复方丹参胶囊质量控制标准研究
作者：吕东 刘亚蓉
单位：吕东 刘亚蓉(青海省药品检验所 西宁 810000)
关键词：复方丹参胶囊；TLC；薄层扫描法；丹参酮ⅡA
西北药学杂志000610 摘要 采用TLC法鉴别复方丹参胶囊中高原丹参、三七及冰片；利用薄层扫描法测定高原丹参中丹参酮ⅡA的含量：甲醇提取液点样，石油醚-醋酸乙酯-冰醋酸(8∶2∶0.5)展开两次，480nm扫描法测定。5批样品每粒胶囊均含丹参酮ⅡA 0.459～0.557mg。
中图分类号：R926 文献标识码：A
复方丹参胶囊由高原丹参[1]、三七、冰片等加工制成，具有活血化瘀、理气止痛功效。主药为生长于青藏高原的唇形科植物高原丹参Salvia przewalskii Maxim.的干燥根。本文采用薄层色谱法鉴别制剂中的三味中药，薄层扫描法测定了丹参酮ⅡA的含量。
, 百拇医药
1 仪器与试药
1.1 仪器 CS-920型高速薄层扫描仪(日本岛津)。
1.2 试药 丹参酮ⅡA，三七皂苷R1，人参皂苷Rb1，Rg1，冰片对照品(中国药品生物制品检定所)；复方丹参胶囊(青海省人民医院)。
2 方法与结果
2.1 高原丹参与冰片薄层色谱鉴别[2]
2.1.1 试液的制备 取样品内容物2g，加乙醚20ml，超声处理15min，滤过；滤液挥干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液。取丹参酮ⅡA、冰片对照品，分别加醋酸乙酯制成1mg/ml的溶液，作为对照品溶液。同法分别制得缺高原丹参、冰片的样品溶液，作为阴性对照溶液。
, 百拇医药
2.1.2 薄层色谱鉴别 硅胶G薄层板；展开剂为苯-醋酸乙酯(19∶1)；点样5μl。展开后，于日光下检视，结果(见图1)供试品色谱中在与丹参酮ⅡA色谱相应的位置上，显一红色斑点，Rf＝0.72。再喷以1%香草醛硫酸溶液，于105℃加热数分钟，结果(见图2)供试品色谱在与冰片对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点。阴性对照溶液则无相应斑点。
2.2 三七薄层色谱鉴别
2.2.1 试液的制备 取2.1.1项下乙醚提取后的残留物，加甲醇15ml，加热回流提取10min，放冷，滤过；滤液浓缩至约2ml，作为供试品溶液。取三七皂苷R1、人参皂苷Rb1、Rg1对照品，加甲醇制成1mg/ml混合溶液，作为对照品溶液。按处方比例及供试品溶液制备方法，制成缺三七的阴性对照溶液。
2.2.2 薄层色谱鉴别 用0.5% CMC硅胶G薄层板；展开剂为氯仿-正丁醇-甲醇-水(20∶40∶10∶
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图1 高原丹参TLC图谱
1-供试品 2-丹参酮ⅡA 3-阴性样品
图2 冰片TLC图谱
1-供试品 2-冰片 3-阴性品
20)的下层液；点样量各5μl；显色剂为10%硫酸乙醇溶液。结果(见图3)，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显3个蓝紫色斑点，Rf值分别为0.11，0.49，0.59。阴性样品色谱在相应位置无斑点。
图3 三七TLC图谱
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1-供试品 2a-人参皂苷Rb1 2b-三七皂苷R1
2c-人参皂苷Rg1 3-阴性样品
2.3 丹参酮ⅡA薄层扫描测定
2.3.1 试液的制备 取样品内容物研细，精密称取约1.5g，置锥形瓶中，精密加入甲醇10ml，称定重量；加热回流30min，放冷；补足减失的甲醇重量，摇匀，滤过；弃去初滤液，取续滤液作为供试品溶液。精密称取丹参酮ⅡA对照品适量，加甲醇制成0.45mg/ml作为对照品溶液。
2.3.2 薄层色谱扫描条件 硅胶G薄层板，展开剂为石油醚(60℃～90℃)-醋酸乙酯-冰醋酸(8∶2∶0.5)，上行展开两次，每次8cm；λS＝480nm，SX＝3，狭缝1.2×1.2mm。
