食管癌和宫颈癌组织中P53蛋白过表达及其与放疗敏感性的关系
作者：张晓智 金 莉 王晓莉 李明众
单位：西安医科大学第一附属医院放疗科 710061
关键词：食管癌；宫颈癌；P53蛋白；放射敏感性
中国现代医学杂志000625 用免疫组化法对52例宫颈癌和食管癌标本中P53基因蛋白过表达进行研究，并探讨其与放疗效果的关系。结果显示，P53基因在宫颈癌和食管癌中过表达分别为35.48%和52.38%；P53蛋白过表达率在高分化鳞癌中较中低分化者低(P<0.05)，而与病期无关。在宫颈鳞癌，P53蛋白过表达者，近期放疗效果较差(P<0.05)，食管鳞癌P53蛋白过表达不同与放疗效果差异无显著性(P>0.05)，提示P53基因与放射敏感性有一定关系，但不是唯一因素，值得进一步研究。
, 百拇医药
分类号 R73-3
P53基因结构及表达异常是人类肿瘤中最常见的基因改变之一，大约有50%的人类肿瘤有P53基因的改变。因此，研究P53基因及其蛋白在正常细胞中的功能及在肿瘤发生发展中的作用，是近年来肿瘤基础研究的热点之一[1～4]，已经发现，P53基因在辐射损伤修复中的重要作用并与细胞放射敏感性有一定关系[5，6]，但P53基因蛋白过表达与临床放疗敏感性的研究较少[7]。本文选择食管癌鳞癌和宫颈鳞癌这两种临床常见的、放疗效果相差较大的肿瘤，对P53蛋白过表达及其与临床放疗效果的关系作一初步探讨。
1 材料与方法
1.1 临床资料
, http://www.100md.com
选择1996年5月～1997年7月于本科放疗的有完整资料的食管鳞癌和宫颈鳞癌活检标本共52例。食管癌21例，其中男17例，女4例，年龄47～65岁，平均60.8岁；大体分型均为髓质型。病理分级：高分化3例，中分化10例，低分化8例。临床分期(据阳泉会议，1976)：Ⅰ期6例，Ⅱ期10例，Ⅲ期5例。宫颈癌31例，年龄39～61岁，平均57.3岁；大体分型均为菜花型；病理分级：高分化4例，中分化16例，低分化11例；临床分期(据FIGO，1970)：Ⅱ期12例，Ⅲ期19例。所有病例均行单纯放疗，照射剂量DT60Gy以上。放疗后2周复查判定疗效，疗效评定标准依据肿瘤消失情况分为基本消失，残留或无变化2级。
1.2 试验来源和方法
P53单克隆抗体、SP试剂盒均为Santa公司产品，购自北京中山生物技术有限公司。以常规福尔马林固定标本，石蜡包埋，连续组织切片，免疫组化技术用SP法，用已知阳性的胃癌标本作为阳性对照，以PBS代替一抗作阴性对照。光镜下阳性产物为棕黄色，P53蛋白阳性细胞数>30%以上为过度表达。统计学方法用χ2检验。
, http://www.100md.com
2 结果
2.1 P53蛋白过表达与肿瘤分级、分期的关系
见表1。提示P53蛋白过表达与食管癌、宫颈癌的病理分级有关(P<0.05)，癌分化愈差，P53蛋白过表达率愈高。P53蛋白过表达与肿瘤临床分期差异无显著性(P>0.05)。
附表 P53蛋白过表达与病理分级和临床分期的关系 例(%) 组别
病理
临床
合计
高分化
中分化
, 百拇医药
低分化
Ⅰ期
Ⅱ期
Ⅲ期
食管癌
例数
P53蛋白过表达
6
1(16.67)
10
6(60.00)
5
4(80.00)
, http://www.100md.com
6
3(50.00)
10
6(60.00)
5
2(40.00)
21
11(52.38)
食管癌
例数
P53蛋白过表达
4
1(25.00)
, 百拇医药
16
5(31.25)
11
5(45.45)
12
4(33.33)
19
7(36.84)
31
11(35.48)
注：高分化组与低分化组比较差异显著(P<0.05)。食管癌Ⅰ期与Ⅱ、Ⅲ期，宫颈癌Ⅱ期与Ⅲ期比较差异无显著性(P>0.05)
, 百拇医药
2.2 P53蛋白与放疗效果的关系
食管癌组织P53蛋白过表达与放疗效果的关系：P53蛋白过表达中，病变消失5例，病变残存6例；P53蛋白非过表达中病变消失6例，病变残存4例，显示食管癌P53蛋白过表达不同与放疗效果差异无显著性(P>0.05)。宫颈癌组织P53蛋白过表达与放疗效果的关系：P53蛋白过表达中，病变消失3例，病变残存8例；P53蛋白非过表达中病变消失18例，病变残存2例，显示宫颈癌P53蛋白过表达者放疗效果较差(P<0.05)。3 讨论
