益肾化浊注射液对糖尿病大鼠糖脂代谢的影响
作者：乔雪峰 李晓苗 拓步雄 谢永宏 (指导)张发荣
单位：乔雪峰(陕西中医学院，陕西 咸阳 712083)；李晓苗 拓步雄(第四军医大学 西京医院)；谢永宏(解放军451医院)；张发荣(成都中医药大学)
关键词：益肾化浊注射液；糖尿病肾病；糖脂代谢
成都中医药大学学报000411 摘 要： 目的：探讨益肾化浊注射液防治糖尿病肾病(DN)的作用机制。方法：采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射制备糖尿病大鼠模型，给药6周后，观察益肾化浊注射液对其血糖、胆固醇、甘油三酯、血肌酐、尿素氮、尿蛋白排泄率的影响。结果：STZ糖尿病大鼠应用益肾化浊注射液治疗后，尿蛋白排泄率减少，血糖、胆固醇、甘油三酯、血肌酐、尿素氮均下降，与模型组比较差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论：益肾化浊注射液防治DN的作用机制之一是改善糖脂代谢水平。
, http://www.100md.com 中图分类号： R255.4；R587.2 文献标识码：A 文章编号：1004-0668(2000)04-0027-02
糖代谢异常对糖尿病肾病(DN)的发生与发展具有重要的影响。脂代谢紊乱可加速、加重糖尿病(DM)的肾脏损害，因而积极有效地改善糖脂代谢的异常，是防治DN发生与发展的一个重要环节。我们前期的实验研究表明，益肾化浊注射液对糖尿病大鼠肾脏具有良好的保护作用。为探讨益肾化浊注射液防治DN的作用机制，我们观察了益肾化浊注射液对糖脂代谢影响，现将结果报告如下。
1 材料和方法
1.1 实验材料
1.1.1 实验动物：雄性SD大鼠50只，体重180 g±20 g，由第四军医大学实验动物中心提供。饲料为普通大颗粒饲料，蛋白含量20%。实验期间动物自由饮水、饲食。
, http://www.100md.com
1.1.2 药品与试剂：链脲佐菌素(STZ)(SERVER公司)购自华美公司；益肾化浊注射液，由四川省乐山第一制药厂岷江分厂提供(试制)，规格：20 mL/支，每 mL相当于生药0.27 g；洛汀新(Lotensin)，由瑞士诺华制药有限公司制造，北京公司分装，批号：011300。
1.2 实验方法
1.2.1 造模、分组及给药：动物购回，适应性喂养1周后，随机分为正常非糖尿病组(NC组)10只及实验组40只，实验组于造模前禁食12 h，实验组造模采用STZ 55 mg/kg一次性腹腔注射，给药后24 h观察尿量、体重，并每日检测血糖、尿糖，连续3天，尿糖定性+++以上，血糖值超过16.5 mmol/L，并持续上述标准保持不变者，确定为糖尿病形成。将模型成功的糖尿病大鼠随机分为糖尿病模型组(DM组)、洛汀新治疗对照组(BE组)、高剂量益肾化浊注射液治疗组(HT组)和低剂量益肾化浊注射液治疗组(LT组)4组，每组10只。继续喂养1周后开始给药：HT组予益肾化浊注射液20 mL/kg*d，腹腔注射，1日1次；LT组予益肾化浊注射液5 mL/kg*d，腹腔注射，1日1次；BE组予洛汀新研磨溶于生理盐水中灌胃，剂量为10 mg/kg*d，1日1次；DM组、NC组常规喂养。治疗6周后处死动物。
, http://www.100md.com
1.2.2 标本采集及制备：动物处死前代谢笼留取24 h尿标本，检测尿蛋白排泄率。于实验终止时，乙醚麻醉，股动脉取血待测血糖、胆固醇、甘油三酯、血肌酐、尿素氮含量。
1.2.3 指标测定方法：尿蛋白排泄率测定为双缩脲比色法。血糖、胆固醇、甘油三酯、血肌酐、尿素氮测定采用日立7150型全自动生化分析仪。
1.2.4 统计学处理方法
所有数据均采用PEMS统计软件进行统计学处理，结果表示为
±s。
2 结果
