肝组织庚型肝病毒抗原的表达状况及临床意义
作者：杨志国 许家璋 隋云华 何长伦 高蕾 乐美兆 周育森 陈万荣
单位：杨志国 许家璋 隋云华 何长伦 高蕾(210002 南京，解放军第81医院肝病研究所)；乐美兆(病理科)；周育森 陈万荣(解放军军事医学科学院五所)
关键词：庚型肝炎病毒；免疫组织化学
江苏医药000604 【摘要】 目的 研究血清庚型肝炎病毒核糖核酸(HGVRNA)阳性或阴性肝病肝组织中HGV抗原(HGVAg)的表达状况及其临床意义。方法 应用抗HGV非结构5区(NS5)单克隆抗体(McAb)，以免疫组织化学BA法检测肝细胞中HGVNS5抗原。结果 HGVAg阳性染色为棕黄色，呈细小颗粒状位于肝细胞胞浆，肝组织中阳性肝细胞呈散在分布；在血清HGVRNA阳性和阴性肝组织中HGVAg的检出率分别为63.64%(7/11例)和5.62%(5/89例)。结论 HGV属于一种嗜肝病毒，HGVAg在肝组织的表达与血清HGVRNA关系密切。
, 百拇医药
Expression of hepatitis G virus NS5 antigen in liver tissue and its clinical significance
YANG Zhiguo XU Jiazhang SUI Yunhua
(The Institute of the 81st Hospital of PLA，Nanjing 210002)
【Abstract】 Objective To investigate the expression of hepatitis G virus(HGV) NS5 antigen in liver tissue from patients with HGVRNA(RT-PCR) seropositive or seronegative.Methods Liver specimens from patients with hepatitis were detected by immunohistochemical method with monoclonal antibody to HGV-NS5.Results The HGVAg positive staining was brown in color.HGVAg was presented as granule in cytoplasm of liver cell.The HGVAg positive hepatocytes were found to spread sporadically.The percentages of HGVAg positive staining were 63.64%(7/11) and 5.62%(5/89)from patients with HGVRNA seropositive and seronegative respectively.Conclusion HGV is hepatotropic virus.The expression of hepatic HGVAg had distinct relationship with the level of serum HGVRNA.
, http://www.100md.com
【Key words】 Hepatitis G virus Immunohistochemistry
庚型肝炎病毒(HGV)是单股正链RNA病毒，基因全长9.1～9.4 Kb，有一个大的编码前体多聚蛋白的读码框架，依次编码包膜区蛋白(E1，E2)及非结构区蛋白(NS2/NS3/NS4/NS5)。军事医学科学院微生物流行病学研究所成功地对HGVNS5区基因进行了克隆和表达，并制备了抗HGVNS5单克隆抗体(McAb)[1]，我们应用此抗体，以免疫组织化学方法，检测肝组织内庚型肝炎病毒抗原(HGVAg)，对其表达状况及临床意义作了初步探讨，现报告如下。
材料与方法
一、病例选择
, 百拇医药
100例肝炎病例均为1993年11月～1997年11月住院患者，男99例，女1例。血清HGVRNA阳性者11例，其中单独HGV感染者7例，合并HBV感染者2例，合并HAV或HEV感染者各1例；血清HGVRNA及HAV～HEV均阴性的肝炎患者88例，肝硬变1例。以上病例均经临床和病理检查确诊，诊断标准参照文献[2]。肝脏穿刺活检标本经10%中性福尔马林固定，石蜡包埋，作4 μm厚连续切片待检。