野生型P53基因在细胞增殖周期中起重要的调控作用，作为基因“检查站”，P53基因参与细胞生长、分化和程序性死亡，调节基因稳定性和细胞对DNA损伤的反应，使DNA受损伤的细胞增殖周期停滞于G1期，以进行DNA的修复或启动细胞凋亡程序令其死亡，从而防止受损伤的细胞失控，增殖过度成为肿瘤。在恶性肿瘤中，P53蛋白过表达是一种普遍现象，且在深侵润、高转移、低分化肿瘤中较明显。本研究结果显示食管鳞癌和宫颈鳞癌P53蛋白过表达分别为52.38%和35.48%，两病种的高分化组与中低分化组之间，P53基因蛋白过表达差异有显著性(P<0.05)，临床分期之间表达差异无显著性(P>0.05)，这与多数文献报道结果相似[1，2]。资料表明，食管癌等肿瘤P53基因突变率在50%以上而宫颈癌仅为5.5%[4]，本组P53蛋白过表达二病种相关亦较大，推测P53蛋白的积累在宫颈鳞癌中不常见，可能与其中引起P53蛋白降解速度减慢的因素较少见及引起P53蛋白表达增高的“基因毒”如紫外线、离子辐射、化学致癌物质与宫颈癌发生关系不大有关。
, 百拇医药
本研究探讨这两种肿瘤P53蛋白过表达与临床放疗效果的关系，以期观察P53蛋白过表达对预测放射敏感性的价值，结果显示宫颈癌P53蛋白高表达者放疗效果较差(P<0.05)，似与实验结果[4]一致；而食管癌二者差异无显著性(P>0.05)，这与David等[5]对原发和复发喉癌P53基因状态与放疗效果的关系研究结果相似。推测这种情况的原因是P53基因并非单独起作用，也许还有其它基因因素，使其在不同的病变部位对细胞放射敏感性影响程度不同。由于放射敏感性对癌症治疗预后都有重要意义，P53基因在此方面的作用值得进一步深入探讨。
参考文献
1，Milde-langosch K,Alberecht K,Joram S,et al.Presence and persistence of HPV in fection and P53mutation in cancer of the cervix uteric and valva. Int J Cancer,1995;63(5):639
, http://www.100md.com
2，Sarbia M,Porschen R,Borchard F,et al.P53protein expression and prognosis in squamous cell carcinoma of the esophagus.Cancer,1994;74(8):2218
3，Martin HM,Filipe MI,Morris RW,et al.P53expression and prognosis ingasorle carcinoma.Int J Cancer,1992;50(6):859
4，Ga HK,Wang LD,Qi zhou,et al.P53tumor suppressor gene mutation in early esophageal precancerous lesions and carcinoma among high risk populations in Henan.China.Cancer Res,1994;54:4342
, http://www.100md.com
5，Scott WL,Schmitt EM,Smith SW,et al.P53is required for radiation induced apoptosis in mouse thy mocyte.Nature,1993;362(6423):847～849
6，Clarke AR,Purdie CA,Harrison DT,et al.Thymocyte apoptosis induced by P53 dependent and independent pathways.Nature,1993;362(6423):849～852
7，Arvid K,Pieter JS,Marinus AB,et al.Radioresistance and P53 status of T2 laryngeal carcinoma.Cancer,1995;l78(5):991～997
