糖尿病合并肺结核患者外周血T淋巴细胞亚群分析
作者：付晓梅 杨清绪 朱全胜 吴惠茜
单位：付晓梅(516001 广东省惠州市中心人民医院)；杨清绪(516001 广东省惠州市中心人民医院)；朱全胜 吴惠茜(51 0080 广州市，中山医科大学病理学教研室)
关键词：糖尿病；肺结核；T淋巴细胞亚群
实用医学杂志000621 摘 要 目的：观察糖尿病合并肺结核患者外 周血T淋巴细胞亚群变化，并探讨其在糖尿病继发肺结核发生发展中的作用。方法：用间接 免疫荧光法测定27例糖尿病合并肺结核患者，31例糖尿病患者，34例肺结核患者及25例正常 人外周血CD+3、CD+4和CD+8 T淋巴细胞数量，并测定其空腹血糖。 结果：糖尿病合并肺结核患者及糖尿病患者外周血CD+3 T淋巴细胞明显低于 健康人(P<0.05)，但CD+8T淋巴细胞则显著高于正常人(P<0.01)，而且CD +8 T淋巴细胞与空腹血糖呈明显正相关关系(P<0.05)。结论：CD+ 8 T淋巴细胞的增多在糖尿病继发肺结核的发病机制中起着重要的作用。
, 百拇医药
糖尿病合并肺结核的发病机制过去一般认为与免疫力低下 ，易受结核杆菌感染有关。近年来对免疫细胞及其因子的研究发现，T淋巴细胞介导的免疫 增强作用及一些可溶性细胞因子如白细胞介素-2(IL-2)等的生物学活性在肺结核病发生发 展中起重要作用。本文就T淋巴细胞亚群在糖尿病合并肺结核发病中的作用作初步研究和探 讨。
1 对象与方法
1.1 对象
1.1.1 糖尿病合并肺结核组(DM+LTB组) 27例，男16例，女11例，平均年龄(52±5.7) 岁，且患肺结核病前均有3～21年的糖尿病病史。其中，3例为胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)合 并肺结核，24例为非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)合并肺结核。
1.1.2 糖尿病无并发症组(DM组) 31例，男19例，女12例，平均年龄(42±6.2)岁，病 史均在3年之内，且经临床、体检和实验室检查排除神经病变、高血压、心肾疾病、肺结核 、白内障和视网膜病变等糖尿病合并症。其中1例IDDM，30例为NIDDM。诊断符合1985年WHO 诊断标准。
, 百拇医药
1.1.3 肺结核病组(LTB组) 34例，男13例，女21例，平均年龄(41±7.8)岁，均无糖尿 病病史。34例中进展期19例，稳定期15例。诊断均符合WHO 1989年诊断标准。
1.1.4 正常对照组(Contnol组) 25例，男9例，女16例，平均年龄(40±5.2)岁。
1.2 实验方法
1.2.1 淋巴细胞分离计数 常规采外周血进行。
1.2.2 T淋巴细胞亚群测定 用间接免疫荧光法。所用抗CD3、CD4和CD8鼠单抗由 中山医科大学病理学教研室提供，FITC标记的兔抗鼠IgG购自武汉生物制品研究所。将淋巴 细胞悬液与鼠单抗混匀，4℃反应1.5 h，洗涤3次，然后加FITC标记的兔抗鼠IgG ，4℃反应1.5 h，洗涤3次。重悬至原体积取样滴于玻片镜检。用普通光计数视 野中淋巴细胞，再用紫外光计数同一视野中有荧光的细胞数，计算荧光阳性细胞百分率。
, http://www.100md.com
1.2.3 空腹血糖测定 测定糖尿病患者及糖尿病合并肺结核患者空腹血糖(FBS)。FBS在4 .3～20.8 mmol/L之间，平均8.9 mmol/L；全部病例尿糖均阳性(+～ ++++)，有7例尿酮阳性。
1.3 统计学方法 采用显著性t检验，同时空腹血糖水平与T淋巴细胞亚群作直线相关 分析。
2 结果
2.1 各组外周血T淋巴细胞亚群变化 见表1。
表1 各组外周血T淋巴细胞亚群变化(
±s，%) 组别
例数
CD+3
, 百拇医药
CD+4
CD+8
DM+LTB组
27
51.53±4.29*
36.64±8.11
39.24±6.67 **
DM组
31
49.34±5.25*
, 百拇医药 37.06±7.23
41.91±5.33**
LTB组
34
56.11±6.02
35.56±4.20
38.73±9.06**
Control组
25
59.03±7.31
38.27±8.22
, http://www.100md.com 30.16±7.17
