北京人群感染幽门螺杆菌cagA分布特征
作者：尹焱 张建中 孙兆军
单位：尹焱 张建中(102206 北京，中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所)；孙兆军(病毒学研究所)
关键词：
中华微生物学和免疫学杂志000527 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)是慢性胃炎与消化性溃疡的主要病因，cagA被认为是Hp致病程度相关菌株的一种标志，cagA并非存在于所有的菌株中，它在Hp菌株中的存在状态有地区差异。为了解我国cagA存在情况以及与疾病的关系，本研究采用PCR方法，检测了从北京地区分离的Hp菌株cagA基因存在情况，并与国际上这方面的研究作了比较。
对64株Hp(由本实验室中国幽门螺杆菌科研协作组菌株库提供，其中胃癌来源2株，胃及十二指肠炎34株，胃
及十二指肠溃疡26株，以上均为北京地区菌株，国际标准株NCTC11637，NCTC11639)进行检测。模板提取采用煮沸法，严格操作，设立标准株阳性对照和阴性对照。使用引物序列为：上游(22mer)5′ GATAACAGGCAAGCTTTTGAGG 3′，下游(22mer)5′ CTGCAAAAGATTGTTTGGCAGA 3′。扩增条件：94℃ 60s，55℃ 60s，72℃ 60s，进行35个循环，最后72℃延伸300s。结果显示，北京地区分离的62株Hp均可检出cagA基因，阳性率为100%。经长时间电泳显示，不同Hp菌株的扩增片段分子量无明显差别，约为350bp左右。
北京地区分离的62株Hp中，cagA的阳性率为100%，欧美地区Hp菌株的cagA阳性率为70%左右。在欧美认为cagA与癌症和溃疡病密切相关，被用来区分Hp菌的毒性强弱。但根据我们的检测，在北京地区不存在这种相关性，在香港、日本和新加坡等亚洲地区或国家的研究也表明，Hp菌的cagA基因存在与否与胃癌、十二指肠溃疡无关。出现这种差异的可能原因为：(1)cagA的多样性。在某些地区Hp菌株可划分为cagA+致病株和cagA-非致病株，而在亚洲则主要为cagA+致病株和cagA+非致病株，即亚洲地区具有更多样的cagA类型。(2)cagA只是一种遗传标记，在欧美地区与特定的致病基因联系紧密，在亚洲则否。比如最初发现cagA与空泡毒素相伴产生，命名为毒素相关蛋白，但经基因缺失研究发现，cagA对空泡毒素产生并不是必需的。由于cagA极高的阳性率，在北京地区不能将cagA作为一种Hp菌株的毒力标志，不应通过检测该基因来鉴别Hp菌株的毒力高低。Hp菌具有很高的变异性，不同的菌株之间基因排列及数量均有较大差别。cagA蛋白变异性也很大，其分子量从110×103到140×103不等。对于全国Hp菌株的cagA基因携带情况尚需作进一步调查。
基金项目：国家自然科学基金资助项目(39870032)
(收稿日期：2000-01-24), http://www.100md.com
单位：尹焱 张建中(102206 北京，中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所)；孙兆军(病毒学研究所)
关键词：
中华微生物学和免疫学杂志000527 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)是慢性胃炎与消化性溃疡的主要病因，cagA被认为是Hp致病程度相关菌株的一种标志，cagA并非存在于所有的菌株中，它在Hp菌株中的存在状态有地区差异。为了解我国cagA存在情况以及与疾病的关系，本研究采用PCR方法，检测了从北京地区分离的Hp菌株cagA基因存在情况，并与国际上这方面的研究作了比较。
对64株Hp(由本实验室中国幽门螺杆菌科研协作组菌株库提供，其中胃癌来源2株，胃及十二指肠炎34株，胃
及十二指肠溃疡26株，以上均为北京地区菌株，国际标准株NCTC11637，NCTC11639)进行检测。模板提取采用煮沸法，严格操作，设立标准株阳性对照和阴性对照。使用引物序列为：上游(22mer)5′ GATAACAGGCAAGCTTTTGAGG 3′，下游(22mer)5′ CTGCAAAAGATTGTTTGGCAGA 3′。扩增条件：94℃ 60s，55℃ 60s，72℃ 60s，进行35个循环，最后72℃延伸300s。结果显示，北京地区分离的62株Hp均可检出cagA基因，阳性率为100%。经长时间电泳显示，不同Hp菌株的扩增片段分子量无明显差别，约为350bp左右。
北京地区分离的62株Hp中，cagA的阳性率为100%，欧美地区Hp菌株的cagA阳性率为70%左右。在欧美认为cagA与癌症和溃疡病密切相关，被用来区分Hp菌的毒性强弱。但根据我们的检测，在北京地区不存在这种相关性，在香港、日本和新加坡等亚洲地区或国家的研究也表明，Hp菌的cagA基因存在与否与胃癌、十二指肠溃疡无关。出现这种差异的可能原因为：(1)cagA的多样性。在某些地区Hp菌株可划分为cagA+致病株和cagA-非致病株，而在亚洲则主要为cagA+致病株和cagA+非致病株，即亚洲地区具有更多样的cagA类型。(2)cagA只是一种遗传标记，在欧美地区与特定的致病基因联系紧密，在亚洲则否。比如最初发现cagA与空泡毒素相伴产生，命名为毒素相关蛋白，但经基因缺失研究发现，cagA对空泡毒素产生并不是必需的。由于cagA极高的阳性率，在北京地区不能将cagA作为一种Hp菌株的毒力标志，不应通过检测该基因来鉴别Hp菌株的毒力高低。Hp菌具有很高的变异性，不同的菌株之间基因排列及数量均有较大差别。cagA蛋白变异性也很大，其分子量从110×103到140×103不等。对于全国Hp菌株的cagA基因携带情况尚需作进一步调查。
基金项目：国家自然科学基金资助项目(39870032)
(收稿日期：2000-01-24), http://www.100md.com