(1999-12-29收稿), 百拇医药
单位：西安医科大学第一附属医院放疗科 710061
关键词：食管癌；宫颈癌；P53蛋白；放射敏感性
中国现代医学杂志000625 用免疫组化法对52例宫颈癌和食管癌标本中P53基因蛋白过表达进行研究，并探讨其与放疗效果的关系。结果显示，P53基因在宫颈癌和食管癌中过表达分别为35.48%和52.38%；P53蛋白过表达率在高分化鳞癌中较中低分化者低(P<0.05)，而与病期无关。在宫颈鳞癌，P53蛋白过表达者，近期放疗效果较差(P<0.05)，食管鳞癌P53蛋白过表达不同与放疗效果差异无显著性(P>0.05)，提示P53基因与放射敏感性有一定关系，但不是唯一因素，值得进一步研究。
, 百拇医药
分类号 R73-3
P53基因结构及表达异常是人类肿瘤中最常见的基因改变之一，大约有50%的人类肿瘤有P53基因的改变。因此，研究P53基因及其蛋白在正常细胞中的功能及在肿瘤发生发展中的作用，是近年来肿瘤基础研究的热点之一[1～4]，已经发现，P53基因在辐射损伤修复中的重要作用并与细胞放射敏感性有一定关系[5，6]，但P53基因蛋白过表达与临床放疗敏感性的研究较少[7]。本文选择食管癌鳞癌和宫颈鳞癌这两种临床常见的、放疗效果相差较大的肿瘤，对P53蛋白过表达及其与临床放疗效果的关系作一初步探讨。
1 材料与方法
1.1 临床资料
, http://www.100md.com
选择1996年5月～1997年7月于本科放疗的有完整资料的食管鳞癌和宫颈鳞癌活检标本共52例。食管癌21例，其中男17例，女4例，年龄47～65岁，平均60.8岁；大体分型均为髓质型。病理分级：高分化3例，中分化10例，低分化8例。临床分期(据阳泉会议，1976)：Ⅰ期6例，Ⅱ期10例，Ⅲ期5例。宫颈癌31例，年龄39～61岁，平均57.3岁；大体分型均为菜花型；病理分级：高分化4例，中分化16例，低分化11例；临床分期(据FIGO，1970)：Ⅱ期12例，Ⅲ期19例。所有病例均行单纯放疗，照射剂量DT60Gy以上。放疗后2周复查判定疗效，疗效评定标准依据肿瘤消失情况分为基本消失，残留或无变化2级。
1.2 试验来源和方法
P53单克隆抗体、SP试剂盒均为Santa公司产品，购自北京中山生物技术有限公司。以常规福尔马林固定标本，石蜡包埋，连续组织切片，免疫组化技术用SP法，用已知阳性的胃癌标本作为阳性对照，以PBS代替一抗作阴性对照。光镜下阳性产物为棕黄色，P53蛋白阳性细胞数>30%以上为过度表达。统计学方法用χ2检验。
, http://www.100md.com
2 结果
2.1 P53蛋白过表达与肿瘤分级、分期的关系
见表1。提示P53蛋白过表达与食管癌、宫颈癌的病理分级有关(P<0.05)，癌分化愈差，P53蛋白过表达率愈高。P53蛋白过表达与肿瘤临床分期差异无显著性(P>0.05)。
附表 P53蛋白过表达与病理分级和临床分期的关系 例(%) 组别
病理
临床
合计
高分化
中分化
, 百拇医药
低分化
Ⅰ期
Ⅱ期
Ⅲ期
食管癌
例数
P53蛋白过表达
6
1(16.67)
10
6(60.00)
5
4(80.00)
, http://www.100md.com
6
3(50.00)
10
6(60.00)
5
2(40.00)
21
11(52.38)
食管癌
例数
P53蛋白过表达
4
1(25.00)
, 百拇医药
16
5(31.25)
11
5(45.45)
12
4(33.33)
19
7(36.84)
31
11(35.48)
注：高分化组与低分化组比较差异显著(P<0.05)。食管癌Ⅰ期与Ⅱ、Ⅲ期，宫颈癌Ⅱ期与Ⅲ期比较差异无显著性(P>0.05)
, 百拇医药
2.2 P53蛋白与放疗效果的关系
食管癌组织P53蛋白过表达与放疗效果的关系：P53蛋白过表达中，病变消失5例，病变残存6例；P53蛋白非过表达中病变消失6例，病变残存4例，显示食管癌P53蛋白过表达不同与放疗效果差异无显著性(P>0.05)。宫颈癌组织P53蛋白过表达与放疗效果的关系：P53蛋白过表达中，病变消失3例，病变残存8例；P53蛋白非过表达中病变消失18例，病变残存2例，显示宫颈癌P53蛋白过表达者放疗效果较差(P<0.05)。3 讨论
