K/M，式中K值按规定静脉注射为5.0 Eu/kg；M值为致热原检查剂量，按本品质量标准注射量为10ml/kg。因此本实验L值为0.5Eu/ml。

    1.2.2 供试品的最大有效稀释倍数(MVD)和供试品的浓度。

    供试品的最大有效稀释倍数(MVD)按下公式计算：MVD=L/λ当鲎试剂为0.125 Eu/ml时，MVD为4。

    1.2.3 鲎试剂灵敏度的复核

    按中国药典(95版，二部)细菌内毒素检查法操作，用无热原水将细菌内毒素工作标准品稀释成2λ、1λ、0.5λ、0.25λ等系列浓度后，进行试验，结果符合规定。

    1.2.4 供试品的干扰试验

    用无热原水将供试品经4倍稀释成最大有效稀释倍数MVD，分别用MVD和无热原水将细菌内毒素工作标准品稀释成同样浓度0.25、0.125、0.06、0.03 Eu/ml，各取每一浓度样品液加到含有0.1ml灵敏度为0.125Eu/ml的鲎试剂中，37℃保温60min，每种浓度水平做4管，分别用MVD和无热原水做阴性对照，结果利巴韦林葡萄糖注射液对细菌内毒素检查无干扰作用。

    1.2.5 样品内毒素检查与家兔法比较

    珠海市人民医院生产的利巴韦林葡萄糖注射液(批号990511，990604，990617)，用无热原水经4倍稀释后，用灵敏度为0.125 Eu/ml的鲎试剂检测，经与家兔法比较，结果一致。

    2 讨论

    当Es值在0.5～2.0λ_b之间，本批鲎试剂灵敏度是合格的。当Et值在0.5～2.0Es(包括0.5和2.0)时认为供试品在该浓度下对鲎试剂不存在干扰作用，在干扰实验前笔者曾用原液和2倍的稀释液分别对灵敏度为0.5 Eu/ml，0.25 Eu/ml的鲎试剂反应结果有抑制作用，通过提高鲎试剂的灵敏度，提高MVD减少抑制反应。本实验证明利巴韦林葡萄糖注射液通过4倍稀释处理后，用灵敏度为0.125 Eu/ml以上的鲎试剂进行内毒素检查是可行，可代替家兔法作为医院日常检测利巴韦林葡萄糖注射液检查。

    (收稿：1999-11-03；修回：2000-06)

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