退热Ⅲ号的抑菌、抗病毒药效学研究
作者：刘新春 王连山 梁济乐 孙立明 解砚英 王朋
单位：刘新春 王连山 梁济乐 孙立明(山东医科大学 附属医院，山东 济南 250012)；解砚英 王朋(山东医学科学院药物研究所)
关键词：退热Ⅲ号；抑菌；抗病毒；药效学研究
成都中医药大学学报000414 摘 要： 目的：研究纯中药制剂退热Ⅲ号的抑菌、抗病毒药效学。方法：对退热Ⅲ号进行体外抑菌试验及半体内法体外抗病毒作用试验。结果：该制剂抗菌谱较广，对金色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎双球菌等6个菌种中的76株菌显示不同程度的抗菌作用；对甲型流感病毒及乙型流感病毒具有明显的抑制作用。结论：退热Ⅲ号治疗感冒、发烧等疾病具有一定的实验依据。
中图分类号： R285.5 文献标识码：A 文章编号：1004-0668(2000)04-0035-02
, http://www.100md.com
退热Ⅲ号是由我院制剂室与中医临床共同研制的纯中药复方制剂，主要由石膏、金银花、杏仁、板蓝根、大青叶等中药组成，具有清热、退烧、抗病毒、止咳等作用。经过近20年的临床应用，取得了较好的临床治疗效果，为进一步开发该制剂，阐明其药效作用，我们对其药理作用进行了实验研究。现将退热Ⅲ号的抑菌、抗病毒药效学研究结果报告如下。
1 实验材料
1.1 药物
①退热Ⅲ号：由山东医科大学附属医院制剂室提供，批号960216；②阿斯匹林：济南市永宁制药股份有限公司，批号9509015-12；③复方大青叶合剂：批号960112；④急支糖浆：太极集团四川涪陵制药厂出品，批号9611473。
1.2 动物
①青紫兰家兔；②昆明种小鼠，均由山东实验动物中心提供。
, 百拇医药
1.3 菌种及病毒种
金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、沙门氏菌、肺炎双球菌、绿脓杆菌、乙型溶血性链球菌，来源于山东医科大学附属医院细菌室；甲型流感病毒(A/京防/44/89)、乙型流感病毒(乙/京防/3/91)，来源于山东省卫生防疫站病毒室。
2 方法与结果
2.1 抑菌作用
(1)培养：基肉汤培养基，0.5%牛肉膏，0.5%氯化钠，10%蛋白胨，0.5%葡萄糖，0.1%磷酸氢二钠，配成pH7.6肉汤基础培养基，高压灭菌后备用.肉汤培养基中加入2.2%琼脂，使其成为固体培养基(嗜血性细菌则加入1%的小牛血清)，以备试验用。
(2)菌种及菌液制备：金黄色葡萄球菌(15株)、表皮葡萄球菌(16株)、沙门氏菌(8株)、肺炎双球菌(11株)、绿脓杆菌(13株)、乙型溶血性链球菌(13株)，实验前取上述各菌分别接种于肉汤培养基中，37℃培养18 h，此菌液作为原菌液，使用前将其稀释(革兰氏阳性菌1∶10，革兰氏阴性菌1∶100)。
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(3)药物浓度：取浓缩退热Ⅲ号50 mL(含生药125 g)加450 mL肉汤培养基中稀释成250 mg/mL，再有肉汤培养基对倍稀释成125、62.5、31.3、15.6、7.8、3.9、2.0 mg/mL 7个浓度，调pH7.6，高压灭菌10磅20 min 备用。阴性对照药复方大青叶合剂，取该药100 mL加400 mL肉汤培养基，再对倍稀释成8个浓度，调pH7.6，高压灭菌10磅20 min备用。
将含上述不同浓度的药物培养基热溶，使其温度为45℃左右，倒入平皿使其自然冷却凝固。取上述浓度为10-1或10-2备用菌液用多点接种器接种于含有不同药物浓度的平皿培养基上，经37℃18 min 培养后，观察该药的抗菌谱及其最低抑菌浓度(MIC)，并计算半数最低抑制浓度(MIC50)和90%最低抑制浓度(MIC90)，以其评价退热Ⅲ号的抗菌活性。结果见表1。表1 退热Ⅲ号对临床菌株的抗菌效应 菌种
, 百拇医药
株数
药 物
复方大青叶合剂
退热Ⅲ号
MIC50比值
退热Ⅲ
复方大青叶合剂
MIC
MIC50
MIC90
MIC
MIC50
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MIC90
金黄色葡萄球菌
15
