HPLC法测定克拉霉素及其片剂含量

http://www.100md.com 《西北药学杂志》 2000年第6期

     作者：王金芳 周红 齐萍萍

    单位：王金芳 周红 齐萍萍(西安制药厂 西安 710077)

    关键词：HPLC；克拉霉素；片剂

    西北药学杂志000601 摘要 建立了高效液相色谱法测定克拉霉素及其片剂含量的方法。色谱条件：C₁₈柱，流动相为67mmol/L磷酸二氢钾∶乙腈(55∶45)，检测波长选择210nm，外标法定量。结果：线性范围为100～900μg/ml，日内RSD为0.15%。片剂平均回收率为100.6%(RSD为0.13%)。

    中图分类号：R917.2 文献标识码：A

    Assay of clarithromycin and clarithromycin tablets by HPLC

    Wang Jinfan,Zhou Hong and Qi Pingping

    (Xi'an Pharmaceutical Factory,Xi'an 710077)

    ABSTRACT The contents of clarithromycin and clarithromycin tablets were determined by HPLC.The HPLC condition was C₁₈ column,the mixture of 67mmol/L potassium dihydrogen phosphate solution and acetone(55∶45) as mobile phase.The flow rate set 1ml/min,the detection wavelength was at 210nm.The results showed that the linear range of clarithromycin content was 100～900μg/ml,the average recovery of clarithromycin tablets was 100.6%.

    KEY WORDS HPLC;clarithromycin;clarithromycin tablets

    克拉霉素是大环内酯类抗生素，稳定性好，抑菌作用强，对各种呼吸道致病菌所引起的感染有显著疗效，治疗幽门螺杆菌引起的慢性胃炎、胃及十二指肠溃疡有独特疗效。USPⅩⅩⅠⅠⅠ采用HPLC法测定其含量。卫生部试行标准^[1]为生物效价方法。本文参照克拉霉素有关物质测定法建立了HPLC法测定含量。

    1 仪器与试药

    1.1 仪器 Waters 515泵，PCM 2487紫外检测器，Millennium³²色谱工作站(美国)。

    1.2 试药 克拉霉素原料粉(西安制药厂)；克拉霉素片(西安制药厂、江苏恒瑞医药股份有限公司)；克拉霉素标准品(中国药品生物制品检定所)；乙腈为色谱纯。

    2 克拉霉素含量测定

    2.1 色谱条件 Lichrosorb C₁₈柱(200mm×4.6mm，5μm)，流动相为67mmol/L磷酸二氢钾∶乙腈(55∶45)，检测波长为210nm，流速1.0ml/min。

    2.2 测定方法 称取克拉霉素及其标准品25mg，分别置50ml量瓶中，加稀释液[67mmol/L磷酸二氢钾∶甲醇(3∶1)]超声溶解并稀释至刻度，摇匀。分别吸取上述溶液20μl进样，用外标法计算。

    2.3 线性试验 配制100，200，300，400，500，600，700，800，900μg/ml克拉霉素标准液，在上述色谱条件下进样3次，以平均峰面积(A)对浓度(C)作图，得回归方程为：C×10³＝1.57A+2986，r＝0.9999。结果表明：克拉霉素在100～900μg/ml范围内，线性良好。日内进样8次，峰面积RSD＝0.15%。

    2.4 重复性试验 取同一批克拉霉素原料，分别称定5份样品，按上述方法测定，结果RSD为0.16%。

    2.5 与生物效价法对照 取克拉霉素原料，分别用生物效价法和HPLC法测定含量。结果两法基本一致(见表1)。

    表1 HPLC法与生物效价法测定克拉霉素原料含量结果 批 号

    HPLC(u/mg)

    生物效价(u/mg)

    差数

    990606

    952

    961

    -9

    990701

    965

    950

    +15

    990702

    946

    958

    -12

    990704

    970

    961

    +9

    990705

    953

    960

    -7

    990706

    964

    953

    +11

    3 克拉霉素片含量测定

    3.1 方法 取克拉霉素片10片，研细，精密称取适量(约相当于克拉霉素125mg)，置250ml量瓶中，加入稀释液[67mmol/L磷酸二氢钾∶甲醇(3∶1)]适量，超声处理30min，放冷至室温，加稀释液至刻度，摇匀，过滤，续滤液作为供试品溶液。同法配制500 μg/ml克拉霉素标准品溶液作为对照品溶液。在前述色谱条件下，吸取两种试液20μl，进样分析，外标法计算含量(详见表2)。依法进行回收率试验，结果平均回收率为100.6%(RSD＝0.13%)。

    表2 HPLC法与生物效价法测定克拉霉素片含量对照(%) 厂 名

    批 号

    HPLC

    生物效价

    差 数

    西安制药厂

    9707173

    94.9

    95.8

    -0.9

    9708198

    93.0

    94.4

    -1.4

    9709229

    96.9

    98.8

    -1.9

    9802052

    95.1

    98.2

    -3.1

    9803084

    95.7

    96.2

    -0.5

    9804117

    93.2

    93.5

    -0.3

    9904163

    96.0

    94.4

    +1.6

    9905167-1

    96.9

    96.7

    +0.2

    9905167-2

    96.6

    96.5

    +0.1

    9905167-3

    96.9

    96.8

    +0.1

    江苏恒瑞

    9904194

    96.4

    96.7

    -0.3

    3.2 空白试验 依据克拉霉素片处方配比，制备不含克拉霉素的空白片。照3.1方法处理，进样，记录色谱图。结果表明辅料不干扰克拉霉素的测定。

    4 小结

    本文建立的HPLC法测定克拉霉素及其片剂含量与生物效价测定法基本一致，并且具有较好的精密度和良好的重现性。

    参考文献

    [1]卫生部标准WS-279(X-241)-96(试行)

    [2]卫生部标准WS-280(X-242)-96(试行)

    [3]USP ⅩⅩⅠⅠⅠ.1995：383

    (收稿日期：2000-05-08)

    百拇医药网 http://www.100md.com/html/analecta/2000/06/01/34/817.htm