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2.3.3 线性关系考察 精密吸取对照品溶液1，2，3，4，5μl，点于同一硅胶G板上，依法展开两次；取出，挥干溶剂，扫描测定。以吸收度积分值对点样量回归得方程：Y＝564.82X-57.3，r＝0.9991，表明丹参酮ⅡA在0.45～2.26μg呈良好的线性关系。该曲线不通过原点，采用外标两点法定量。在同一硅胶G板上点5个2μl的对照品溶液，依法展开并扫描测定，结果RSD＝1.21%。每隔30min测定一次，6h内结果稳定，RSD＝1.49%。
2.3.4 样品含量测定 精密吸取对照品溶液2，4μl，供试品溶液5μl，分别交叉点于同一硅胶G板上，依法展开，扫描测定。结果5批样品每粒胶囊分别含丹参酮ⅡA 0.557，0.570，0.459，0.496，0.518mg。
2.3.5 回收率试验 取已知含量的复方丹参胶囊内容物0.5g，精密称定，精密加入一定量的对照品溶液，按2.3.1项下操作，结果见表1。
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3 讨论
①本实验对丹参酮ⅡA测定时展开两次，每次展距8cm，可有效改善斑点扩散状况，样品分离效果较好，背景无污染，可用单波长薄层扫描法测定。
表1 加样回收试验结果 样品量
(mg)
加入量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均回收率
, 百拇医药
(%)
0.864
1.012
1.921
104.4
0.862
1.012
1.877
100.3
0.907
1.012
1.920
100.1
, http://www.100md.com
101.9%
0.841
1.012
1.877
102.4
(RSD＝1.73%)
0.792
1.012
1.826
102.2
②该制剂中三味中药均可鉴别，结果明显，阴性试验无干扰，可作为复方丹参胶囊质量检验方法。
参考文献
[1]郭本兆.青海经济植物志.西宁：青海人民出版社，1987：497～499
[2]王宝琴.中成药质量标准与标准物质研究.北京：中国医药科技出版社，1994：242～246
(收稿日期：2000-05-11), http://www.100md.com
单位：吕东 刘亚蓉(青海省药品检验所 西宁 810000)
关键词：复方丹参胶囊；TLC；薄层扫描法；丹参酮ⅡA
西北药学杂志000610 摘要 采用TLC法鉴别复方丹参胶囊中高原丹参、三七及冰片；利用薄层扫描法测定高原丹参中丹参酮ⅡA的含量：甲醇提取液点样，石油醚-醋酸乙酯-冰醋酸(8∶2∶0.5)展开两次，480nm扫描法测定。5批样品每粒胶囊均含丹参酮ⅡA 0.459～0.557mg。
中图分类号：R926 文献标识码：A
复方丹参胶囊由高原丹参[1]、三七、冰片等加工制成，具有活血化瘀、理气止痛功效。主药为生长于青藏高原的唇形科植物高原丹参Salvia przewalskii Maxim.的干燥根。本文采用薄层色谱法鉴别制剂中的三味中药，薄层扫描法测定了丹参酮ⅡA的含量。
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1 仪器与试药
1.1 仪器 CS-920型高速薄层扫描仪(日本岛津)。
1.2 试药 丹参酮ⅡA，三七皂苷R1，人参皂苷Rb1，Rg1，冰片对照品(中国药品生物制品检定所)；复方丹参胶囊(青海省人民医院)。
2 方法与结果
2.1 高原丹参与冰片薄层色谱鉴别[2]
2.1.1 试液的制备 取样品内容物2g，加乙醚20ml，超声处理15min，滤过；滤液挥干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液。取丹参酮ⅡA、冰片对照品，分别加醋酸乙酯制成1mg/ml的溶液，作为对照品溶液。同法分别制得缺高原丹参、冰片的样品溶液，作为阴性对照溶液。
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2.1.2 薄层色谱鉴别 硅胶G薄层板；展开剂为苯-醋酸乙酯(19∶1)；点样5μl。展开后，于日光下检视，结果(见图1)供试品色谱中在与丹参酮ⅡA色谱相应的位置上，显一红色斑点，Rf＝0.72。再喷以1%香草醛硫酸溶液，于105℃加热数分钟，结果(见图2)供试品色谱在与冰片对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点。阴性对照溶液则无相应斑点。