注：与Control组比较 * P<0.05，** P<0.012.2 T淋巴细胞亚群与空腹血糖的相关性 相关检验结果表明，CD+8 T淋巴细胞与糖尿病患者及糖尿病合并结核患者(共58例)空腹血糖水平呈明显正相关关系( r＝0.6927，P<0.05)，CD+3及CD+4与空腹血糖无相关(r＝-0.176 9，r＝-0.2138，P>0.05)。
3 讨论
糖尿病合并肺结核发生率约为非糖尿病患者的2～5倍，国内统计资料证实，糖尿病合并肺结 核发病率为14.9%～20.0%，男、女发病率之比为1.8～6∶1[1]，两者之间有“ 姐妹病”之称，然而临床实践中却少见肺结核继发糖尿病，这说明两者之间并非简单的平行 关系，而是存在着某些复杂的因果关系。近年来，在对糖尿病和肺结核的发病机制研究中发 现，细胞免疫反应在其发生、发展中起着重要作用[2]，而T淋巴细胞介导的免疫增 强和细胞毒作用也越来越受到人们的重视。
, http://www.100md.com
T淋巴细胞介导的特异性杀伤和免疫增强作用，可通过几种方式来完成[3]，一方面 CD+8细胞在被外来抗原刺激后，发挥有效的细胞介导的免疫杀伤作 用，直接破坏靶细胞；另一方面，CD+4细胞在被外来抗原致敏后， 产生一些淋巴因子，诱导T细胞、B细胞和巨噬细胞的增殖。本研究表明，糖尿病患者、糖尿 病合并肺结核患者以及肺结核患者外周血CD+8细胞均明显高于正常人，CD+8细胞的 升高，其细胞毒作用再结合白介素-1(IL-1)可直接损伤胰岛细胞，尤其在I型糖尿病的发 生发展中起重要作用[4]；作用于肺靶器官时，联合结核杆菌的索状因子(cord fac tor)，直接破坏肺组织，导致干酪样坏死及空洞形成[5]，这与我们临床所观察到 糖尿病所合并肺结核绝大多数以干酪样病变为主是相一致的。
我们还观察到，患者空腹血糖与CD+8细胞呈明显正相关关系，这可能是由于葡萄糖的大 量堆积，以及继发性甘油三酯增多，为结核菌的繁殖提供了营养，大量繁殖的结核杆菌，其 中的索状因子，一方面直接损伤肺组织，另一方面致敏T淋巴细胞，尤其是CD+8细胞， 使其数量不但增加，还可释放各种淋巴因子，如巨噬细胞趋化因子、激活因子及集聚因子等 ，杀伤结核杆菌的同时，也严重破坏肺组织[5]，这就提示我们，在两病同时治疗 的基础上应尽快把血糖控制于正常范围，当口服降糖药物无效或中重度糖尿病患者应尽早使 用普通胰岛素，待结核病情好转或稳定后再酌情改用口服降糖药物[6]。
, http://www.100md.com
总之，T淋巴细胞介导的免疫杀伤和免疫增强，在糖尿病、肺结核病以及糖尿病合并肺结核 的发生、发展中均起着重要作用，尽管免疫增强和免疫杀伤对结核杆菌的繁殖或扩散有抑制 和破坏作用，但它同时也可损伤正常胰岛组织和肺组织，这也是糖尿病易继发肺结核的重要 原因之一。在医疗实践中，尤其肺结核咯血患者，我们应用糖皮质激素可减轻出血等肺结核 临床症状及体征，这就是由于糖皮质激素可抑制T淋巴细胞功能和IL-2等淋巴因子的释放， 从而 快速终止强大的炎症反应或引起损伤的超敏反应[7]。因此，控制T淋巴细胞介导的 免疫增强和杀伤抑制作用，对于阻断糖尿病和肺结核两者之间的恶性循环，从而达到良好的 治疗效果，中有着积极的意义。
参考文献
1，黎少林，主编. 全身性疾病的呼吸系统表现. 东营：石油大学出版社，1993.142.
2，李秀钧，董砚虎，程丽霞，等. 糖尿病研究进展--第16届国际糖尿病联盟 大会纪要. 中华内分泌代谢杂志，1998，14(2)：72.
, http://www.100md.com
3，Charles R,Mackay. T-cell memory:the connection between function,phe uotype and migration pathways. Immunology Today,1991,12(3)：6.
4，陈灏珠，主编. 内科学. 第4版. 北京：人民卫生出版社，1997.719.
5，武忠弼，主编. 病理学. 第4版. 北京：人民卫生出版社，1997.486.
6，胡安宇. 肺结核与糖尿病并发问题. 中华防痨通讯，1989，1：48.
7，付晓梅，杨清绪，吕汉文. 肺结核患者白细胞介素-I受体测定结果比较. 实 用医学杂志，1999，15(12)：968.
