老年大肠癌中PCNA和C-erbB-2的表达及意义
作者：于杰 王丽萍 王晓明
单位：于杰(白求恩医科大学第二临床学院普外科，长春 130041)；王丽萍(白求恩医科大学第一临床学院病理科)；王晓明(白求恩医科大学基础组胚室)
关键词：大肠癌；免疫组织化学；增殖细胞核抗原；原癌基因蛋白
中国老年学杂志000516摘 要 目的 检测PCNA和C-erbB-2在老年大肠癌中的表达及其意义。方法 对33例老年大肠癌的石蜡切片标本进行免疫组化染色。结果 PCNA和C-erbB-2在33例大肠癌中的阳性率分别为66.7%和60.6%；PCNA和C-erbB-2的表达与癌组织的分化程度及临床分期有明显相关性(P<0.01)，淋巴结转移组中二者的表达明显高于无转移组(P<0.01)。结论 PCNA和C-erbB-2过高表达者预后不良，PCNA和C-erbB-2可作为判定老年大肠癌恶性程度及预后的有效指标。
, 百拇医药
PCNA and C-erbB-2 oncogene expression in senile large intestine cancer and its clinical significance
Yu Jie,Wang Liping,Wang Xiaoming
(The Second Teaching Hospital of Norman Bethune University of Medical Sciences,Changchun 130021)
Abstract：Objective To examine the expression of PCNA and C-erbB-2 oncogene in elderly patients with carcinoma of colon and its clinical significance.Methods 33 cases of paraffin-embedded specimens were used for immunohistochemical study.Results The positive rates of PCNA and C-erbB-2 oncogene were 66.7%(22/33) and 60.6%(20/33).The expression of PCNA and C-erbB-2 were closely correlated with histodifferentiation and clinical staging(P<0.01),the carcinomas with marked positive PCNA and C-erbB-2 expression were more likely to metastasize to lymph nodes(P<0.01).Conclusions Patients with over-expression of PCNA and C-erbB-2 oncogene showed poor prognosis of elderly colon cancer patients.
, 百拇医药
Key words Large intestine cencer C-erbB-2 oncogene PCNA(Proliferating cell nuclear antigen)
增殖细胞核抗原(PCNA)和原癌基因蛋白(C-erbB-2)在肿瘤中的表达与肿瘤的临床生物学行为和预后的关系日益受到关注。本文应用免疫组化法对33例老年大肠癌进行PCNA和C-erbB-2蛋白标记，探讨PNCA和C-erbB-2在老年大肠癌组织中的表达特点及其与临床病理联系，为进一步研究老年大肠癌的治疗及预后提供有益资料。
1 材料与方法
1.1 材料来源 我院1998年外科手术经病理证实资料较完整的老年大肠癌33例。其中男性19例，女性14例；平均年龄66.7±5.6(60～79)岁。结肠癌17例，直肠癌16例；高分化腺癌10例，中分化腺癌13例，低分化腺癌6例，粘液腺癌4例。有淋巴结转移者13例。按Ducks临床分期A期5例，B期16例，C期11例，D期1例。送检标本经10%福尔马林固定，常规石蜡包埋切片。
, 百拇医药
1.2 试剂与方法 PCNA和C-erbB-2单克隆抗体由武汉博士德生物工程公司提供，采用SABC免疫组化方法，工作浓度1∶50。
1.3 结果观察与判定 每例标本至少观察10个高倍视野1 000个肿瘤细胞。C-erbB-2棕黄色阳性颗粒定位于细胞膜和膜内胞浆中，仅胞浆或胞核着色为阴性；阳性细胞超过25%为强阳性。PCNA棕黄色阳性颗粒定位于细胞核内，凡能辨认有棕色颗粒的即为阳性细胞。PCNA染色计数用PCNA指数(PCNA-LI)，PCNA指数≥20%为高表达。
1.4 统计方法 采用卡方检验或U检验。
2 结 果
2.1 PCNA和C-erbB-2在癌组织中的表达 33例大肠癌中PCNA阳性率为66.7%，强阳性占72.0%。C-erbB-2的阳性率为60.6%，强阳性占60.0%。其中PCNA和C-erbB-2共同表达者17例，占C-erbB-2阳性例数的85.0%。同时我们发现PCNA和C-erbB-2在癌组织中的表达呈异质性即同一切片的不同区域阳性细胞和阴性细胞可同时出现。
, 百拇医药
表1 PCNA和C-erbB-2表达与临床参数的关系 临床参数
例数
PCNA(+)
C-erbB-2(+)
PCNA(+)、C-erbB-2(+)
组织分型
高分化腺癌
10
5(50.0)1)
5(50.0)1)
4(40.0)1)
