动态测定出血性脑血管病患者血浆神经肽Y的临床意义
作者：孙琳 刘爱芬 李义召 许军 刘艺鸣
单位：孙琳(山东医科大学第二附属医院神经内科 济南 250033)；刘爱芬(山东医科大学附院神经内科)；李义召(山东医科大学附院神经内科)；许军(山东医科大学附院神经内科)；刘艺鸣(山东医科大学附院神经内科)
关键词：神经肽Y；脑出血；蛛网膜下腔出血
脑与神经疾病杂志000401
摘 要 目的：动态观察脑出血(CH)及蛛网膜下腔出血(SAH)患者血浆神经肽Y(NPY)的水平变化，探讨NPY与出血性脑血管病发生、发展的关系。方法：采用放射免疫法测定了46例脑出血，30例SAH患者及28例健康人血浆NPY的含量。结果：CH和SAH患者血浆NPY水平均明显高于对照组(P<0.001)。发病24小时内即显著升高，4～7天达高峰，8～15天开始下降，15天后CH组仍维持较高水平。重型CH患者NPY水平显著高于轻型和中型。大面积出血组高于小面积出血组。SAH患者伴迟发性缺血性障碍(DID)组明显高于不伴DID组。结论：NPY可能在CH及SAH的发生及病理生理过程中起重要作用。
, 百拇医药
The dynamical measurement of plasma Neuropeptide Y in paatients with hemorrhagic stroke and its clinical significance
Sun Lin,Liu Aifen,Li Yizhao,et al.
(Affiliated second Hospital,Shan Dong Medical College,Ji Nan 250033)
Abstract Objective：To observe dynamically the plasma Neuropeptide Y(NPY) concentration in patients with cerebral hemorrhage (CH) and subarachnoid hemorrhage (SAH) and its clinical significance.Methods:The levels of NPY in plasma were measured by radio immunoassay in 46 cases of CH patients.30cases of SAH patients and 28 helthys as the normal control.Results:Compared to the control group,the levels of NPY in patients with CH and SAH were increased significantly (P<0.001).The levels of NPY began to increase in 24 hours,to reach the peak on days 4～7.After the days 8～15,it began to decrease,but the levels of NPY in patients with CH were still higher than those in control group after 15 day .The changes of NPY were related with the diameter of hemorrhage site and neurological functional scales.There was a marked elevation in NPY levels in patients with SAH complicated by delayed ischemic deficits (DID) compared with whose in patients without (DID) (P<0.05).Conclusion:NPY play a important role in the development of hemorrhagic stroke.
, 百拇医药
Key words Neuropeptide Y Cerebral hemorrhage Subarachnoid hemorrhage
资料与方法
一、临床资料
1.脑出血组46例，男26例，女20例，年龄40～80岁，平均59±10岁。诊断依据1994年全国第四届脑血管病学术会议修订的诊断标准及评分方法，并均经CT及/或MRI证实。分组：①依病情轻重分组，按临床神经功能缺损评分标准，0～15分为轻型，16～30分为中型，31～45分为重型。②依脑出血面积分组：大脑出血横径>3.0cm，脑干出血横径>1.5cm，小脑出血>6ml为大面积出血，反之则为小面积出血。③依是否并发上消化道出血分为单纯CH组及并发上消化道出血组。④依CH发病后<24小时、1～3天、4～7天、8～15天、>15天分组进行动态观察。