(收稿日期：2000-01-24), 百拇医药
单位：付晓梅(516001 广东省惠州市中心人民医院)；杨清绪(516001 广东省惠州市中心人民医院)；朱全胜 吴惠茜(51 0080 广州市，中山医科大学病理学教研室)
关键词：糖尿病；肺结核；T淋巴细胞亚群
实用医学杂志000621 摘 要 目的：观察糖尿病合并肺结核患者外 周血T淋巴细胞亚群变化，并探讨其在糖尿病继发肺结核发生发展中的作用。方法：用间接 免疫荧光法测定27例糖尿病合并肺结核患者，31例糖尿病患者，34例肺结核患者及25例正常 人外周血CD+3、CD+4和CD+8 T淋巴细胞数量，并测定其空腹血糖。 结果：糖尿病合并肺结核患者及糖尿病患者外周血CD+3 T淋巴细胞明显低于 健康人(P<0.05)，但CD+8T淋巴细胞则显著高于正常人(P<0.01)，而且CD +8 T淋巴细胞与空腹血糖呈明显正相关关系(P<0.05)。结论：CD+ 8 T淋巴细胞的增多在糖尿病继发肺结核的发病机制中起着重要的作用。
, 百拇医药
糖尿病合并肺结核的发病机制过去一般认为与免疫力低下 ，易受结核杆菌感染有关。近年来对免疫细胞及其因子的研究发现，T淋巴细胞介导的免疫 增强作用及一些可溶性细胞因子如白细胞介素-2(IL-2)等的生物学活性在肺结核病发生发 展中起重要作用。本文就T淋巴细胞亚群在糖尿病合并肺结核发病中的作用作初步研究和探 讨。
1 对象与方法
1.1 对象
1.1.1 糖尿病合并肺结核组(DM+LTB组) 27例，男16例，女11例，平均年龄(52±5.7) 岁，且患肺结核病前均有3～21年的糖尿病病史。其中，3例为胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)合 并肺结核，24例为非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)合并肺结核。
1.1.2 糖尿病无并发症组(DM组) 31例，男19例，女12例，平均年龄(42±6.2)岁，病 史均在3年之内，且经临床、体检和实验室检查排除神经病变、高血压、心肾疾病、肺结核 、白内障和视网膜病变等糖尿病合并症。其中1例IDDM，30例为NIDDM。诊断符合1985年WHO 诊断标准。
, 百拇医药
1.1.3 肺结核病组(LTB组) 34例，男13例，女21例，平均年龄(41±7.8)岁，均无糖尿 病病史。34例中进展期19例，稳定期15例。诊断均符合WHO 1989年诊断标准。
1.1.4 正常对照组(Contnol组) 25例，男9例，女16例，平均年龄(40±5.2)岁。
1.2 实验方法
1.2.1 淋巴细胞分离计数 常规采外周血进行。
1.2.2 T淋巴细胞亚群测定 用间接免疫荧光法。所用抗CD3、CD4和CD8鼠单抗由 中山医科大学病理学教研室提供，FITC标记的兔抗鼠IgG购自武汉生物制品研究所。将淋巴 细胞悬液与鼠单抗混匀，4℃反应1.5 h，洗涤3次，然后加FITC标记的兔抗鼠IgG ，4℃反应1.5 h，洗涤3次。重悬至原体积取样滴于玻片镜检。用普通光计数视 野中淋巴细胞，再用紫外光计数同一视野中有荧光的细胞数，计算荧光阳性细胞百分率。
, http://www.100md.com
1.2.3 空腹血糖测定 测定糖尿病患者及糖尿病合并肺结核患者空腹血糖(FBS)。FBS在4 .3～20.8 mmol/L之间，平均8.9 mmol/L；全部病例尿糖均阳性(+～ ++++)，有7例尿酮阳性。
1.3 统计学方法 采用显著性t检验，同时空腹血糖水平与T淋巴细胞亚群作直线相关 分析。
2 结果
2.1 各组外周血T淋巴细胞亚群变化 见表1。
表1 各组外周血T淋巴细胞亚群变化(
±s，%) 组别例数
CD+3
, 百拇医药
CD+4
CD+8
DM+LTB组
27
51.53±4.29*
36.64±8.11
39.24±6.67 **
DM组
31
49.34±5.25*
, 百拇医药 37.06±7.23
41.91±5.33**
LTB组
34
56.11±6.02
35.56±4.20
38.73±9.06**
Control组
25
59.03±7.31
38.27±8.22
, http://www.100md.com 30.16±7.17
