检测血清中冷自身抗体的体会
作者：孙迪 刘祥忠 张易水
单位：佳木斯市红十字中心血站 154002
关键词：冷自身抗体；ABO血型；冷凝集素综合征
黑龙江医药科学000621 1999-01-03在3例贫血待查患者中，发现因冷自身抗体所致的冷凝集素综合征，现报道如下。
1 血型血清学检查
1.1 ABO血型系统鉴定
见表1。
表1 3例患者ABO血型鉴定
正定型
抗A 抗B
, 百拇医药
Ac
反定型
Bc
Oc
自身细胞
患者赵×
0
2+
2+
1+
1+
1+
患者李×
, 百拇医药 2+
0
1+
2+
1+
1+
患者王×
0
2+
2+
1+
1+
1+
*正反定型不符。
, 百拇医药
1.2 将3例患者红细胞经45℃温盐水洗涤后确定赵×为B型，李×为A型，王×为B型。
1.3 患者不规则抗体筛选
将3例患者血清与10例O型献血员及自身RBC进行抗体检测，4℃，室温(22℃)，温盐水(37℃)介质中，菠萝酶试验，间接抗人球蛋白试验均为阳性，而与3份O型脐血红细胞不凝集，考虑为抗I，自身抗体检查及效价测定，见表2。
表2 盐水介质中自身抗体及效价测定
温度(℃)
自身细胞
成人O型红细胞
4
1:256～1:64
, 百拇医药
1:256～1:64
22
1:64～1:32
1:64～1:32
37
1:16～1:8
1:16～1:8
从上述检测结果看，患者血清中含有较强的冷自身抗体，但不排除同种抗体。
1.4 直接抗人球蛋白试验DAT：1+；多价抗人球蛋白：2+；抗IgG阴性；抗C3；2+(以上试剂均由上海市血液中心提供)。
1.5 吸收放散试验
, 百拇医药
将3例患者RBC用37℃温盐水洗3次，进行56℃热放散，至直抗阴性，将上述直抗阴性细胞用酶处理[1]，离心，取压积细胞1份吸收24h，吸收后的血清与37℃温盐水洗过的自身细胞无凝集，则说明该血清吸收完全，将吸收掉的自身抗体血清与10例O型献血员进行筛选，全部阴性，证实3例患者均含有冷自身抗体，无同种抗体。
2 讨论
以上病例为冷集素病(CHD)，又称冷凝集素综合征，是伴有冷抗体的自身免疫性溶血性贫血疾病，可分急性和慢性两种，急性的常属多克隆冷凝集素，常见支原体感染后，及患传染性单核细胞增多症时多见，慢性几乎总是与具有冷凝集活性的IgM副蛋白(单克隆)相关联，当外周循环的温度低于32℃时，IgM抗体及其抗原的反应使补体致敏红细胞，特别是C3和C4成份，当细胞回到较温暖的环境时，IgM冷抗体就从细胞表面放散出来，而将补体致敏在红细胞上，在循环红细胞上出现的成分是C3d，往往有些是C4d，以上病例正与此结论相符合，即抗IgG(-)，C3(+)。自身抗体的存在可以掩盖同种抗体，妨碍同种抗体的检出，使输血前检查和交叉配血试验复杂化，难以找到相配合的细胞，因此首先要排除自身抗体，要以递增温度(由37℃逐升到45℃，不要太高，以防溶血)的生理盐水反复洗涤红细胞[2]。患者血清经自身细胞吸收后，不凝集同型、O型及自身细胞，再检测是否存在同种抗体[3,4]因此在抗体检查和交叉配血中自身对照很重要，它有助于自身抗体或同种抗体或两种抗体伴存的确定[5]，当怀疑两种抗体同时存在时，首先应去除掉自身抗体，再用配组细胞检测是否存在同种抗体，鉴定抗体特异性。同时还应以吸收放散试验来证实同种抗体的存在和抗体特异性的可靠程度，从而使输血前检查准确无呈，保证输血安全。冷抗体的临床意义，完全取决于体温或接近体温时抗体与红细胞结合的能力，而不是低温下冷抗体的效价[6]。
, 百拇医药
参考文献
1，肖星甫,等译.输血技术手册.北京:人民卫生出版社,1985;534
2，白玉萍,张平,严重冷.凝集素引起配血困难1例报告.中国输血杂志1988;1(1);29
3，兰炯采.冷凝集素综合征3例报告.中国输血杂志 1993;6(2):99
4，肖星甫,等译,输血技术手册.北京:人民卫生出版社 1985;313～318
5，严力行,同种抗体伴有自身抗体1例报告.中国输血杂志 1994;1:35
6，陈忠.红细胞自身抗体.中国输血杂志 1990;3(3):147
(2000-06-27收稿), http://www.100md.com
