复方丹参胶囊质量控制标准研究

http://www.100md.com 《西北药学杂志》 2000年第6期

     作者：吕东 刘亚蓉

    单位：吕东 刘亚蓉(青海省药品检验所 西宁 810000)

    关键词：复方丹参胶囊；TLC；薄层扫描法；丹参酮ⅡA

    西北药学杂志000610 摘要 采用TLC法鉴别复方丹参胶囊中高原丹参、三七及冰片；利用薄层扫描法测定高原丹参中丹参酮Ⅱ_A的含量：甲醇提取液点样，石油醚-醋酸乙酯-冰醋酸(8∶2∶0.5)展开两次，480nm扫描法测定。5批样品每粒胶囊均含丹参酮Ⅱ_A 0.459～0.557mg。

    中图分类号：R926 文献标识码：A

    复方丹参胶囊由高原丹参^[1]、三七、冰片等加工制成，具有活血化瘀、理气止痛功效。主药为生长于青藏高原的唇形科植物高原丹参Salvia przewalskii Maxim.的干燥根。本文采用薄层色谱法鉴别制剂中的三味中药，薄层扫描法测定了丹参酮Ⅱ_A的含量。

    1 仪器与试药

    1.1 仪器 CS-920型高速薄层扫描仪(日本岛津)。

    1.2 试药 丹参酮Ⅱ_A，三七皂苷R₁，人参皂苷Rb₁，Rg₁，冰片对照品(中国药品生物制品检定所)；复方丹参胶囊(青海省人民医院)。

    2 方法与结果

    2.1 高原丹参与冰片薄层色谱鉴别^[2]

    2.1.1 试液的制备 取样品内容物2g，加乙醚20ml，超声处理15min，滤过；滤液挥干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液。取丹参酮Ⅱ_A、冰片对照品，分别加醋酸乙酯制成1mg/ml的溶液，作为对照品溶液。同法分别制得缺高原丹参、冰片的样品溶液，作为阴性对照溶液。

    2.1.2 薄层色谱鉴别 硅胶G薄层板；展开剂为苯-醋酸乙酯(19∶1)；点样5μl。展开后，于日光下检视，结果(见图1)供试品色谱中在与丹参酮Ⅱ_A色谱相应的位置上，显一红色斑点，R_f＝0.72。再喷以1%香草醛硫酸溶液，于105℃加热数分钟，结果(见图2)供试品色谱在与冰片对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点。阴性对照溶液则无相应斑点。

    2.2 三七薄层色谱鉴别

    2.2.1 试液的制备 取2.1.1项下乙醚提取后的残留物，加甲醇15ml，加热回流提取10min，放冷，滤过；滤液浓缩至约2ml，作为供试品溶液。取三七皂苷R₁、人参皂苷Rb₁、Rg₁对照品，加甲醇制成1mg/ml混合溶液，作为对照品溶液。按处方比例及供试品溶液制备方法，制成缺三七的阴性对照溶液。

    2.2.2 薄层色谱鉴别 用0.5% CMC硅胶G薄层板；展开剂为氯仿-正丁醇-甲醇-水(20∶40∶10∶

    图1 高原丹参TLC图谱

    1-供试品 2-丹参酮Ⅱ_A 3-阴性样品

    图2 冰片TLC图谱

    1-供试品 2-冰片 3-阴性品

    20)的下层液；点样量各5μl；显色剂为10%硫酸乙醇溶液。结果(见图3)，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显3个蓝紫色斑点，R_f值分别为0.11，0.49，0.59。阴性样品色谱在相应位置无斑点。

    图3 三七TLC图谱

    1-供试品 2a-人参皂苷Rb₁ 2b-三七皂苷R₁

    2c-人参皂苷Rg₁ 3-阴性样品

    2.3 丹参酮Ⅱ_A薄层扫描测定

    2.3.1 试液的制备 取样品内容物研细，精密称取约1.5g，置锥形瓶中，精密加入甲醇10ml，称定重量；加热回流30min，放冷；补足减失的甲醇重量，摇匀，滤过；弃去初滤液，取续滤液作为供试品溶液。精密称取丹参酮Ⅱ_A对照品适量，加甲醇制成0.45mg/ml作为对照品溶液。

    2.3.2 薄层色谱扫描条件 硅胶G薄层板，展开剂为石油醚(60℃～90℃)-醋酸乙酯-冰醋酸(8∶2∶0.5)，上行展开两次，每次8cm；λ_S＝480nm，S_X＝3，狭缝1.2×1.2mm。

    2.3.3 线性关系考察 精密吸取对照品溶液1，2，3，4，5μl，点于同一硅胶G板上，依法展开两次；取出，挥干溶剂，扫描测定。以吸收度积分值对点样量回归得方程：Y＝564.82X-57.3，r＝0.9991，表明丹参酮Ⅱ_A在0.45～2.26μg呈良好的线性关系。该曲线不通过原点，采用外标两点法定量。在同一硅胶G板上点5个2μl的对照品溶液，依法展开并扫描测定，结果RSD＝1.21%。每隔30min测定一次，6h内结果稳定，RSD＝1.49%。

    2.3.4 样品含量测定 精密吸取对照品溶液2，4μl，供试品溶液5μl，分别交叉点于同一硅胶G板上，依法展开，扫描测定。结果5批样品每粒胶囊分别含丹参酮Ⅱ_A 0.557，0.570，0.459，0.496，0.518mg。

    2.3.5 回收率试验 取已知含量的复方丹参胶囊内容物0.5g，精密称定，精密加入一定量的对照品溶液，按2.3.1项下操作，结果见表1。

    3 讨论

    ①本实验对丹参酮Ⅱ_A测定时展开两次，每次展距8cm，可有效改善斑点扩散状况，样品分离效果较好，背景无污染，可用单波长薄层扫描法测定。

    表1 加样回收试验结果 样品量

    (mg)

    加入量

    (mg)

    测得量

    (mg)

    回收率

    (%)

    平均回收率

    (%)

    0.864

    1.012

    1.921

    104.4

    0.862

    1.012

    1.877

    100.3

    0.907

    1.012

    1.920

    100.1

    101.9%

    0.841

    1.012

    1.877

    102.4

    (RSD＝1.73%)

    0.792

    1.012

    1.826

    102.2

    ②该制剂中三味中药均可鉴别，结果明显，阴性试验无干扰，可作为复方丹参胶囊质量检验方法。

    参考文献

    [1]郭本兆.青海经济植物志.西宁：青海人民出版社，1987：497～499

    [2]王宝琴.中成药质量标准与标准物质研究.北京：中国医药科技出版社，1994：242～246

    (收稿日期：2000-05-11)

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