注：与Control组比较 * P<0.05，** P<0.012.2 T淋巴细胞亚群与空腹血糖的相关性 相关检验结果表明，CD+8 T淋巴细胞与糖尿病患者及糖尿病合并结核患者(共58例)空腹血糖水平呈明显正相关关系( r＝0.6927，P<0.05)，CD+3及CD+4与空腹血糖无相关(r＝-0.176 9，r＝-0.2138，P>0.05)。
3 讨论
糖尿病合并肺结核发生率约为非糖尿病患者的2～5倍，国内统计资料证实，糖尿病合并肺结 核发病率为14.9%～20.0%，男、女发病率之比为1.8～6∶1[1]，两者之间有“ 姐妹病”之称，然而临床实践中却少见肺结核继发糖尿病，这说明两者之间并非简单的平行 关系，而是存在着某些复杂的因果关系。近年来，在对糖尿病和肺结核的发病机制研究中发 现，细胞免疫反应在其发生、发展中起着重要作用[2]，而T淋巴细胞介导的免疫增 强和细胞毒作用也越来越受到人们的重视。
, http://www.100md.com
T淋巴细胞介导的特异性杀伤和免疫增强作用，可通过几种方式来完成[3]，一方面 CD+8细胞在被外来抗原刺激后，发挥有效的细胞介导的免疫杀伤作 用，直接破坏靶细胞；另一方面，CD+4细胞在被外来抗原致敏后， 产生一些淋巴因子，诱导T细胞、B细胞和巨噬细胞的增殖。本研究表明，糖尿病患者、糖尿 病合并肺结核患者以及肺结核患者外周血CD+8细胞均明显高于正常人，CD+8细胞的 升高，其细胞毒作用再结合白介素-1(IL-1)可直接损伤胰岛细胞，尤其在I型糖尿病的发 生发展中起重要作用[4]；作用于肺靶器官时，联合结核杆菌的索状因子(cord fac tor)，直接破坏肺组织，导致干酪样坏死及空洞形成[5]，这与我们临床所观察到 糖尿病所合并肺结核绝大多数以干酪样病变为主是相一致的。
我们还观察到，患者空腹血糖与CD+8细胞呈明显正相关关系，这可能是由于葡萄糖的大 量堆积，以及继发性甘油三酯增多，为结核菌的繁殖提供了营养，大量繁殖的结核杆菌，其 中的索状因子，一方面直接损伤肺组织，另一方面致敏T淋巴细胞，尤其是CD+8细胞， 使其数量不但增加，还可释放各种淋巴因子，如巨噬细胞趋化因子、激活因子及集聚因子等 ，杀伤结核杆菌的同时，也严重破坏肺组织[5]，这就提示我们，在两病同时治疗 的基础上应尽快把血糖控制于正常范围，当口服降糖药物无效或中重度糖尿病患者应尽早使 用普通胰岛素，待结核病情好转或稳定后再酌情改用口服降糖药物[6]。
, http://www.100md.com
总之，T淋巴细胞介导的免疫杀伤和免疫增强，在糖尿病、肺结核病以及糖尿病合并肺结核 的发生、发展中均起着重要作用，尽管免疫增强和免疫杀伤对结核杆菌的繁殖或扩散有抑制 和破坏作用，但它同时也可损伤正常胰岛组织和肺组织，这也是糖尿病易继发肺结核的重要 原因之一。在医疗实践中，尤其肺结核咯血患者，我们应用糖皮质激素可减轻出血等肺结核 临床症状及体征，这就是由于糖皮质激素可抑制T淋巴细胞功能和IL-2等淋巴因子的释放， 从而 快速终止强大的炎症反应或引起损伤的超敏反应[7]。因此，控制T淋巴细胞介导的 免疫增强和杀伤抑制作用，对于阻断糖尿病和肺结核两者之间的恶性循环，从而达到良好的 治疗效果，中有着积极的意义。
参考文献
1，黎少林，主编. 全身性疾病的呼吸系统表现. 东营：石油大学出版社，1993.142.
2，李秀钧，董砚虎，程丽霞，等. 糖尿病研究进展--第16届国际糖尿病联盟 大会纪要. 中华内分泌代谢杂志，1998，14(2)：72.
, http://www.100md.com
3，Charles R,Mackay. T-cell memory:the connection between function,phe uotype and migration pathways. Immunology Today,1991,12(3)：6.
4，陈灏珠，主编. 内科学. 第4版. 北京：人民卫生出版社，1997.719.
5，武忠弼，主编. 病理学. 第4版. 北京：人民卫生出版社，1997.486.
6，胡安宇. 肺结核与糖尿病并发问题. 中华防痨通讯，1989，1：48.
7，付晓梅，杨清绪，吕汉文. 肺结核患者白细胞介素-I受体测定结果比较. 实 用医学杂志，1999，15(12)：968.
(收稿日期：2000-01-24), 百拇医药