二、血清HAV、HBV、HCV、HEV及HGV感染指标的检测方法
采用ELISA法检测抗HAV-IgM、HBVM、抗HCV-IgG及抗HEV-IgG，试剂分别购于南京军区军事医学研究所和华美生物工程公司；采用多聚酶链反应(PCR)或逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HBVDNA、HCVRNA及HGVRNA，试剂源于华美生物工程公司和军事医学科学院五所，所有检测方法按操作规程进行，RT-PCR法检测HGVRNA步骤参见文献[3]。
, 百拇医药
三、肝组织HGVAg、HBsAg及HCVAg免疫组织化学检测方法
检测HGVAg采用BA法[4]：鼠抗HGVNS5 McAb、生物素标记羊抗鼠IgG及亲和素标记辣根过氧化物酶(HRP)均由军事医学科学院五所提供。用二甲基联苯胺(DAB)显色，具体操作规程参见文献[5]；采用正常鼠血清(工作浓度1∶50)代替McAb及用磷酸盐缓冲液(PBS：0.01M，pH7.4)代替生物素标记羊抗鼠IgG作为对照试验，血清HGVRNA阳性和/或肝组织HGVAg阳性者，均用免疫组织化学SP法分别检测肝组织HBsAg和HCVAg，也用DAB显色，试剂分别源于福州迈新生物技术有限公司和北京中山生物技术有限公司，按操作规程进行操作。
四、结果判断
HGVAg、HBsAg及HCVAg阳性肝细胞半定量(于高倍镜×400)标准为阳性(+)：阳性肝细胞偶见或少数呈散在分布，最密处<5个/HP；(++)：介于+和+++之间，最密处5～20个/HP；(+++)：阳性肝细胞易见，散在分布或灶性分布，最密处>20个/HP。
, 百拇医药
结 果
一、HGVAg阳性形态及分布
HGVAg染色阳性信号多位于肝细胞浆内，以近核处较多见，呈黄色或棕黄色小颗粒状，有的聚集成斑块样，细胞核及细胞膜也偶见着染。肝细胞内间质细胞及炎症细胞均未见阳性染色。
二、肝组织HGVAg检出率及半定量(见表1)
血清HGVRNA阳性肝炎患者中有7例单独HGV感染和4例合并感染，其中分别有3例和4例肝组织HGVAg阳性，单独感染者肝组织HGVAg半定量为++～+++，合并感染者肝组织HGVAg半定量均为+，血清HGVRNA阴性者中5例肝组织HGVAg阳性，其中1例HGVAg半定量+++者源于一肝硬变患者。对照试验均为阴性。
表1 肝组织中HGVAg表达状况 血清
, 百拇医药
受检
阳性
阳性染色
检出率
HGVRNA
例数
例数
+
++
+++
(%)
阳性
11
, 百拇医药 7
4
1
2
63.64
阴性
89
5
4
0
1
5.62*
*P值<0.05
, 百拇医药 三、HBsAg、HCVAg检出情况
血清HGVRNA和/或肝组织HGVAg阳性的16例患者肝组织均进行了HBsAg及HCVAg免疫组织化学检测。结果显示：血清HGVRNA阳性者中2/4例合并HBV感染者和1/4例合并HAV感染且血清抗HBs阳性者(未曾注射过乙肝疫苗)，肝组织HBsAg半定量在++～+++；血清HGVRNA阴性者中，有2例慢性肝炎肝组织HCVAg半定量为+。其余患者肝组织中HBsAg及HCVAg为阴性。
四、肝组织学改变
7例HGV单独感染者中，3例肝组织HGVAg阳性者肝组织学改变为1例肝细胞浊肿，少量淤胆，2例G1～G2，S1，表现为肝细胞浊肿，见少量点状坏死及灶性坏死，汇管区轻度纤维组织增生及少量淋巴细胞浸润，部分肝窦扩张，枯否细胞轻度增生，其中1例汇管区轻度碎屑样坏死。4例肝组织HGVAg阴性患者肝组织学改变为1例肝细胞浊肿，3例G1～G2，S1～S2。7例患者肝组织均可见淋巴细胞浸润于肝细胞间，有的汇管区亦见淋巴细胞浸润，HGVAg阳性细胞以肝组织点状坏死灶及灶性坏死灶附近较为多见。2例HGV合并HBV感染者肝组织学改变为慢性重型肝炎表现，2例HGV分别为合并HAV或HEV感染者肝组织学改变亦表现较重的慢性改变G2～G3，S1～S2，肝细胞普遍气球样变性，明显细胞内淤胆，明显的点状及灶状坏死，肝细胞间及汇管区多量淋巴细胞浸润，汇管区扩大，轻度碎屑坏死，纤维组织增生，其中1例有纤维隔形成。