7.8
46.9
93.8
7.8
47.0
100.0
1∶1
表皮葡萄球菌
13
7.8
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78.1
187.5
3.9
62.5
187.5
0.8∶1
绿脓杆菌
16
3.9
31.3
93.8
15.6
93.7
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212.5
2.9∶1
沙门氏菌
8
62.5
125
250
62.5
162.5
237.5
1.3∶1
肺炎双球菌
11
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31.3
125
218
31.3
137.5
237.5
1.1∶1
乙型溶血性链球菌
13
31.3
125
198
31.3
, 百拇医药
106.3
225.0
0.9∶1
通过对6个菌种，76株菌的拮抗活性试验结果表明，退热Ⅲ号具有一定的抗菌效应，由MIC50所示，退热Ⅲ号对绿脓杆菌、表葡菌、金葡菌作用较好，对肺炎双球菌、乙型溶血性链球菌、沙门氏菌亦有不同程度的抑制作用。
2.2 抗病毒作用
(1)对甲型流感病毒的影响：该实验采用半体内法，退热Ⅲ号四个剂量组3.0、1.0、0.1、0.05 g/L，阳性对照组病毒唑0.1、0.05、0.025、0.0125 g/L，正常对照组及病毒对照组，将不同浓度的药物分别与病毒直接作用，立即接种于鸡胚尿囊腔，用石腊封接种孔，置37℃孵箱培养，48 h收取每胚之尿液，用0.5%鸡红血球凝集试验，判断药物的抗病毒活性，结果见表2。表2 退热Ⅲ号对甲、乙型流感病毒的影响 组别
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剂量(g/L)
甲型流感病毒
乙型流感病毒
退热Ⅲ号
3.00
-
+
1.00
-
+
0.10
+
+
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0.05
+
++
病毒唑
0.10
-
-
0.05
-
+
0.025
-
+
0.0125
, 百拇医药
+
+
病毒对照
-
+++
+++
正常对照
-
-
-
-代表无病毒生长，+代表少量病毒生长，++代表较多病毒生长，+++代表大量病毒生长
(2)对乙型流感病毒的影响：接种方法、药物剂量同甲型流感病毒实验，结果见表2。
, 百拇医药
由表2可见，退热Ⅲ号对甲、乙型流感病毒均有一定的抗病毒作用。其抗甲型流感病毒作用优于乙型流感病毒。
3 讨论
退热Ⅲ号是我们根据中医临床共同研制的纯中药制剂，主要由石膏、金银花、杏仁、板蓝根、大青叶等中药组成，具有清热、退烧、抗病毒、止咳等作用，经过近20年的临床应用，临床治疗病毒性感冒、发烧以及呼吸道感染、咳嗽等效果良好，尤其是在抗炎、抑菌和止咳方面，较之同类药物制剂疗效更优，并且具有服用方便，副作用小等优点。为此，我们对其药理作用进行了实验研究。实验表明，退热Ⅲ号对金葡菌、表葡菌、肺炎双球菌等均有不同程度的抗菌作用，对甲、乙型流感病毒均有一定的抗病毒作用。综上所述，退热Ⅲ号具有服用方便，疗效好，无明显毒副作用等优点。并经实验证实退热Ⅲ号有良好的抗和抗病毒作用。
作者简介：刘新春，男，1953年3月出生；副主任药师；研究方向：中药制剂研究。
参考文献
1，徐叔云.药理实验方法学[M].第二版.北京：人民卫生出版社，1991.1340
2，国家卫生部药政管理局.中药新药研究指南[S]，1994.4
收稿日期：2000-06-13, 百拇医药
单位：刘新春 王连山 梁济乐 孙立明(山东医科大学 附属医院，山东 济南 250012)；解砚英 王朋(山东医学科学院药物研究所)
关键词：退热Ⅲ号；抑菌；抗病毒；药效学研究
成都中医药大学学报000414 摘 要： 目的：研究纯中药制剂退热Ⅲ号的抑菌、抗病毒药效学。方法：对退热Ⅲ号进行体外抑菌试验及半体内法体外抗病毒作用试验。结果：该制剂抗菌谱较广，对金色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎双球菌等6个菌种中的76株菌显示不同程度的抗菌作用；对甲型流感病毒及乙型流感病毒具有明显的抑制作用。结论：退热Ⅲ号治疗感冒、发烧等疾病具有一定的实验依据。