2.1 益肾化浊注射液对血糖、胆固醇、甘油三酯的影响
糖尿病形成6周后，与NC组比较，DM组大鼠血糖、胆固醇、甘油三酯均明显升高。与DM组比较，HT组大鼠血糖、胆固醇、甘油三酯均明显降低，LT组大鼠甘油三酯降低，但血糖、胆固醇未见明显改善，BE组大鼠胆固醇降低，但血糖、甘油三酯未见明显改善。结果见表1。
, 百拇医药
2.2 益肾化浊注射液对血肌酐、尿素氮、尿蛋白排泄率的影响
糖尿病形成6周后，与NC组比较，DM组大鼠血肌酐、尿素氮、尿蛋白排泄率均明显升高。与DM组比较，HT组大鼠血肌酐、尿素氮、尿蛋白排泄率均明显降低，LT组上述指标未见明显改善，BE组大鼠尿蛋白排泄率明显降低，但血肌酐、尿素氮未见明显改善。结果见表2。表1 各组大鼠血糖、胆固醇、甘油三酯比较 组别
n
血糖(mmol/L)
胆固醇(mmol/L)
甘油三酯(mmol/L)
NC组
8
, http://www.100md.com 8.73±0.87
1.61±0.11
1.37±0.11
DM组
8
33.73±2.10**
2.42±0.38**
3.06±0.47**
BE组
8
30.99±3.38**
, http://www.100md.com
1.97±0.22**Δ
2.72±0.45**
HT组
8
21.55±2.78**ΔΔ
1.82±0.28ΔΔ
1.89±0.36**ΔΔ
LT组
8
31.14±3.25**
, http://www.100md.com
2.19±0.30**
2.40±0.33**ΔΔ
与正常组(NC组)比较， *P<0.05，**P<0.01；与高剂量益肾化浊注射液治疗组(HT组)比较 Δ*P<0.05；ΔΔ**P<0.01表2 各组大鼠血肌酐、尿素氮、尿蛋白排泄率比较 组别
n
肌酐(μmol/L)
尿素氮(mmol/L)
尿蛋白排泄率(mg/24h)
NC组
8
, 百拇医药
51.16±3.81
7.63±0.57
6.63±1.05
DM组
8
79.94±4.33**
17.36±1.84**
29.42±2.87**
BE组
8
75.49±5.10**
, http://www.100md.com
15.11±2.45**
18.90±2.61**ΔΔ
HT组
8
66.67±5.52**ΔΔ
12.60±2.32**ΔΔ
21.00±2.98**ΔΔ
LT组
8
76.50±5.25**
, 百拇医药
15.94±2.33**
26.94±2.80**
与正常组(NC组)比较， *P<0.05，**P<0.01
3 讨论
我们认为，糖尿病肾病因虚致实，因实致虚，病机错综复杂，但病机关键在于脾肾两虚，瘀血、水湿、浊毒内停。纯中药制剂益肾化浊注射液是在成都中医药大学张发荣教授数十年治疗慢性肾功能不全有效验方益肾化浊煎剂的基础上，精加工制成的静脉注射剂型，由人参、黄精、川芎、白花蛇舌草等组成。本方扶正祛邪，标本兼顾，具有补益脾肾，化浊祛瘀之效，适用于治疗脾肾气虚，瘀血、水湿、浊毒内停的糖尿病肾病。本实验结果表明，STZ糖尿病大鼠应用高剂量益肾化浊注射液治疗后，尿蛋白排泄率减少，血肌酐、尿素氮、血糖、胆固醇、甘油三酯均下降，表明益肾化浊注射液可有效地改善糖、脂代谢水平，延缓和阻止糖尿病肾脏的损害，对DN的防治具有良好的整体效应。
, 百拇医药