2.SAH组30例，男20例，女10例，年龄32～80岁，平均58±13岁。诊断依据1994年全国第四届脑血管病学术会议修订的诊断标准及评分方法，并均经CT及/或腰穿证实。分组：①按是否发生迟发性缺血性障碍(delayde ischemic deficits,DID)分为DID组与非DID组。②依SAH发病后<24小时、1～3天、4～7天、8～15天、>15天分组进行动态观察。
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3.选择328例健康查体者作为对照组，年龄40～80岁，男18例，女10例。
二、方法
全部受试者均于清晨空腹采肘静脉血4ml，注入含EDTA二钠40ul和抑肽酶60ul试管中混匀，4℃3000rpm离心10分钟，分离血浆，-20℃保存。测定前将样本置于室温或冷水中复深，再次4℃3000rpm离心5分钟，取上清液测定。NPY放免药盒由北京东亚免疫技术研究所提供。
三、结果以
±s表示，应用t检验，方差分析及q检验对测定结果进行统计学分析。
结 果
表1 CH及SAH患者不同组别及对照组
, 百拇医药 血浆NPY含量变化(±s pg/ml) 组别
例数
NPY
对照组
28
110.35±36.45
CH组
46
534.38±186.32**
病情轻重
轻型
, 百拇医药
10
358.63±113.71*
中型
10
483.26±139.90#
重型
26
622.61±162.66
出血面积
大面积
28
413.22±216.68**
, http://www.100md.com
小面积
18
244.39±143.63
伴上消化道出血
无
18
394.35±135.57
有
28
610.06±172.78**
SAH组
30
520.67±184.13**
, http://www.100md.com
是否伴DID
DID组
17
574.26±162.07*
非DID组
13
435.21±202.20
注：与对照组及依不同情况分组的组间比较，*P<0.01，**P<0.001，#P<0.05表2 CH及SAH患者血浆NPY含量的动态变化(±s pg/ml)
<24小时
, http://www.100md.com 1～3天
4～7天
8～15天
>15天
CH组
383.88±190.83**
561.16±220.35
724.25±219.67
447.62±202.03
253.65±144.00**
例数
9
, http://www.100md.com
13
14
7
3
SAH组
412.89±62.74**
531.27±167.66
661.19±154.02
424.56±27.67
117.96±49.57
例数
3
, 百拇医药
10
9
5
3
注：与对照组比较**P<0.001
一、由表1可知：CH、SAH组NPY水平均显著高于对照组(P<0.001)且大面积出血组NPY水平显著高于小面积出血组，两者比较有显著性差异(P<0.001)。方差分析示轻、中、重型3组CH患者血浆NPY水平之间差异有显著性(F=10.11，P<0.01)。q检验示重型者血浆NPY水平较轻、中型患者显著升高(P<0.01，P<0.05)，轻、中型之间NPY水平无显著性差异。CH伴上消化道出血组NPY水平显著高于不伴上消化道出血组(P<0.001)。SAH伴DID组NPY水平显著高于不伴DID者(P<0.01)。
二、由表2可知：CH组NPY水平变化趋势为：发病24小时内即升高，1～3天进一步升高，4～7天达高峰，8～15天开始降低，15天后仍维持较高水平。SAH组NPY水平变化趋势为：发病24小时内即明显升高，1～3天进一步升高，4～7天达高峰，8～15天开始下降，15天后降至正常水平。
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讨 论
神经肽Y广泛分布于脑的各个区域，同时也存在于脑血管，其中以基底动脉分叉处，大脑前动脉及颈内动脉分叉处含量最高[3]。在外周，主要与去甲肾上腺素(NE)共同贮存于交感神经节，血液中的NPY部分来源于交感神经，另一部分则来源于血小板，在血小板聚集时释放[2，4]。向大鼠颈内动脉注射NPY，可使脑血流量减少40～98%，这样作用至少持续2小时。NPY的缩血管效应较5-羟色胺强10倍，较NE强500倍[5]。研究还发现，高血压大鼠大脑中动脉及其分支、小动脉、细动脉壁上含NPY神经纤维分布表面积密度及NPY抗体阳性反应物积分光密度均明显高于正常血压组，提示NPY与高血压的发生发展有着一定关系[6]。NPY通过以下四方面导致血管收缩[7，8]：①对血管平滑肌的直接作用； ②增强其他缩血管物质如5-羟色胺、NE的作用； ③对血管舒张物质如腺苷和乙酰胆碱等有抑制作用； ④刺激内皮细胞分泌释放内皮源性舒张因子(EDRF)和内皮素(ET)，对ET的刺激作用明显强于EDRF，表现出收缩血管的综合效应。