, 百拇医药
5例血清HGVRNA阴性肝组织HGVAg阳性者HAV～HEV病原学标志均阴性，其中2例肝组织HCVAg同时阳性者肝组织学改变为慢性肝炎G1，S1，肝细胞间有淋巴细胞浸润；1例为轻度脂肪肝；另2例肝组织学改变1例为慢性肝炎G4，S3，肝细胞普遍水肿、坏死，多个肝小叶破坏，大量淋巴细胞浸润，其间淤胆明显，汇管区扩大，靠近，碎屑样坏死达肝小叶中带，纤维组织增生，部分纤维隔形成，大量淋巴细胞浸润，小胆管增生；还有1例为活动性肝硬变，肝小叶结构破坏，假小叶形成，灶性坏死，桥形坏死可见，汇管区淋巴细胞大量浸润，小胆管增生。
讨 论
自1996年HGV被发现以来[6]，医学界对其研究重点集中于HGV分子生物学和流行病学方面。近年对庚型肝炎病毒的致病性存在争议[7]究其原因：一是HGV感染者多为重叠或混合其它肝炎病毒感染，单一HGV感染病例不多；二是大量研究局限于血清学，而缺乏组织学的证据；三是缺少HGV感染的动物模型。我们曾率先在国内报道了庚型肝炎临床和病理特征[8]，并应用抗HGVNS5 McAb，以免疫组织化学方法检测血清HGVRNA阳性者肝组织中HGVAg[5]，和用HGVRNA阳性血清攻击后的恒河猴肝组织中HGVAg[9]。结果发现庚型肝炎临床症状轻，肝组织病理损害轻，HGVAg表达于人肝细胞浆和恒河猴肝细胞浆。我们曾用1例HGVRNA持续阳性1年慢性庚型肝炎患者的血清攻击恒河猴，动态观察了攻击前后动物的血清学和肝脏组织学的动态变化，发现感染的动物其肝功能改变和组织学病变与临床发现的病例相似，于感染后第18个月活体解剖动物，心、脾、肺、肾、胃、小肠等器管均正常，只有肝组织学表现为慢性病毒性肝炎，初步证明HGV是一种嗜肝病毒，具有致病性。为了进一步阐明血清HGVRNA阳性和阴性肝炎肝组织中HGVAg的表达状况及其临床意义，我们检测了11例血清HGVRNA阳性和89例血清HGVRNA阴性的肝炎肝组织中的HGVAg。
, http://www.100md.com
本文11例血清HGVRNA阳性患者中有7例(63.64%)患者肝组织中HGVAg阳性，89例血清HGVRNA阴性患者中只有5例(5.62%)肝组织中HGVAg阳性；7例单独HGV感染者中3例HGVAg半定量为++～+++，合并感染者肝组织HGVAg均为+，这说明肝组织HGVAg的表达状况与血清HGVRNA关系密切。但并不是所有血清HGVRNA阳性肝组织中HGVAg都为阳性，这可能是因为：(1)肝内HGVAg分布不均匀，散在分布，肝活体组织穿刺活检的随机性及局限性；(2)肝内HGVAg的表达量低于检测极限；(3)合并感染的其他肝炎病毒对HGV有干扰复制现象，进而影响到HGVAg的表达。
目前，因为检测血清抗HGV抗体的方法不成熟，其特异性和敏感性都较低，诊断HGV感染主要应用RT-PCR法检测血清HGVRNA，其中难免有漏诊者。本文89例血清HGVRNA阴性非甲～非戊型肝炎患者中，有5例肝组织HGVAg阳性，提示以免疫组织化学方法检测肝组织中HGVAg也可以成为一种HGV感染的补充手段，单独肝组织HGVAg阳性的肝炎病变在排除其他嗜肝病毒感染和酒精性、药物性肝炎等情况后，应考虑为庚型肝炎。
, 百拇医药
本文血清HGVRNA阳性的肝炎组织中HGVAg的检出率达63.64%(7/11)明显高于血清HGVRNA阴性的肝炎肝组织中HGVAg的检出率5.62%(5/89)，P值<0.05，这提示HGV属于一种嗜肝病毒。血清单独HGVRNA和/或组织单独HGVAg阳性者肝组织学改变可表现为肝细胞浊肿，程度不等的慢性肝炎和肝硬变等，大多是引起较轻的肝组织慢性损害，结合我们的先期关于庚型肝炎临床和病理特征研究[7]的报道，庚型肝炎症状轻，病理损害较轻，这可能亦是临床上发现的单纯庚型肝炎病例多为慢性肝炎的原因(因临床症状轻而不易被发觉或发现)。血清单独HGVRNA阳性和/或肝组织单独HGVAg阳性者的慢性肝炎，组织学上均发现有数量不等的淋巴细胞浸润，肝组织坏死灶附近HGVAg阳性肝细胞数量较多，提示HGVAg的表达与HGV致病机制可能有关。
本课题为全军“九五”(B类)课题(96D029)
参考文献
, 百拇医药
1，陈万荣，周育森，徐静，等.庚型肝炎病毒NS5区蛋白鼠单克隆抗体的制备.中国病毒学，1998，13：179-181.