, 百拇医药
中分化腺癌
13
10(76.9)
9(69.2)
8(61.5)
低分化腺癌
6
5(83.3)
4(66.7)
4(66.7)
粘液腺癌
4
2(50.0)
, 百拇医药
2(50.0)
1(25.0)
Ducks分期
A
5
2(40.0)1)
3(60.0)
2(40.0)
B
16
10(62.5)
7(43.8)1)
, 百拇医药
6(37.5)1)
C
11
9(81.8)
9(81.8)
8(72.7)
D
1
1(100.0)
1(100.0)
1(100.0)
淋巴结转移
, 百拇医药
(+)
13
11(84.6)1)
11(84.6)1)
10(76.9)1)
(-)
20
11(55.0)
9(45.0)
7(35.0)
病变部位
直肠
, 百拇医药
16
12(75.0)1)
10(62.5)
9(56.3)
结肠
17
10(58.8)
10(58.8)
8(47.1)
1)P<0.01
2.2 PCNA和C-erbB-2的表达与各临床参数的关系 见表1。可见PCNA和C-erbB-2在不同类型大肠癌中的表达不同，二者的表达与癌组织分化程度密切相关，低分化腺癌中的表达明显高于高分化腺癌(P<0.01)，并且这种表达与临床分期及有淋巴结转移呈正相关，即有淋巴结转移组二者阳性率明显高于无淋巴结转移组(P<0.01)。同时PCNA在直肠癌中的表达明显高于结肠癌(P<0.01)，而C-erbB-2表达与病变部位无关(P>0.05)。
, http://www.100md.com
3 讨 论
PCNA的出现与细胞周期中的DNA合成有关，即G1期在细胞核中表达增强，S期达到高峰，G2/M期减少〔1～3〕。实验结果显示老年大肠癌中PCNA的表达与肿瘤组织分化程度、临床分期及淋巴结转移密切相关，肿瘤细胞分化越差，PCNA表达越强，反映肿瘤细胞增殖比值和分化程度密切相关。实验中PCNA阳性率(66.7%)略低于文献报道(81.1%)〔4〕。这可能与老年人整体新陈代谢水平低，肿瘤细胞增殖活性相应减慢有关。
原癌基因C-erbB-2与上皮生长因子具有高度同源性，在肿瘤细胞增殖和分化调节中起重要作用〔5〕。目前有关C-erbB-2的研究多集中在乳腺癌〔5～7〕，而对其在老年大肠癌中的变化尚少见报道。本实验表明C-erbB-2的表达强度与肿瘤细胞分化程度、临床分期和淋巴结转移呈正相关，而与病变部位无关。
, 百拇医药
普遍认为肿瘤发生淋巴结转移者预后差。本研究淋巴结转移组PCNA和C-erbB-2阳性率高达84.6%，明显高于无淋巴结转移组(P<0.01)，提示老年大肠癌中PCNA和C-erbB-2高表达者的肿瘤细胞局部浸润和淋巴转移的可能性大。因而二者可作为判定老年大肠癌恶性程度及估计预后的有效指标。 作者简介：于杰，男，39岁，主治医师，主要研究消化道肿瘤
参考文献
1，Guillic WJ.The C-erbB-2 gene and its expression in human tumours.In:Waxman J.Sikoraced.The molecular basis of cancer.Oxford:Black Wall Scientific Publications，1989；38：53
2，Penncy NS,Boaert M,Serfling V et al.PCNA expression in cutareous karatinous neoplasms and verruca vulgous.Am J Pathol，1992；141：139
, 百拇医药
3，Boton WE,Mikulka WK,Healy CG et al.Expression of proliferation associated antigen in the cell cycle of synchronized mammalian cells.Cytometry，1992；13：117
4，刘 勇，李启明，路名芝.nm23-H,P53,PCNA表达与大肠癌浸润转移的关系.临床与实验病理学杂志，1997；13(1)：21
5，Atulk Tandon.HER-2/neu oncogene protein and patients prognosis in breast cancer.J Clin Oncol，1989；7：1 120
6，姜 昆.原癌基因C-erbB-2研究进展.中华医学杂志，1996；76(2)：159
7，Leal CB,Schmitt FC,Bento MJ et al.Ductal carcinoma in situ of the breast:Histologic caterization and its relationship to ploidy and immunohis to chemical expression of hormone receptors P53 and C-erbB-2 protein.Cancer，1995；75(8)：2123
收稿日期：1999-05-17
修回日期：2000-01-31, 百拇医药
单位：于杰(白求恩医科大学第二临床学院普外科，长春 130041)；王丽萍(白求恩医科大学第一临床学院病理科)；王晓明(白求恩医科大学基础组胚室)
关键词：大肠癌；免疫组织化学；增殖细胞核抗原；原癌基因蛋白