, 百拇医药
本研究结果发现，CH患者血浆NPY水平显著高于对照组，其动态变化规律与CH后脑水肿的发生，发展过程相一致。CH患者随病情严重程度的增加，NPY水平逐渐升高，且大面积出血组明显高于小面积出血组，伴上消化道出血组明显高于不伴上消化道出血组，提示NPY参与了CH的病理生理过程，其水平监测可作为判断CH病情严重程度，CH出血量多少及预后的重要指标。NPY还可以通过水解细胞膜上的磷脂肌醇，生成二脂酰甘油(DG)和三磷酸肌醇(IP3)，IP3作为第二信使，促进内质网Ca2+通道开放，使细胞内Ca2+浓度增加[9]，加重CH后神经元的损害。
本研究还发现，SAH患者血浆NPY水平明显增高，该结果与Edvinsson等[10]研究结果相一致。动态观察发现，NPY在SAH后24小时即升高，4～7天达最高峰，而SAH后CVS于发病5～10天出现最高，提示NPY可能与CVS的发生有关。SAH后NPY除发挥其自身的缩血管作用外，还可与其他缩血管物质如NE、5-HT等发生协同效应，使脑血管处于长期痉挛状态，推测NPY可能在维持CVS持续痉挛方面起重要作用。NPY通过增加神经细胞内Ca2+浓度，加重神经细胞损伤，提示其细胞毒性作用可能是SAH后DID发生、发展的原因之一。
, 百拇医药
出血性脑血管病患者血浆NPY升高的确切机理还不十分清楚，可能与以下因素有关：①应激反应，导致交感神经兴奋，交感神经末梢释放过多。②血管内膜损伤以及应激作用，激活血小板，使之释放过多NPY至血液中。③由于颅内血肿和脑水肿导致颅内压增高，造成下丘脑植物神经功能紊乱。④血肿对脑组织直接破坏作用，引起脑组织释放NPY增加，通过已破坏的血脑屏障，进入血循环。随着对NPY与脑血管病关系研究的不断深入，进一步探讨NPY代谢途径，寻找抑制其合成、释放及代谢的药物，定会为CH及SAH的治疗开辟新途径。
参考文献
1，Tatemote K,CarlquistM,Mutt V.Neuropeptide Y-a novel brain peptide with structural similaritides to peptideyy and pancreatic ploypeptide.Natrre 1982;296∶695～660.
, 百拇医药
2，何跃，综述.神经肽Y与缺血性脑血管疾病.国外医学脑血管疾病分册，1998，6∶267～270.
3，Allen JM,et al.Presence of neuropeptide Y in humem circle of willis and its possible role in cerebral vasospasm.Lancet 1984,2∶550.
4，Ericsson A,HemsenA,Lundberg JM.et al Detection of neuopeptide Y-like immunoreactiveiy and messengere RNAin rat platelets.The effects of vinblastine,reserpine,and dexamethasone on NPY expression in bolld cells.Exp Cell Res,1991,192∶604～611.
, 百拇医药
5，季鹰，吴建中，赵雅度.神经肽Y在蛛网膜下腔出血引起脑血管痉挛中的作用.中国病理生理杂志，1991，7(4)∶412～415.
6，任大宏，吴翠环.自发性高血压大鼠脑细小动脉神经肽Y分布的研究.中华病理学杂志，1995；(24)6∶375～377.
7，傅小锁，张景艳.神经肽Y及其作用.生理科学进展.1993；(24)6∶152～155.
8，刘建康，邓漪平.神经肽Y和血管活性肠肽对内皮源性血管收缩和舒张功能的调节作用.中国动脉硬化杂志，1998，6(1)∶42～45.
9，AdamssonM,EdvinssonL,BLockade of neuropeptide Y-induced potentiation of noradrenaline-evoked vasoconstriction by D-myo-1,2,6-trisphosphate (pp56) in rabbit femoral arteries Neuropeptides,1991,19∶13～16.
10，Edvinsson L,Uddman R,Juul R:Peptidergic innervation of the cerebral circulation.Role in subarchnoid hemorrhage in man.Neurosurg Rev 1990;13∶265～272.