单位：佳木斯市红十字中心血站 154002
关键词：冷自身抗体；ABO血型；冷凝集素综合征
黑龙江医药科学000621 1999-01-03在3例贫血待查患者中，发现因冷自身抗体所致的冷凝集素综合征，现报道如下。
1 血型血清学检查
1.1 ABO血型系统鉴定
见表1。
表1 3例患者ABO血型鉴定
正定型
抗A 抗B
, 百拇医药
Ac
反定型
Bc
Oc
自身细胞
患者赵×
0
2+
2+
1+
1+
1+
患者李×
, 百拇医药 2+
0
1+
2+
1+
1+
患者王×
0
2+
2+
1+
1+
1+
*正反定型不符。
, 百拇医药
1.2 将3例患者红细胞经45℃温盐水洗涤后确定赵×为B型，李×为A型，王×为B型。
1.3 患者不规则抗体筛选
将3例患者血清与10例O型献血员及自身RBC进行抗体检测，4℃，室温(22℃)，温盐水(37℃)介质中，菠萝酶试验，间接抗人球蛋白试验均为阳性，而与3份O型脐血红细胞不凝集，考虑为抗I，自身抗体检查及效价测定，见表2。
表2 盐水介质中自身抗体及效价测定
温度(℃)
自身细胞
成人O型红细胞
4
1:256～1:64
, 百拇医药
1:256～1:64
22
1:64～1:32
1:64～1:32
37
1:16～1:8
1:16～1:8
从上述检测结果看，患者血清中含有较强的冷自身抗体，但不排除同种抗体。
1.4 直接抗人球蛋白试验DAT：1+；多价抗人球蛋白：2+；抗IgG阴性；抗C3；2+(以上试剂均由上海市血液中心提供)。
1.5 吸收放散试验
, 百拇医药
将3例患者RBC用37℃温盐水洗3次，进行56℃热放散，至直抗阴性，将上述直抗阴性细胞用酶处理[1]，离心，取压积细胞1份吸收24h，吸收后的血清与37℃温盐水洗过的自身细胞无凝集，则说明该血清吸收完全，将吸收掉的自身抗体血清与10例O型献血员进行筛选，全部阴性，证实3例患者均含有冷自身抗体，无同种抗体。
2 讨论
以上病例为冷集素病(CHD)，又称冷凝集素综合征，是伴有冷抗体的自身免疫性溶血性贫血疾病，可分急性和慢性两种，急性的常属多克隆冷凝集素，常见支原体感染后，及患传染性单核细胞增多症时多见，慢性几乎总是与具有冷凝集活性的IgM副蛋白(单克隆)相关联，当外周循环的温度低于32℃时，IgM抗体及其抗原的反应使补体致敏红细胞，特别是C3和C4成份，当细胞回到较温暖的环境时，IgM冷抗体就从细胞表面放散出来，而将补体致敏在红细胞上，在循环红细胞上出现的成分是C3d，往往有些是C4d，以上病例正与此结论相符合，即抗IgG(-)，C3(+)。自身抗体的存在可以掩盖同种抗体，妨碍同种抗体的检出，使输血前检查和交叉配血试验复杂化，难以找到相配合的细胞，因此首先要排除自身抗体，要以递增温度(由37℃逐升到45℃，不要太高，以防溶血)的生理盐水反复洗涤红细胞[2]。患者血清经自身细胞吸收后，不凝集同型、O型及自身细胞，再检测是否存在同种抗体[3,4]因此在抗体检查和交叉配血中自身对照很重要，它有助于自身抗体或同种抗体或两种抗体伴存的确定[5]，当怀疑两种抗体同时存在时，首先应去除掉自身抗体，再用配组细胞检测是否存在同种抗体，鉴定抗体特异性。同时还应以吸收放散试验来证实同种抗体的存在和抗体特异性的可靠程度，从而使输血前检查准确无呈，保证输血安全。冷抗体的临床意义，完全取决于体温或接近体温时抗体与红细胞结合的能力，而不是低温下冷抗体的效价[6]。
, 百拇医药
参考文献
1，肖星甫,等译.输血技术手册.北京:人民卫生出版社,1985;534
2，白玉萍,张平,严重冷.凝集素引起配血困难1例报告.中国输血杂志1988;1(1);29
3，兰炯采.冷凝集素综合征3例报告.中国输血杂志 1993;6(2):99
4，肖星甫,等译,输血技术手册.北京:人民卫生出版社 1985;313～318
5，严力行,同种抗体伴有自身抗体1例报告.中国输血杂志 1994;1:35
6，陈忠.红细胞自身抗体.中国输血杂志 1990;3(3):147
(2000-06-27收稿), http://www.100md.com