中国老年学杂志000516摘 要 目的 检测PCNA和C-erbB-2在老年大肠癌中的表达及其意义。方法 对33例老年大肠癌的石蜡切片标本进行免疫组化染色。结果 PCNA和C-erbB-2在33例大肠癌中的阳性率分别为66.7%和60.6%；PCNA和C-erbB-2的表达与癌组织的分化程度及临床分期有明显相关性(P<0.01)，淋巴结转移组中二者的表达明显高于无转移组(P<0.01)。结论 PCNA和C-erbB-2过高表达者预后不良，PCNA和C-erbB-2可作为判定老年大肠癌恶性程度及预后的有效指标。
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PCNA and C-erbB-2 oncogene expression in senile large intestine cancer and its clinical significance
Yu Jie,Wang Liping,Wang Xiaoming
(The Second Teaching Hospital of Norman Bethune University of Medical Sciences,Changchun 130021)
Abstract：Objective To examine the expression of PCNA and C-erbB-2 oncogene in elderly patients with carcinoma of colon and its clinical significance.Methods 33 cases of paraffin-embedded specimens were used for immunohistochemical study.Results The positive rates of PCNA and C-erbB-2 oncogene were 66.7%(22/33) and 60.6%(20/33).The expression of PCNA and C-erbB-2 were closely correlated with histodifferentiation and clinical staging(P<0.01),the carcinomas with marked positive PCNA and C-erbB-2 expression were more likely to metastasize to lymph nodes(P<0.01).Conclusions Patients with over-expression of PCNA and C-erbB-2 oncogene showed poor prognosis of elderly colon cancer patients.
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Key words Large intestine cencer C-erbB-2 oncogene PCNA(Proliferating cell nuclear antigen)
增殖细胞核抗原(PCNA)和原癌基因蛋白(C-erbB-2)在肿瘤中的表达与肿瘤的临床生物学行为和预后的关系日益受到关注。本文应用免疫组化法对33例老年大肠癌进行PCNA和C-erbB-2蛋白标记，探讨PNCA和C-erbB-2在老年大肠癌组织中的表达特点及其与临床病理联系，为进一步研究老年大肠癌的治疗及预后提供有益资料。
1 材料与方法
1.1 材料来源 我院1998年外科手术经病理证实资料较完整的老年大肠癌33例。其中男性19例，女性14例；平均年龄66.7±5.6(60～79)岁。结肠癌17例，直肠癌16例；高分化腺癌10例，中分化腺癌13例，低分化腺癌6例，粘液腺癌4例。有淋巴结转移者13例。按Ducks临床分期A期5例，B期16例，C期11例，D期1例。送检标本经10%福尔马林固定，常规石蜡包埋切片。
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1.2 试剂与方法 PCNA和C-erbB-2单克隆抗体由武汉博士德生物工程公司提供，采用SABC免疫组化方法，工作浓度1∶50。
1.3 结果观察与判定 每例标本至少观察10个高倍视野1 000个肿瘤细胞。C-erbB-2棕黄色阳性颗粒定位于细胞膜和膜内胞浆中，仅胞浆或胞核着色为阴性；阳性细胞超过25%为强阳性。PCNA棕黄色阳性颗粒定位于细胞核内，凡能辨认有棕色颗粒的即为阳性细胞。PCNA染色计数用PCNA指数(PCNA-LI)，PCNA指数≥20%为高表达。
1.4 统计方法 采用卡方检验或U检验。
2 结 果
2.1 PCNA和C-erbB-2在癌组织中的表达 33例大肠癌中PCNA阳性率为66.7%，强阳性占72.0%。C-erbB-2的阳性率为60.6%，强阳性占60.0%。其中PCNA和C-erbB-2共同表达者17例，占C-erbB-2阳性例数的85.0%。同时我们发现PCNA和C-erbB-2在癌组织中的表达呈异质性即同一切片的不同区域阳性细胞和阴性细胞可同时出现。
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表1 PCNA和C-erbB-2表达与临床参数的关系 临床参数
例数
PCNA(+)
C-erbB-2(+)
PCNA(+)、C-erbB-2(+)
组织分型
高分化腺癌
10
5(50.0)1)
5(50.0)1)
4(40.0)1)
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中分化腺癌