高血糖状态下发生多元醇通路激活、蛋白激酶C(PKC)活化及产生糖基化终末产物(AGEs)等糖代谢紊乱，可刺激多种细胞因子的释放，引起一系列的生化和生理改变，进而导致肾小球基底膜增厚，细胞外基质积聚和肾小球硬化。降低高血糖或使血糖维持在正常水平能有效地延缓糖尿病肾病的发生并减慢其进展速度[1]。同时糖尿病也存在着程度不同的脂代谢紊乱。研究认为，高脂血症可致肾小球硬化及间质损害，高脂血症患者较早出现肾小球硬化，动物实验表明，高脂饮食可引起肾小球硬化，细胞培养发现肾小球系膜细胞、内皮细胞、上皮细胞有低密度脂蛋白(LDL)受体。人的系膜细胞培养发现LDL、氧化修饰低密度脂蛋白(OX-LDL)可刺激纤维连接蛋白(FN)的mRNA表达，并呈剂量依赖关系，提示LDL、OX-LDL可刺激系膜基质的形成[2]。因此脂代谢异常也是诱发和加剧糖尿病肾病的因素之一。实验证明对肾次全切除伴高脂血症的大鼠，用氯贝酸(Clofibric Acid)和洛伐他汀(Lovastatin)纠正其高胆固醇血症后，能显著减少尿蛋白和肾小球硬化症的发生率。降脂药物同样能减轻糖尿病肾病的进展[3]。本实验证实益肾化浊注射液可降低糖尿病大鼠血糖、胆固醇、甘油三酯，改善糖脂代谢水平，减轻糖尿病大鼠的肾脏损害。由于人参可提高胰岛素水平而达到降血糖作用，黄精通过抑制葡萄糖转运蛋白进而抑制肝糖释放达到降血糖作用，因而我们推测益肾化浊注射液的降血糖作用与提高胰岛素水平和抑制葡萄糖转运蛋白有关。我们认为，益肾化浊注射液改善糖、脂代谢水平是其防治DN的作用机制之一。
, 百拇医药
作者简介：乔雪峰，男，33岁，医学博士；研究方向：内分泌系统疾病及肾脏疾病。
参考文献
1，刘志红，黎磊石.糖尿病肾病发病机理[J].中华肾脏病杂志，1999，15(2)：120
2，Kasiske B.Treatment of hyperlipidemia reduces glomerular injury in obese Zucker rats.Kidney Int, 1988, 33:667
3，O'Donnell MP.Enalapril reduces glomerular injury in obese Zucker rats[J].Kidney Int，1989，35：434
收稿日期：2000-07-20, 百拇医药
单位：乔雪峰(陕西中医学院，陕西 咸阳 712083)；李晓苗 拓步雄(第四军医大学 西京医院)；谢永宏(解放军451医院)；张发荣(成都中医药大学)
关键词：益肾化浊注射液；糖尿病肾病；糖脂代谢
成都中医药大学学报000411 摘 要： 目的：探讨益肾化浊注射液防治糖尿病肾病(DN)的作用机制。方法：采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射制备糖尿病大鼠模型，给药6周后，观察益肾化浊注射液对其血糖、胆固醇、甘油三酯、血肌酐、尿素氮、尿蛋白排泄率的影响。结果：STZ糖尿病大鼠应用益肾化浊注射液治疗后，尿蛋白排泄率减少，血糖、胆固醇、甘油三酯、血肌酐、尿素氮均下降，与模型组比较差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论：益肾化浊注射液防治DN的作用机制之一是改善糖脂代谢水平。
, http://www.100md.com 中图分类号： R255.4；R587.2 文献标识码：A 文章编号：1004-0668(2000)04-0027-02
糖代谢异常对糖尿病肾病(DN)的发生与发展具有重要的影响。脂代谢紊乱可加速、加重糖尿病(DM)的肾脏损害，因而积极有效地改善糖脂代谢的异常，是防治DN发生与发展的一个重要环节。我们前期的实验研究表明，益肾化浊注射液对糖尿病大鼠肾脏具有良好的保护作用。为探讨益肾化浊注射液防治DN的作用机制，我们观察了益肾化浊注射液对糖脂代谢影响，现将结果报告如下。
1 材料和方法
1.1 实验材料
1.1.1 实验动物：雄性SD大鼠50只，体重180 g±20 g，由第四军医大学实验动物中心提供。饲料为普通大颗粒饲料，蛋白含量20%。实验期间动物自由饮水、饲食。
, http://www.100md.com