野生型P53基因在细胞增殖周期中起重要的调控作用，作为基因“检查站”，P53基因参与细胞生长、分化和程序性死亡，调节基因稳定性和细胞对DNA损伤的反应，使DNA受损伤的细胞增殖周期停滞于G1期，以进行DNA的修复或启动细胞凋亡程序令其死亡，从而防止受损伤的细胞失控，增殖过度成为肿瘤。在恶性肿瘤中，P53蛋白过表达是一种普遍现象，且在深侵润、高转移、低分化肿瘤中较明显。本研究结果显示食管鳞癌和宫颈鳞癌P53蛋白过表达分别为52.38%和35.48%，两病种的高分化组与中低分化组之间，P53基因蛋白过表达差异有显著性(P<0.05)，临床分期之间表达差异无显著性(P>0.05)，这与多数文献报道结果相似[1，2]。资料表明，食管癌等肿瘤P53基因突变率在50%以上而宫颈癌仅为5.5%[4]，本组P53蛋白过表达二病种相关亦较大，推测P53蛋白的积累在宫颈鳞癌中不常见，可能与其中引起P53蛋白降解速度减慢的因素较少见及引起P53蛋白表达增高的“基因毒”如紫外线、离子辐射、化学致癌物质与宫颈癌发生关系不大有关。
, 百拇医药
本研究探讨这两种肿瘤P53蛋白过表达与临床放疗效果的关系，以期观察P53蛋白过表达对预测放射敏感性的价值，结果显示宫颈癌P53蛋白高表达者放疗效果较差(P<0.05)，似与实验结果[4]一致；而食管癌二者差异无显著性(P>0.05)，这与David等[5]对原发和复发喉癌P53基因状态与放疗效果的关系研究结果相似。推测这种情况的原因是P53基因并非单独起作用，也许还有其它基因因素，使其在不同的病变部位对细胞放射敏感性影响程度不同。由于放射敏感性对癌症治疗预后都有重要意义，P53基因在此方面的作用值得进一步深入探讨。
参考文献
1，Milde-langosch K,Alberecht K,Joram S,et al.Presence and persistence of HPV in fection and P53mutation in cancer of the cervix uteric and valva. Int J Cancer,1995;63(5):639
, http://www.100md.com
2，Sarbia M,Porschen R,Borchard F,et al.P53protein expression and prognosis in squamous cell carcinoma of the esophagus.Cancer,1994;74(8):2218
3，Martin HM,Filipe MI,Morris RW,et al.P53expression and prognosis ingasorle carcinoma.Int J Cancer,1992;50(6):859
4，Ga HK,Wang LD,Qi zhou,et al.P53tumor suppressor gene mutation in early esophageal precancerous lesions and carcinoma among high risk populations in Henan.China.Cancer Res,1994;54:4342
, http://www.100md.com
5，Scott WL,Schmitt EM,Smith SW,et al.P53is required for radiation induced apoptosis in mouse thy mocyte.Nature,1993;362(6423):847～849
6，Clarke AR,Purdie CA,Harrison DT,et al.Thymocyte apoptosis induced by P53 dependent and independent pathways.Nature,1993;362(6423):849～852
7，Arvid K,Pieter JS,Marinus AB,et al.Radioresistance and P53 status of T2 laryngeal carcinoma.Cancer,1995;l78(5):991～997
(1999-12-29收稿), 百拇医药