收稿日期：2000-02-23, 百拇医药
单位：孙琳(山东医科大学第二附属医院神经内科 济南 250033)；刘爱芬(山东医科大学附院神经内科)；李义召(山东医科大学附院神经内科)；许军(山东医科大学附院神经内科)；刘艺鸣(山东医科大学附院神经内科)
关键词：神经肽Y；脑出血；蛛网膜下腔出血
脑与神经疾病杂志000401
摘 要 目的：动态观察脑出血(CH)及蛛网膜下腔出血(SAH)患者血浆神经肽Y(NPY)的水平变化，探讨NPY与出血性脑血管病发生、发展的关系。方法：采用放射免疫法测定了46例脑出血，30例SAH患者及28例健康人血浆NPY的含量。结果：CH和SAH患者血浆NPY水平均明显高于对照组(P<0.001)。发病24小时内即显著升高，4～7天达高峰，8～15天开始下降，15天后CH组仍维持较高水平。重型CH患者NPY水平显著高于轻型和中型。大面积出血组高于小面积出血组。SAH患者伴迟发性缺血性障碍(DID)组明显高于不伴DID组。结论：NPY可能在CH及SAH的发生及病理生理过程中起重要作用。
, 百拇医药
The dynamical measurement of plasma Neuropeptide Y in paatients with hemorrhagic stroke and its clinical significance
Sun Lin,Liu Aifen,Li Yizhao,et al.
(Affiliated second Hospital,Shan Dong Medical College,Ji Nan 250033)
Abstract Objective：To observe dynamically the plasma Neuropeptide Y(NPY) concentration in patients with cerebral hemorrhage (CH) and subarachnoid hemorrhage (SAH) and its clinical significance.Methods:The levels of NPY in plasma were measured by radio immunoassay in 46 cases of CH patients.30cases of SAH patients and 28 helthys as the normal control.Results:Compared to the control group,the levels of NPY in patients with CH and SAH were increased significantly (P<0.001).The levels of NPY began to increase in 24 hours,to reach the peak on days 4～7.After the days 8～15,it began to decrease,but the levels of NPY in patients with CH were still higher than those in control group after 15 day .The changes of NPY were related with the diameter of hemorrhage site and neurological functional scales.There was a marked elevation in NPY levels in patients with SAH complicated by delayed ischemic deficits (DID) compared with whose in patients without (DID) (P<0.05).Conclusion:NPY play a important role in the development of hemorrhagic stroke.
, 百拇医药
Key words Neuropeptide Y Cerebral hemorrhage Subarachnoid hemorrhage
资料与方法
一、临床资料
1.脑出血组46例，男26例，女20例，年龄40～80岁，平均59±10岁。诊断依据1994年全国第四届脑血管病学术会议修订的诊断标准及评分方法，并均经CT及/或MRI证实。分组：①依病情轻重分组，按临床神经功能缺损评分标准，0～15分为轻型，16～30分为中型，31～45分为重型。②依脑出血面积分组：大脑出血横径>3.0cm，脑干出血横径>1.5cm，小脑出血>6ml为大面积出血，反之则为小面积出血。③依是否并发上消化道出血分为单纯CH组及并发上消化道出血组。④依CH发病后<24小时、1～3天、4～7天、8～15天、>15天分组进行动态观察。