1.1.2 药品与试剂：链脲佐菌素(STZ)(SERVER公司)购自华美公司；益肾化浊注射液，由四川省乐山第一制药厂岷江分厂提供(试制)，规格：20 mL/支，每 mL相当于生药0.27 g；洛汀新(Lotensin)，由瑞士诺华制药有限公司制造，北京公司分装，批号：011300。
1.2 实验方法
1.2.1 造模、分组及给药：动物购回，适应性喂养1周后，随机分为正常非糖尿病组(NC组)10只及实验组40只，实验组于造模前禁食12 h，实验组造模采用STZ 55 mg/kg一次性腹腔注射，给药后24 h观察尿量、体重，并每日检测血糖、尿糖，连续3天，尿糖定性+++以上，血糖值超过16.5 mmol/L，并持续上述标准保持不变者，确定为糖尿病形成。将模型成功的糖尿病大鼠随机分为糖尿病模型组(DM组)、洛汀新治疗对照组(BE组)、高剂量益肾化浊注射液治疗组(HT组)和低剂量益肾化浊注射液治疗组(LT组)4组，每组10只。继续喂养1周后开始给药：HT组予益肾化浊注射液20 mL/kg*d，腹腔注射，1日1次；LT组予益肾化浊注射液5 mL/kg*d，腹腔注射，1日1次；BE组予洛汀新研磨溶于生理盐水中灌胃，剂量为10 mg/kg*d，1日1次；DM组、NC组常规喂养。治疗6周后处死动物。
, http://www.100md.com
1.2.2 标本采集及制备：动物处死前代谢笼留取24 h尿标本，检测尿蛋白排泄率。于实验终止时，乙醚麻醉，股动脉取血待测血糖、胆固醇、甘油三酯、血肌酐、尿素氮含量。
1.2.3 指标测定方法：尿蛋白排泄率测定为双缩脲比色法。血糖、胆固醇、甘油三酯、血肌酐、尿素氮测定采用日立7150型全自动生化分析仪。
1.2.4 统计学处理方法
所有数据均采用PEMS统计软件进行统计学处理，结果表示为
±s。2 结果
2.1 益肾化浊注射液对血糖、胆固醇、甘油三酯的影响
糖尿病形成6周后，与NC组比较，DM组大鼠血糖、胆固醇、甘油三酯均明显升高。与DM组比较，HT组大鼠血糖、胆固醇、甘油三酯均明显降低，LT组大鼠甘油三酯降低，但血糖、胆固醇未见明显改善，BE组大鼠胆固醇降低，但血糖、甘油三酯未见明显改善。结果见表1。
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2.2 益肾化浊注射液对血肌酐、尿素氮、尿蛋白排泄率的影响
糖尿病形成6周后，与NC组比较，DM组大鼠血肌酐、尿素氮、尿蛋白排泄率均明显升高。与DM组比较，HT组大鼠血肌酐、尿素氮、尿蛋白排泄率均明显降低，LT组上述指标未见明显改善，BE组大鼠尿蛋白排泄率明显降低，但血肌酐、尿素氮未见明显改善。结果见表2。表1 各组大鼠血糖、胆固醇、甘油三酯比较 组别
n
血糖(mmol/L)
胆固醇(mmol/L)
甘油三酯(mmol/L)
NC组
8
, http://www.100md.com 8.73±0.87
1.61±0.11
1.37±0.11
DM组
8
33.73±2.10**
2.42±0.38**
3.06±0.47**
BE组
8
30.99±3.38**
, http://www.100md.com
1.97±0.22**Δ
2.72±0.45**
HT组
8
21.55±2.78**ΔΔ
1.82±0.28ΔΔ
1.89±0.36**ΔΔ
LT组
8
31.14±3.25**
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2.19±0.30**
2.40±0.33**ΔΔ
与正常组(NC组)比较， *P<0.05，**P<0.01；与高剂量益肾化浊注射液治疗组(HT组)比较 Δ*P<0.05；ΔΔ**P<0.01表2 各组大鼠血肌酐、尿素氮、尿蛋白排泄率比较 组别
n
肌酐(μmol/L)
尿素氮(mmol/L)
尿蛋白排泄率(mg/24h)
NC组
8
, 百拇医药
51.16±3.81