2，病毒性肝炎防治方案(试行).中华传染病杂志，1995，13：241-247.
3，徐俊杰，周育森，许家璋，等.中国南京庚型肝炎病毒部分基因的克隆及cDNA序列分析.中华实验和临床病毒学杂志，1997，11：27-28.
4，徐在海，初连瑞，孔祥英，等.ABC和BA法的染色敏感性及其在病毒抗原定位中的应用.中华免疫学杂志，1986，2：241-243.
5，杨志国，许家璋，陈万荣，等.庚型肝炎肝脏的免疫组化研究.中华传染病杂志，1998，16：91-92.
6，Linnen J，Wages J，Zhang Keck，et al.Molecular cloning and disease association of hepatitis G virus：A transfusion-transmissible agent.Science，1996，271：505-508.
7，张定凤.庚型肝炎研究的现状.中华肝脏病杂志，1997，5：1-4.
8，许家璋，王晓英，隋云华，等.17例庚型肝炎临床病理分析.实用肝脏病杂志，1997，2：27-31.
9，鞠九龙，许家璋，汪茂荣，等.庚型病毒性肝炎的动物模型和肝脏免疫组化.南京部队医药，1997，5：19-24.
(收稿：1999-06-20 修回：1999-09-08), 百拇医药
单位：杨志国 许家璋 隋云华 何长伦 高蕾(210002 南京，解放军第81医院肝病研究所)；乐美兆(病理科)；周育森 陈万荣(解放军军事医学科学院五所)
关键词：庚型肝炎病毒；免疫组织化学
江苏医药000604 【摘要】 目的 研究血清庚型肝炎病毒核糖核酸(HGVRNA)阳性或阴性肝病肝组织中HGV抗原(HGVAg)的表达状况及其临床意义。方法 应用抗HGV非结构5区(NS5)单克隆抗体(McAb)，以免疫组织化学BA法检测肝细胞中HGVNS5抗原。结果 HGVAg阳性染色为棕黄色，呈细小颗粒状位于肝细胞胞浆，肝组织中阳性肝细胞呈散在分布；在血清HGVRNA阳性和阴性肝组织中HGVAg的检出率分别为63.64%(7/11例)和5.62%(5/89例)。结论 HGV属于一种嗜肝病毒，HGVAg在肝组织的表达与血清HGVRNA关系密切。
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Expression of hepatitis G virus NS5 antigen in liver tissue and its clinical significance
YANG Zhiguo XU Jiazhang SUI Yunhua
(The Institute of the 81st Hospital of PLA，Nanjing 210002)
【Abstract】 Objective To investigate the expression of hepatitis G virus(HGV) NS5 antigen in liver tissue from patients with HGVRNA(RT-PCR) seropositive or seronegative.Methods Liver specimens from patients with hepatitis were detected by immunohistochemical method with monoclonal antibody to HGV-NS5.Results The HGVAg positive staining was brown in color.HGVAg was presented as granule in cytoplasm of liver cell.The HGVAg positive hepatocytes were found to spread sporadically.The percentages of HGVAg positive staining were 63.64%(7/11) and 5.62%(5/89)from patients with HGVRNA seropositive and seronegative respectively.Conclusion HGV is hepatotropic virus.The expression of hepatic HGVAg had distinct relationship with the level of serum HGVRNA.