2.SAH组30例，男20例，女10例，年龄32～80岁，平均58±13岁。诊断依据1994年全国第四届脑血管病学术会议修订的诊断标准及评分方法，并均经CT及/或腰穿证实。分组：①按是否发生迟发性缺血性障碍(delayde ischemic deficits,DID)分为DID组与非DID组。②依SAH发病后<24小时、1～3天、4～7天、8～15天、>15天分组进行动态观察。
, http://www.100md.com
3.选择328例健康查体者作为对照组，年龄40～80岁，男18例，女10例。
二、方法
全部受试者均于清晨空腹采肘静脉血4ml，注入含EDTA二钠40ul和抑肽酶60ul试管中混匀，4℃3000rpm离心10分钟，分离血浆，-20℃保存。测定前将样本置于室温或冷水中复深，再次4℃3000rpm离心5分钟，取上清液测定。NPY放免药盒由北京东亚免疫技术研究所提供。
三、结果以
±s表示，应用t检验，方差分析及q检验对测定结果进行统计学分析。结 果
表1 CH及SAH患者不同组别及对照组
, 百拇医药 血浆NPY含量变化(
±s pg/ml) 组别例数
NPY
对照组
28
110.35±36.45
CH组
46
534.38±186.32**
病情轻重
轻型
, 百拇医药
10
358.63±113.71*
中型
10
483.26±139.90#
重型
26
622.61±162.66
出血面积
大面积
28
413.22±216.68**
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小面积
18
244.39±143.63
伴上消化道出血
无
18
394.35±135.57
有
28
610.06±172.78**
SAH组
30
520.67±184.13**
, http://www.100md.com
是否伴DID
DID组
17
574.26±162.07*
非DID组
13
435.21±202.20
注：与对照组及依不同情况分组的组间比较，*P<0.01，**P<0.001，#P<0.05表2 CH及SAH患者血浆NPY含量的动态变化(
±s pg/ml)<24小时
, http://www.100md.com 1～3天
4～7天
8～15天
>15天
CH组
383.88±190.83**
561.16±220.35
724.25±219.67
447.62±202.03
253.65±144.00**
例数
9
, http://www.100md.com
13
14
7
3
SAH组
412.89±62.74**
531.27±167.66
661.19±154.02
424.56±27.67
117.96±49.57
例数
3
, 百拇医药
10
9
5
3
注：与对照组比较**P<0.001
一、由表1可知：CH、SAH组NPY水平均显著高于对照组(P<0.001)且大面积出血组NPY水平显著高于小面积出血组，两者比较有显著性差异(P<0.001)。方差分析示轻、中、重型3组CH患者血浆NPY水平之间差异有显著性(F=10.11，P<0.01)。q检验示重型者血浆NPY水平较轻、中型患者显著升高(P<0.01，P<0.05)，轻、中型之间NPY水平无显著性差异。CH伴上消化道出血组NPY水平显著高于不伴上消化道出血组(P<0.001)。SAH伴DID组NPY水平显著高于不伴DID者(P<0.01)。
二、由表2可知：CH组NPY水平变化趋势为：发病24小时内即升高，1～3天进一步升高，4～7天达高峰，8～15天开始降低，15天后仍维持较高水平。SAH组NPY水平变化趋势为：发病24小时内即明显升高，1～3天进一步升高，4～7天达高峰，8～15天开始下降，15天后降至正常水平。
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讨 论
神经肽Y广泛分布于脑的各个区域，同时也存在于脑血管，其中以基底动脉分叉处，大脑前动脉及颈内动脉分叉处含量最高[3]。在外周，主要与去甲肾上腺素(NE)共同贮存于交感神经节，血液中的NPY部分来源于交感神经，另一部分则来源于血小板，在血小板聚集时释放[2，4]。向大鼠颈内动脉注射NPY，可使脑血流量减少40～98%，这样作用至少持续2小时。NPY的缩血管效应较5-羟色胺强10倍，较NE强500倍[5]。研究还发现，高血压大鼠大脑中动脉及其分支、小动脉、细动脉壁上含NPY神经纤维分布表面积密度及NPY抗体阳性反应物积分光密度均明显高于正常血压组，提示NPY与高血压的发生发展有着一定关系[6]。NPY通过以下四方面导致血管收缩[7，8]：①对血管平滑肌的直接作用； ②增强其他缩血管物质如5-羟色胺、NE的作用； ③对血管舒张物质如腺苷和乙酰胆碱等有抑制作用； ④刺激内皮细胞分泌释放内皮源性舒张因子(EDRF)和内皮素(ET)，对ET的刺激作用明显强于EDRF，表现出收缩血管的综合效应。
