基因打靶技术及其在生物医学中的应用
作者：白雪源 陈香美
单位：100853 北京，解放军总医院肾科 全军肾病研究中心暨重点实验室
关键词：
中华肾脏病杂志000619 一、基因打靶的概念
利用细胞染色体DNA可与外源性DNA同源序列发生同源重组的性质，以定向修饰改造染色体上某一基因的技术叫基因打靶(gene targeting)。它是80年代后半期发展起来的一门按预期方式精细改造生物遗传信息的实验手段。基因打靶最常用的一种策略是通过同源重组使特定靶基因失活，以研究该基因的功能，称基因敲除(gene knock-out)；也可通过同源重组用一种基因替换另一种基因，以便在体内测定它们是否具有相同的功能，或将正常基因引入基因组中置换突变基因以达到靶向基因治疗的目的，该技术叫基因敲入(gene knock-in)，本文中，我们主要介绍基因敲除技术。
根据所用靶细胞的不同，基因打靶分为胚胎干细胞打靶(embryonic stem cell，ES)和体细胞(somatic cell)打靶两类。ES细胞取自小鼠早期胚胎(囊胚期)的内细胞团，它可在体外长期培养并保留发育成各类细胞的全能性，即只分裂但不分化。在体外进行遗传操作后，将它重新植回胚胎，它可发育成胚胎的各种组织，从而形成嵌合体小鼠。如果这些携带突变基因的ES细胞能发育成小鼠的生殖细胞，通过小鼠之间的杂交就能获得基因纯合缺失的小鼠。通过对ES细胞进行基因打靶，使得人们可以方便地将…… 收稿日期：2000-10-12, http://www.100md.com
单位：100853 北京，解放军总医院肾科 全军肾病研究中心暨重点实验室
关键词：
中华肾脏病杂志000619 一、基因打靶的概念
利用细胞染色体DNA可与外源性DNA同源序列发生同源重组的性质，以定向修饰改造染色体上某一基因的技术叫基因打靶(gene targeting)。它是80年代后半期发展起来的一门按预期方式精细改造生物遗传信息的实验手段。基因打靶最常用的一种策略是通过同源重组使特定靶基因失活，以研究该基因的功能，称基因敲除(gene knock-out)；也可通过同源重组用一种基因替换另一种基因，以便在体内测定它们是否具有相同的功能，或将正常基因引入基因组中置换突变基因以达到靶向基因治疗的目的，该技术叫基因敲入(gene knock-in)，本文中，我们主要介绍基因敲除技术。
根据所用靶细胞的不同，基因打靶分为胚胎干细胞打靶(embryonic stem cell，ES)和体细胞(somatic cell)打靶两类。ES细胞取自小鼠早期胚胎(囊胚期)的内细胞团，它可在体外长期培养并保留发育成各类细胞的全能性，即只分裂但不分化。在体外进行遗传操作后，将它重新植回胚胎，它可发育成胚胎的各种组织，从而形成嵌合体小鼠。如果这些携带突变基因的ES细胞能发育成小鼠的生殖细胞，通过小鼠之间的杂交就能获得基因纯合缺失的小鼠。通过对ES细胞进行基因打靶，使得人们可以方便地将…… 收稿日期：2000-10-12, http://www.100md.com