, http://www.100md.com
【Key words】 Hepatitis G virus Immunohistochemistry
庚型肝炎病毒(HGV)是单股正链RNA病毒，基因全长9.1～9.4 Kb，有一个大的编码前体多聚蛋白的读码框架，依次编码包膜区蛋白(E1，E2)及非结构区蛋白(NS2/NS3/NS4/NS5)。军事医学科学院微生物流行病学研究所成功地对HGVNS5区基因进行了克隆和表达，并制备了抗HGVNS5单克隆抗体(McAb)[1]，我们应用此抗体，以免疫组织化学方法，检测肝组织内庚型肝炎病毒抗原(HGVAg)，对其表达状况及临床意义作了初步探讨，现报告如下。
材料与方法
一、病例选择
, 百拇医药
100例肝炎病例均为1993年11月～1997年11月住院患者，男99例，女1例。血清HGVRNA阳性者11例，其中单独HGV感染者7例，合并HBV感染者2例，合并HAV或HEV感染者各1例；血清HGVRNA及HAV～HEV均阴性的肝炎患者88例，肝硬变1例。以上病例均经临床和病理检查确诊，诊断标准参照文献[2]。肝脏穿刺活检标本经10%中性福尔马林固定，石蜡包埋，作4 μm厚连续切片待检。
二、血清HAV、HBV、HCV、HEV及HGV感染指标的检测方法
采用ELISA法检测抗HAV-IgM、HBVM、抗HCV-IgG及抗HEV-IgG，试剂分别购于南京军区军事医学研究所和华美生物工程公司；采用多聚酶链反应(PCR)或逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HBVDNA、HCVRNA及HGVRNA，试剂源于华美生物工程公司和军事医学科学院五所，所有检测方法按操作规程进行，RT-PCR法检测HGVRNA步骤参见文献[3]。
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三、肝组织HGVAg、HBsAg及HCVAg免疫组织化学检测方法
检测HGVAg采用BA法[4]：鼠抗HGVNS5 McAb、生物素标记羊抗鼠IgG及亲和素标记辣根过氧化物酶(HRP)均由军事医学科学院五所提供。用二甲基联苯胺(DAB)显色，具体操作规程参见文献[5]；采用正常鼠血清(工作浓度1∶50)代替McAb及用磷酸盐缓冲液(PBS：0.01M，pH7.4)代替生物素标记羊抗鼠IgG作为对照试验，血清HGVRNA阳性和/或肝组织HGVAg阳性者，均用免疫组织化学SP法分别检测肝组织HBsAg和HCVAg，也用DAB显色，试剂分别源于福州迈新生物技术有限公司和北京中山生物技术有限公司，按操作规程进行操作。
四、结果判断
HGVAg、HBsAg及HCVAg阳性肝细胞半定量(于高倍镜×400)标准为阳性(+)：阳性肝细胞偶见或少数呈散在分布，最密处<5个/HP；(++)：介于+和+++之间，最密处5～20个/HP；(+++)：阳性肝细胞易见，散在分布或灶性分布，最密处>20个/HP。
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结 果
一、HGVAg阳性形态及分布
HGVAg染色阳性信号多位于肝细胞浆内，以近核处较多见，呈黄色或棕黄色小颗粒状，有的聚集成斑块样，细胞核及细胞膜也偶见着染。肝细胞内间质细胞及炎症细胞均未见阳性染色。
二、肝组织HGVAg检出率及半定量(见表1)
血清HGVRNA阳性肝炎患者中有7例单独HGV感染和4例合并感染，其中分别有3例和4例肝组织HGVAg阳性，单独感染者肝组织HGVAg半定量为++～+++，合并感染者肝组织HGVAg半定量均为+，血清HGVRNA阴性者中5例肝组织HGVAg阳性，其中1例HGVAg半定量+++者源于一肝硬变患者。对照试验均为阴性。
表1 肝组织中HGVAg表达状况 血清