2.2 三七薄层色谱鉴别
2.2.1 试液的制备 取2.1.1项下乙醚提取后的残留物，加甲醇15ml，加热回流提取10min，放冷，滤过；滤液浓缩至约2ml，作为供试品溶液。取三七皂苷R1、人参皂苷Rb1、Rg1对照品，加甲醇制成1mg/ml混合溶液，作为对照品溶液。按处方比例及供试品溶液制备方法，制成缺三七的阴性对照溶液。
2.2.2 薄层色谱鉴别 用0.5% CMC硅胶G薄层板；展开剂为氯仿-正丁醇-甲醇-水(20∶40∶10∶
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图1 高原丹参TLC图谱
1-供试品 2-丹参酮ⅡA 3-阴性样品
图2 冰片TLC图谱
1-供试品 2-冰片 3-阴性品
20)的下层液；点样量各5μl；显色剂为10%硫酸乙醇溶液。结果(见图3)，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显3个蓝紫色斑点，Rf值分别为0.11，0.49，0.59。阴性样品色谱在相应位置无斑点。
图3 三七TLC图谱
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1-供试品 2a-人参皂苷Rb1 2b-三七皂苷R1
2c-人参皂苷Rg1 3-阴性样品
2.3 丹参酮ⅡA薄层扫描测定
2.3.1 试液的制备 取样品内容物研细，精密称取约1.5g，置锥形瓶中，精密加入甲醇10ml，称定重量；加热回流30min，放冷；补足减失的甲醇重量，摇匀，滤过；弃去初滤液，取续滤液作为供试品溶液。精密称取丹参酮ⅡA对照品适量，加甲醇制成0.45mg/ml作为对照品溶液。
2.3.2 薄层色谱扫描条件 硅胶G薄层板，展开剂为石油醚(60℃～90℃)-醋酸乙酯-冰醋酸(8∶2∶0.5)，上行展开两次，每次8cm；λS＝480nm，SX＝3，狭缝1.2×1.2mm。
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2.3.3 线性关系考察 精密吸取对照品溶液1，2，3，4，5μl，点于同一硅胶G板上，依法展开两次；取出，挥干溶剂，扫描测定。以吸收度积分值对点样量回归得方程：Y＝564.82X-57.3，r＝0.9991，表明丹参酮ⅡA在0.45～2.26μg呈良好的线性关系。该曲线不通过原点，采用外标两点法定量。在同一硅胶G板上点5个2μl的对照品溶液，依法展开并扫描测定，结果RSD＝1.21%。每隔30min测定一次，6h内结果稳定，RSD＝1.49%。
2.3.4 样品含量测定 精密吸取对照品溶液2，4μl，供试品溶液5μl，分别交叉点于同一硅胶G板上，依法展开，扫描测定。结果5批样品每粒胶囊分别含丹参酮ⅡA 0.557，0.570，0.459，0.496，0.518mg。
2.3.5 回收率试验 取已知含量的复方丹参胶囊内容物0.5g，精密称定，精密加入一定量的对照品溶液，按2.3.1项下操作，结果见表1。
, 百拇医药
3 讨论
①本实验对丹参酮ⅡA测定时展开两次，每次展距8cm，可有效改善斑点扩散状况，样品分离效果较好，背景无污染，可用单波长薄层扫描法测定。
表1 加样回收试验结果 样品量
(mg)
加入量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均回收率
, 百拇医药
(%)
0.864
1.012
1.921
104.4
0.862
1.012
1.877
100.3
0.907
1.012
1.920
100.1
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101.9%
0.841
1.012
1.877
102.4
(RSD＝1.73%)
0.792
1.012
1.826
102.2
②该制剂中三味中药均可鉴别，结果明显，阴性试验无干扰，可作为复方丹参胶囊质量检验方法。
参考文献
[1]郭本兆.青海经济植物志.西宁：青海人民出版社，1987：497～499
[2]王宝琴.中成药质量标准与标准物质研究.北京：中国医药科技出版社，1994：242～246
(收稿日期：2000-05-11), http://www.100md.com