13
10(76.9)
9(69.2)
8(61.5)
低分化腺癌
6
5(83.3)
4(66.7)
4(66.7)
粘液腺癌
4
2(50.0)
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2(50.0)
1(25.0)
Ducks分期
A
5
2(40.0)1)
3(60.0)
2(40.0)
B
16
10(62.5)
7(43.8)1)
, 百拇医药
6(37.5)1)
C
11
9(81.8)
9(81.8)
8(72.7)
D
1
1(100.0)
1(100.0)
1(100.0)
淋巴结转移
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(+)
13
11(84.6)1)
11(84.6)1)
10(76.9)1)
(-)
20
11(55.0)
9(45.0)
7(35.0)
病变部位
直肠
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16
12(75.0)1)
10(62.5)
9(56.3)
结肠
17
10(58.8)
10(58.8)
8(47.1)
1)P<0.01
2.2 PCNA和C-erbB-2的表达与各临床参数的关系 见表1。可见PCNA和C-erbB-2在不同类型大肠癌中的表达不同，二者的表达与癌组织分化程度密切相关，低分化腺癌中的表达明显高于高分化腺癌(P<0.01)，并且这种表达与临床分期及有淋巴结转移呈正相关，即有淋巴结转移组二者阳性率明显高于无淋巴结转移组(P<0.01)。同时PCNA在直肠癌中的表达明显高于结肠癌(P<0.01)，而C-erbB-2表达与病变部位无关(P>0.05)。
, http://www.100md.com
3 讨 论
PCNA的出现与细胞周期中的DNA合成有关，即G1期在细胞核中表达增强，S期达到高峰，G2/M期减少〔1～3〕。实验结果显示老年大肠癌中PCNA的表达与肿瘤组织分化程度、临床分期及淋巴结转移密切相关，肿瘤细胞分化越差，PCNA表达越强，反映肿瘤细胞增殖比值和分化程度密切相关。实验中PCNA阳性率(66.7%)略低于文献报道(81.1%)〔4〕。这可能与老年人整体新陈代谢水平低，肿瘤细胞增殖活性相应减慢有关。
原癌基因C-erbB-2与上皮生长因子具有高度同源性，在肿瘤细胞增殖和分化调节中起重要作用〔5〕。目前有关C-erbB-2的研究多集中在乳腺癌〔5～7〕，而对其在老年大肠癌中的变化尚少见报道。本实验表明C-erbB-2的表达强度与肿瘤细胞分化程度、临床分期和淋巴结转移呈正相关，而与病变部位无关。
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普遍认为肿瘤发生淋巴结转移者预后差。本研究淋巴结转移组PCNA和C-erbB-2阳性率高达84.6%，明显高于无淋巴结转移组(P<0.01)，提示老年大肠癌中PCNA和C-erbB-2高表达者的肿瘤细胞局部浸润和淋巴转移的可能性大。因而二者可作为判定老年大肠癌恶性程度及估计预后的有效指标。 作者简介：于杰，男，39岁，主治医师，主要研究消化道肿瘤
参考文献
1，Guillic WJ.The C-erbB-2 gene and its expression in human tumours.In:Waxman J.Sikoraced.The molecular basis of cancer.Oxford:Black Wall Scientific Publications，1989；38：53
2，Penncy NS,Boaert M,Serfling V et al.PCNA expression in cutareous karatinous neoplasms and verruca vulgous.Am J Pathol，1992；141：139
, 百拇医药
3，Boton WE,Mikulka WK,Healy CG et al.Expression of proliferation associated antigen in the cell cycle of synchronized mammalian cells.Cytometry，1992；13：117
4，刘 勇，李启明，路名芝.nm23-H,P53,PCNA表达与大肠癌浸润转移的关系.临床与实验病理学杂志，1997；13(1)：21
5，Atulk Tandon.HER-2/neu oncogene protein and patients prognosis in breast cancer.J Clin Oncol，1989；7：1 120
6，姜 昆.原癌基因C-erbB-2研究进展.中华医学杂志，1996；76(2)：159
7，Leal CB,Schmitt FC,Bento MJ et al.Ductal carcinoma in situ of the breast:Histologic caterization and its relationship to ploidy and immunohis to chemical expression of hormone receptors P53 and C-erbB-2 protein.Cancer，1995；75(8)：2123
收稿日期：1999-05-17
修回日期：2000-01-31, 百拇医药