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受检
阳性
阳性染色
检出率
HGVRNA
例数
例数
+
++
+++
(%)
阳性
11
, 百拇医药 7
4
1
2
63.64
阴性
89
5
4
0
1
5.62*
*P值<0.05
, 百拇医药 三、HBsAg、HCVAg检出情况
血清HGVRNA和/或肝组织HGVAg阳性的16例患者肝组织均进行了HBsAg及HCVAg免疫组织化学检测。结果显示：血清HGVRNA阳性者中2/4例合并HBV感染者和1/4例合并HAV感染且血清抗HBs阳性者(未曾注射过乙肝疫苗)，肝组织HBsAg半定量在++～+++；血清HGVRNA阴性者中，有2例慢性肝炎肝组织HCVAg半定量为+。其余患者肝组织中HBsAg及HCVAg为阴性。
四、肝组织学改变
7例HGV单独感染者中，3例肝组织HGVAg阳性者肝组织学改变为1例肝细胞浊肿，少量淤胆，2例G1～G2，S1，表现为肝细胞浊肿，见少量点状坏死及灶性坏死，汇管区轻度纤维组织增生及少量淋巴细胞浸润，部分肝窦扩张，枯否细胞轻度增生，其中1例汇管区轻度碎屑样坏死。4例肝组织HGVAg阴性患者肝组织学改变为1例肝细胞浊肿，3例G1～G2，S1～S2。7例患者肝组织均可见淋巴细胞浸润于肝细胞间，有的汇管区亦见淋巴细胞浸润，HGVAg阳性细胞以肝组织点状坏死灶及灶性坏死灶附近较为多见。2例HGV合并HBV感染者肝组织学改变为慢性重型肝炎表现，2例HGV分别为合并HAV或HEV感染者肝组织学改变亦表现较重的慢性改变G2～G3，S1～S2，肝细胞普遍气球样变性，明显细胞内淤胆，明显的点状及灶状坏死，肝细胞间及汇管区多量淋巴细胞浸润，汇管区扩大，轻度碎屑坏死，纤维组织增生，其中1例有纤维隔形成。
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5例血清HGVRNA阴性肝组织HGVAg阳性者HAV～HEV病原学标志均阴性，其中2例肝组织HCVAg同时阳性者肝组织学改变为慢性肝炎G1，S1，肝细胞间有淋巴细胞浸润；1例为轻度脂肪肝；另2例肝组织学改变1例为慢性肝炎G4，S3，肝细胞普遍水肿、坏死，多个肝小叶破坏，大量淋巴细胞浸润，其间淤胆明显，汇管区扩大，靠近，碎屑样坏死达肝小叶中带，纤维组织增生，部分纤维隔形成，大量淋巴细胞浸润，小胆管增生；还有1例为活动性肝硬变，肝小叶结构破坏，假小叶形成，灶性坏死，桥形坏死可见，汇管区淋巴细胞大量浸润，小胆管增生。
讨 论
自1996年HGV被发现以来[6]，医学界对其研究重点集中于HGV分子生物学和流行病学方面。近年对庚型肝炎病毒的致病性存在争议[7]究其原因：一是HGV感染者多为重叠或混合其它肝炎病毒感染，单一HGV感染病例不多；二是大量研究局限于血清学，而缺乏组织学的证据；三是缺少HGV感染的动物模型。我们曾率先在国内报道了庚型肝炎临床和病理特征[8]，并应用抗HGVNS5 McAb，以免疫组织化学方法检测血清HGVRNA阳性者肝组织中HGVAg[5]，和用HGVRNA阳性血清攻击后的恒河猴肝组织中HGVAg[9]。结果发现庚型肝炎临床症状轻，肝组织病理损害轻，HGVAg表达于人肝细胞浆和恒河猴肝细胞浆。我们曾用1例HGVRNA持续阳性1年慢性庚型肝炎患者的血清攻击恒河猴，动态观察了攻击前后动物的血清学和肝脏组织学的动态变化，发现感染的动物其肝功能改变和组织学病变与临床发现的病例相似，于感染后第18个月活体解剖动物，心、脾、肺、肾、胃、小肠等器管均正常，只有肝组织学表现为慢性病毒性肝炎，初步证明HGV是一种嗜肝病毒，具有致病性。为了进一步阐明血清HGVRNA阳性和阴性肝炎肝组织中HGVAg的表达状况及其临床意义，我们检测了11例血清HGVRNA阳性和89例血清HGVRNA阴性的肝炎肝组织中的HGVAg。