中图分类号： R285.5 文献标识码：A 文章编号：1004-0668(2000)04-0035-02
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退热Ⅲ号是由我院制剂室与中医临床共同研制的纯中药复方制剂，主要由石膏、金银花、杏仁、板蓝根、大青叶等中药组成，具有清热、退烧、抗病毒、止咳等作用。经过近20年的临床应用，取得了较好的临床治疗效果，为进一步开发该制剂，阐明其药效作用，我们对其药理作用进行了实验研究。现将退热Ⅲ号的抑菌、抗病毒药效学研究结果报告如下。
1 实验材料
1.1 药物
①退热Ⅲ号：由山东医科大学附属医院制剂室提供，批号960216；②阿斯匹林：济南市永宁制药股份有限公司，批号9509015-12；③复方大青叶合剂：批号960112；④急支糖浆：太极集团四川涪陵制药厂出品，批号9611473。
1.2 动物
①青紫兰家兔；②昆明种小鼠，均由山东实验动物中心提供。
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1.3 菌种及病毒种
金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、沙门氏菌、肺炎双球菌、绿脓杆菌、乙型溶血性链球菌，来源于山东医科大学附属医院细菌室；甲型流感病毒(A/京防/44/89)、乙型流感病毒(乙/京防/3/91)，来源于山东省卫生防疫站病毒室。
2 方法与结果
2.1 抑菌作用
(1)培养：基肉汤培养基，0.5%牛肉膏，0.5%氯化钠，10%蛋白胨，0.5%葡萄糖，0.1%磷酸氢二钠，配成pH7.6肉汤基础培养基，高压灭菌后备用.肉汤培养基中加入2.2%琼脂，使其成为固体培养基(嗜血性细菌则加入1%的小牛血清)，以备试验用。
(2)菌种及菌液制备：金黄色葡萄球菌(15株)、表皮葡萄球菌(16株)、沙门氏菌(8株)、肺炎双球菌(11株)、绿脓杆菌(13株)、乙型溶血性链球菌(13株)，实验前取上述各菌分别接种于肉汤培养基中，37℃培养18 h，此菌液作为原菌液，使用前将其稀释(革兰氏阳性菌1∶10，革兰氏阴性菌1∶100)。
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(3)药物浓度：取浓缩退热Ⅲ号50 mL(含生药125 g)加450 mL肉汤培养基中稀释成250 mg/mL，再有肉汤培养基对倍稀释成125、62.5、31.3、15.6、7.8、3.9、2.0 mg/mL 7个浓度，调pH7.6，高压灭菌10磅20 min 备用。阴性对照药复方大青叶合剂，取该药100 mL加400 mL肉汤培养基，再对倍稀释成8个浓度，调pH7.6，高压灭菌10磅20 min备用。
将含上述不同浓度的药物培养基热溶，使其温度为45℃左右，倒入平皿使其自然冷却凝固。取上述浓度为10-1或10-2备用菌液用多点接种器接种于含有不同药物浓度的平皿培养基上，经37℃18 min 培养后，观察该药的抗菌谱及其最低抑菌浓度(MIC)，并计算半数最低抑制浓度(MIC50)和90%最低抑制浓度(MIC90)，以其评价退热Ⅲ号的抗菌活性。结果见表1。表1 退热Ⅲ号对临床菌株的抗菌效应 菌种
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株数
药 物
复方大青叶合剂
退热Ⅲ号
MIC50比值
退热Ⅲ
复方大青叶合剂
MIC
MIC50
MIC90
MIC
MIC50
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MIC90
金黄色葡萄球菌
15
7.8
46.9
93.8
7.8
47.0
100.0
1∶1
表皮葡萄球菌
13
7.8
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78.1
187.5
3.9
62.5
187.5
0.8∶1
绿脓杆菌
16
3.9
31.3
93.8
15.6
93.7