7.63±0.57
6.63±1.05
DM组
8
79.94±4.33**
17.36±1.84**
29.42±2.87**
BE组
8
75.49±5.10**
, http://www.100md.com
15.11±2.45**
18.90±2.61**ΔΔ
HT组
8
66.67±5.52**ΔΔ
12.60±2.32**ΔΔ
21.00±2.98**ΔΔ
LT组
8
76.50±5.25**
, 百拇医药
15.94±2.33**
26.94±2.80**
与正常组(NC组)比较， *P<0.05，**P<0.01
3 讨论
我们认为，糖尿病肾病因虚致实，因实致虚，病机错综复杂，但病机关键在于脾肾两虚，瘀血、水湿、浊毒内停。纯中药制剂益肾化浊注射液是在成都中医药大学张发荣教授数十年治疗慢性肾功能不全有效验方益肾化浊煎剂的基础上，精加工制成的静脉注射剂型，由人参、黄精、川芎、白花蛇舌草等组成。本方扶正祛邪，标本兼顾，具有补益脾肾，化浊祛瘀之效，适用于治疗脾肾气虚，瘀血、水湿、浊毒内停的糖尿病肾病。本实验结果表明，STZ糖尿病大鼠应用高剂量益肾化浊注射液治疗后，尿蛋白排泄率减少，血肌酐、尿素氮、血糖、胆固醇、甘油三酯均下降，表明益肾化浊注射液可有效地改善糖、脂代谢水平，延缓和阻止糖尿病肾脏的损害，对DN的防治具有良好的整体效应。
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高血糖状态下发生多元醇通路激活、蛋白激酶C(PKC)活化及产生糖基化终末产物(AGEs)等糖代谢紊乱，可刺激多种细胞因子的释放，引起一系列的生化和生理改变，进而导致肾小球基底膜增厚，细胞外基质积聚和肾小球硬化。降低高血糖或使血糖维持在正常水平能有效地延缓糖尿病肾病的发生并减慢其进展速度[1]。同时糖尿病也存在着程度不同的脂代谢紊乱。研究认为，高脂血症可致肾小球硬化及间质损害，高脂血症患者较早出现肾小球硬化，动物实验表明，高脂饮食可引起肾小球硬化，细胞培养发现肾小球系膜细胞、内皮细胞、上皮细胞有低密度脂蛋白(LDL)受体。人的系膜细胞培养发现LDL、氧化修饰低密度脂蛋白(OX-LDL)可刺激纤维连接蛋白(FN)的mRNA表达，并呈剂量依赖关系，提示LDL、OX-LDL可刺激系膜基质的形成[2]。因此脂代谢异常也是诱发和加剧糖尿病肾病的因素之一。实验证明对肾次全切除伴高脂血症的大鼠，用氯贝酸(Clofibric Acid)和洛伐他汀(Lovastatin)纠正其高胆固醇血症后，能显著减少尿蛋白和肾小球硬化症的发生率。降脂药物同样能减轻糖尿病肾病的进展[3]。本实验证实益肾化浊注射液可降低糖尿病大鼠血糖、胆固醇、甘油三酯，改善糖脂代谢水平，减轻糖尿病大鼠的肾脏损害。由于人参可提高胰岛素水平而达到降血糖作用，黄精通过抑制葡萄糖转运蛋白进而抑制肝糖释放达到降血糖作用，因而我们推测益肾化浊注射液的降血糖作用与提高胰岛素水平和抑制葡萄糖转运蛋白有关。我们认为，益肾化浊注射液改善糖、脂代谢水平是其防治DN的作用机制之一。
, 百拇医药
作者简介：乔雪峰，男，33岁，医学博士；研究方向：内分泌系统疾病及肾脏疾病。
参考文献
1，刘志红，黎磊石.糖尿病肾病发病机理[J].中华肾脏病杂志，1999，15(2)：120
2，Kasiske B.Treatment of hyperlipidemia reduces glomerular injury in obese Zucker rats.Kidney Int, 1988, 33:667
3，O'Donnell MP.Enalapril reduces glomerular injury in obese Zucker rats[J].Kidney Int，1989，35：434
收稿日期：2000-07-20, 百拇医药