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本文11例血清HGVRNA阳性患者中有7例(63.64%)患者肝组织中HGVAg阳性，89例血清HGVRNA阴性患者中只有5例(5.62%)肝组织中HGVAg阳性；7例单独HGV感染者中3例HGVAg半定量为++～+++，合并感染者肝组织HGVAg均为+，这说明肝组织HGVAg的表达状况与血清HGVRNA关系密切。但并不是所有血清HGVRNA阳性肝组织中HGVAg都为阳性，这可能是因为：(1)肝内HGVAg分布不均匀，散在分布，肝活体组织穿刺活检的随机性及局限性；(2)肝内HGVAg的表达量低于检测极限；(3)合并感染的其他肝炎病毒对HGV有干扰复制现象，进而影响到HGVAg的表达。
目前，因为检测血清抗HGV抗体的方法不成熟，其特异性和敏感性都较低，诊断HGV感染主要应用RT-PCR法检测血清HGVRNA，其中难免有漏诊者。本文89例血清HGVRNA阴性非甲～非戊型肝炎患者中，有5例肝组织HGVAg阳性，提示以免疫组织化学方法检测肝组织中HGVAg也可以成为一种HGV感染的补充手段，单独肝组织HGVAg阳性的肝炎病变在排除其他嗜肝病毒感染和酒精性、药物性肝炎等情况后，应考虑为庚型肝炎。
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本文血清HGVRNA阳性的肝炎组织中HGVAg的检出率达63.64%(7/11)明显高于血清HGVRNA阴性的肝炎肝组织中HGVAg的检出率5.62%(5/89)，P值<0.05，这提示HGV属于一种嗜肝病毒。血清单独HGVRNA和/或组织单独HGVAg阳性者肝组织学改变可表现为肝细胞浊肿，程度不等的慢性肝炎和肝硬变等，大多是引起较轻的肝组织慢性损害，结合我们的先期关于庚型肝炎临床和病理特征研究[7]的报道，庚型肝炎症状轻，病理损害较轻，这可能亦是临床上发现的单纯庚型肝炎病例多为慢性肝炎的原因(因临床症状轻而不易被发觉或发现)。血清单独HGVRNA阳性和/或肝组织单独HGVAg阳性者的慢性肝炎，组织学上均发现有数量不等的淋巴细胞浸润，肝组织坏死灶附近HGVAg阳性肝细胞数量较多，提示HGVAg的表达与HGV致病机制可能有关。
本课题为全军“九五”(B类)课题(96D029)
参考文献
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1，陈万荣，周育森，徐静，等.庚型肝炎病毒NS5区蛋白鼠单克隆抗体的制备.中国病毒学，1998，13：179-181.
2，病毒性肝炎防治方案(试行).中华传染病杂志，1995，13：241-247.
3，徐俊杰，周育森，许家璋，等.中国南京庚型肝炎病毒部分基因的克隆及cDNA序列分析.中华实验和临床病毒学杂志，1997，11：27-28.
4，徐在海，初连瑞，孔祥英，等.ABC和BA法的染色敏感性及其在病毒抗原定位中的应用.中华免疫学杂志，1986，2：241-243.
5，杨志国，许家璋，陈万荣，等.庚型肝炎肝脏的免疫组化研究.中华传染病杂志，1998，16：91-92.
6，Linnen J，Wages J，Zhang Keck，et al.Molecular cloning and disease association of hepatitis G virus：A transfusion-transmissible agent.Science，1996，271：505-508.
7，张定凤.庚型肝炎研究的现状.中华肝脏病杂志，1997，5：1-4.
8，许家璋，王晓英，隋云华，等.17例庚型肝炎临床病理分析.实用肝脏病杂志，1997，2：27-31.
9，鞠九龙，许家璋，汪茂荣，等.庚型病毒性肝炎的动物模型和肝脏免疫组化.南京部队医药，1997，5：19-24.
(收稿：1999-06-20 修回：1999-09-08), 百拇医药