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本研究结果发现，CH患者血浆NPY水平显著高于对照组，其动态变化规律与CH后脑水肿的发生，发展过程相一致。CH患者随病情严重程度的增加，NPY水平逐渐升高，且大面积出血组明显高于小面积出血组，伴上消化道出血组明显高于不伴上消化道出血组，提示NPY参与了CH的病理生理过程，其水平监测可作为判断CH病情严重程度，CH出血量多少及预后的重要指标。NPY还可以通过水解细胞膜上的磷脂肌醇，生成二脂酰甘油(DG)和三磷酸肌醇(IP3)，IP3作为第二信使，促进内质网Ca2+通道开放，使细胞内Ca2+浓度增加[9]，加重CH后神经元的损害。
本研究还发现，SAH患者血浆NPY水平明显增高，该结果与Edvinsson等[10]研究结果相一致。动态观察发现，NPY在SAH后24小时即升高，4～7天达最高峰，而SAH后CVS于发病5～10天出现最高，提示NPY可能与CVS的发生有关。SAH后NPY除发挥其自身的缩血管作用外，还可与其他缩血管物质如NE、5-HT等发生协同效应，使脑血管处于长期痉挛状态，推测NPY可能在维持CVS持续痉挛方面起重要作用。NPY通过增加神经细胞内Ca2+浓度，加重神经细胞损伤，提示其细胞毒性作用可能是SAH后DID发生、发展的原因之一。
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出血性脑血管病患者血浆NPY升高的确切机理还不十分清楚，可能与以下因素有关：①应激反应，导致交感神经兴奋，交感神经末梢释放过多。②血管内膜损伤以及应激作用，激活血小板，使之释放过多NPY至血液中。③由于颅内血肿和脑水肿导致颅内压增高，造成下丘脑植物神经功能紊乱。④血肿对脑组织直接破坏作用，引起脑组织释放NPY增加，通过已破坏的血脑屏障，进入血循环。随着对NPY与脑血管病关系研究的不断深入，进一步探讨NPY代谢途径，寻找抑制其合成、释放及代谢的药物，定会为CH及SAH的治疗开辟新途径。
参考文献
1，Tatemote K,CarlquistM,Mutt V.Neuropeptide Y-a novel brain peptide with structural similaritides to peptideyy and pancreatic ploypeptide.Natrre 1982;296∶695～660.
, 百拇医药
2，何跃，综述.神经肽Y与缺血性脑血管疾病.国外医学脑血管疾病分册，1998，6∶267～270.
3，Allen JM,et al.Presence of neuropeptide Y in humem circle of willis and its possible role in cerebral vasospasm.Lancet 1984,2∶550.
4，Ericsson A,HemsenA,Lundberg JM.et al Detection of neuopeptide Y-like immunoreactiveiy and messengere RNAin rat platelets.The effects of vinblastine,reserpine,and dexamethasone on NPY expression in bolld cells.Exp Cell Res,1991,192∶604～611.
, 百拇医药
5，季鹰，吴建中，赵雅度.神经肽Y在蛛网膜下腔出血引起脑血管痉挛中的作用.中国病理生理杂志，1991，7(4)∶412～415.
6，任大宏，吴翠环.自发性高血压大鼠脑细小动脉神经肽Y分布的研究.中华病理学杂志，1995；(24)6∶375～377.
7，傅小锁，张景艳.神经肽Y及其作用.生理科学进展.1993；(24)6∶152～155.
8，刘建康，邓漪平.神经肽Y和血管活性肠肽对内皮源性血管收缩和舒张功能的调节作用.中国动脉硬化杂志，1998，6(1)∶42～45.
9，AdamssonM,EdvinssonL,BLockade of neuropeptide Y-induced potentiation of noradrenaline-evoked vasoconstriction by D-myo-1,2,6-trisphosphate (pp56) in rabbit femoral arteries Neuropeptides,1991,19∶13～16.
10，Edvinsson L,Uddman R,Juul R:Peptidergic innervation of the cerebral circulation.Role in subarchnoid hemorrhage in man.Neurosurg Rev 1990;13∶265～272.
收稿日期：2000-02-23, 百拇医药