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212.5
2.9∶1
沙门氏菌
8
62.5
125
250
62.5
162.5
237.5
1.3∶1
肺炎双球菌
11
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31.3
125
218
31.3
137.5
237.5
1.1∶1
乙型溶血性链球菌
13
31.3
125
198
31.3
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106.3
225.0
0.9∶1
通过对6个菌种，76株菌的拮抗活性试验结果表明，退热Ⅲ号具有一定的抗菌效应，由MIC50所示，退热Ⅲ号对绿脓杆菌、表葡菌、金葡菌作用较好，对肺炎双球菌、乙型溶血性链球菌、沙门氏菌亦有不同程度的抑制作用。
2.2 抗病毒作用
(1)对甲型流感病毒的影响：该实验采用半体内法，退热Ⅲ号四个剂量组3.0、1.0、0.1、0.05 g/L，阳性对照组病毒唑0.1、0.05、0.025、0.0125 g/L，正常对照组及病毒对照组，将不同浓度的药物分别与病毒直接作用，立即接种于鸡胚尿囊腔，用石腊封接种孔，置37℃孵箱培养，48 h收取每胚之尿液，用0.5%鸡红血球凝集试验，判断药物的抗病毒活性，结果见表2。表2 退热Ⅲ号对甲、乙型流感病毒的影响 组别
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剂量(g/L)
甲型流感病毒
乙型流感病毒
退热Ⅲ号
3.00
-
+
1.00
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+
0.10
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0.05
+
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病毒唑
0.10
-
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0.05
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0.025
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+
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病毒对照
-
+++
+++
正常对照
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-
-
-代表无病毒生长，+代表少量病毒生长，++代表较多病毒生长，+++代表大量病毒生长
(2)对乙型流感病毒的影响：接种方法、药物剂量同甲型流感病毒实验，结果见表2。
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由表2可见，退热Ⅲ号对甲、乙型流感病毒均有一定的抗病毒作用。其抗甲型流感病毒作用优于乙型流感病毒。
3 讨论
退热Ⅲ号是我们根据中医临床共同研制的纯中药制剂，主要由石膏、金银花、杏仁、板蓝根、大青叶等中药组成，具有清热、退烧、抗病毒、止咳等作用，经过近20年的临床应用，临床治疗病毒性感冒、发烧以及呼吸道感染、咳嗽等效果良好，尤其是在抗炎、抑菌和止咳方面，较之同类药物制剂疗效更优，并且具有服用方便，副作用小等优点。为此，我们对其药理作用进行了实验研究。实验表明，退热Ⅲ号对金葡菌、表葡菌、肺炎双球菌等均有不同程度的抗菌作用，对甲、乙型流感病毒均有一定的抗病毒作用。综上所述，退热Ⅲ号具有服用方便，疗效好，无明显毒副作用等优点。并经实验证实退热Ⅲ号有良好的抗和抗病毒作用。
作者简介：刘新春，男，1953年3月出生；副主任药师；研究方向：中药制剂研究。
参考文献
1，徐叔云.药理实验方法学[M].第二版.北京：人民卫生出版社，1991.1340
2，国家卫生部药政管理局.中药新药研究指南[S]，1994.4
收稿日期：2000-06-13, 百拇医药