膀胱癌P21、P185、P53蛋白表达及其临床意义
作者：周占松 金锡御 熊恩庆 宋波
单位：第三军医大学附属西南医院泌尿外科 400038
关键词：
重庆医学000612
应用免疫组织化学方法检测膀胱移行细胞癌ras,c-erb-2及P53蛋白表达，旨 在探讨癌基因及抑癌基因的改变与膀胱移行细胞癌生物学行为的关系，为临床诊断及判断预 后提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料：选取有完整随访资料的膀胱移行细胞癌手术标本82例，另取10 例非癌膀胱粘膜作对照。标本经10%福尔马林固定、石蜡包埋。rasP21、P53鼠抗人抗体购自 中山生物技术公司。P185鼠抗人抗体为美国oncogene Science公司产品。ABC试剂盒为美国v ector Lab公司产品。
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1.2 方法
1.2.1 免疫组化染色：石蜡包埋组织连续厚4μm切片。其中1张行HE染色 ，其组织病理分级按WHO标准，临床分期采用UICC标准。免疫组织染色采用ABC法，一抗P21 、P53、P185(1：50)。以PBS代替第一或第二抗体作为阴性对照。以已知阳性切片作阳性对 照。按染色范围及强度判断染色结果。
1.2.2 统计学分析：所有资料进行X2检验。
2 结果
2.1 临床资料：膀胱移行细胞癌82例，作基因产物(P21、P53、P183)检测 ，男性70例，女性12例。年龄26～82岁，平均56.34岁。肿瘤大小：最大直径8.5cm，最小 者0.4cm。组织学分级：Ⅰ级18例，Ⅱ级38例，Ⅲ级26例。临床分期：Tis-T1期22例；T2期 36例；T3-4期24例。82例随访结果，复发30例，死亡17例，其中4例复发后死亡。
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2.2 免疫组化结果分析(附表)：10例正常膀胱粘膜中，2例P185蛋白呈弱 阳性，P21、P53蛋白均阴性。82例膀胱移行细胞癌中P21蛋白阳性率62.2%(51例)，P53蛋白 阳性率31.7%(26例)，P185蛋白阳性率58.5%(48例)。P21蛋白、P53蛋白与预后关系：本组 82例膀胱移行细胞癌，复发30例，复发时间≤3年20例，>3～<5年3例，≥5年7例。仅P53阳 性者复发率33.6%，显著高于阴性者复发率(17.1%，P≤0.05)。各种蛋白表达与复发 时间无关。死亡17例，其中生存时间≤3年10例，>3～<5年4例，≥5年3例。P21阳性者死亡 率33.4%，高于阴性者死亡率(6.2%，P<0.01)。P53阳性者死亡率34.6%，高于阴性 者死亡率(12.4%，P<0.01)。与生存时间长短无明显关系。三种蛋白检测结果显示， 两种以上基因产物表达者计32例(39%)，P21、P53蛋白共同表达阳性率10.7%，P185，P53蛋 白共同表达阳性率5.1%，P21，P185，P53蛋白共同表达阳性率24.6%。两种以上蛋白共同 表达者复发率为29.6%，显著高于非共同表达者复发率(11.7%，P<0.05)，而死亡率 比较无显著差异(P>0.05)。
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3 讨论
本组对膀胱移行细胞癌P21蛋白检测结果表明：阳性率分别为Ⅰ级31%、Ⅱ级59%、Ⅲ级74%， 各级间相关显著(P<0.05)；Tis-T1期29.7%、T2期61.2%、T3-4期74%，各期间相关显 著(P<0.05)。本文结果与文献报道基本相符[1，2]，但亦有相反结论的报道 [3]。P21蛋白阳性表达者预后差，死亡率高，反之则预后好，死亡率低。因此我们 认为P21蛋白表达可作为膀胱癌恶性程度高和预后不良的重要指标之一。
本实验对膀胱移行细胞癌P185蛋白检测结果表明：Ⅰ级69.6%、Ⅱ级56.4%、Ⅲ级41%；Tis -T1期68.1%、T2期57.9%、T3-4期41%。统计学分析表明：各级及各期间相差显著(P<0 .05)。与文献报道基本一致[4]。但国外有相反结果报导[5]。提示P185 蛋白表达可能是膀胱移行细胞癌的早期表现。统计学分析表明：P185蛋白与预后无显著关系 (P>0.05)。
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附表 82例膀胱移行细胞癌P21、P185、P53蛋白表达结果 组织学分类
例数
P21
P185
P53
+
+
+
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正常粘膜
10
0
0
0
2
0
0
0
0
0
膀胱移行细胞癌
82
13
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15
23
20
12
16
13
7
6
Soini等[6]检测膀胱移行细胞癌中P53蛋白阳性表达随病理分级及临床分期增高而 增高。我们的结果与其相一致，其中Ⅰ级阳性率13.8%，Ⅲ级阳性率41.2%，Tis-T1期阳性 率12.5%，T3-4期41.2%。在分化差的膀胱癌中表达最强。P53蛋白阳性表达者局部淋巴结 转移率高，死亡率高，预后差；阴性者则预后好。因此我们认为P53蛋白表达可作为判断膀 胱癌恶性程度及预后的指标。
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资料表明：膀胱移行细胞癌的发生、发展表现为多基因协同作用。叶定伟等[7]报 道了膀胱移行细胞癌中ras和c-erb-2癌基因产物的表达。Lipponen[8]报道了c-erb -2癌基因产物表达同时伴有P53蛋白表达。本研究检测三种基因蛋白的结果，说明多个基因 协同激活在膀胱移行细胞癌发生、发展中起一定作用。
参考文献
1，Viola MV,Fromo Witz F,Oravez S,et al.Ras oncogene P21 expressi on is increased in premalignant lesions and high grade bladder carcinoma.J Exp M ed,1985,161:1213
2，何兆伟，陆灿辉，申鹏飞，等.ras-P21和P53在膀胱癌表达的临床意义 .中华泌尿外科杂志，1996，1：20
, http://www.100md.com
3缪延杰，王泽.癌基因ras产物P21表达与膀胱癌生物学行为之间的关系 .临床泌尿外科杂志，1990，5：156
4，邹文，吴明明，虞颂庭，等.膀胱癌原癌基因c-erb-2蛋白产物表达. 中华泌尿外科杂志，1995.16：84
5，Sato K,Mriyama M,Moris,et al.An immunohistoloical evaluation o f c-erb-2 gene product in patient with urinary bladder carcinoma.Cancer,1992,70: 2493
6，Soini Y,Turpeenniemi-Hujanen T,Kamel D,et al.P53 Immunohistoch emistry in transitional cell carcinoma and dysplasia of the urinary bladder corr elates with disease progression.Br J Cancer,1993,68:1029
7，叶定伟，郑家富，钱松溪，等.P53基因突变与泌尿系肿瘤关系的初步 研究.中华医学杂志，1994，74：656
8，Lipponen PK.Interrelationship between expression of P53 prolif eration cell nuclear antigen and c-erb-2 in bladder cancer.Pathology,1993,61:178, http://www.100md.com
单位：第三军医大学附属西南医院泌尿外科 400038
关键词：
重庆医学000612
应用免疫组织化学方法检测膀胱移行细胞癌ras,c-erb-2及P53蛋白表达，旨 在探讨癌基因及抑癌基因的改变与膀胱移行细胞癌生物学行为的关系，为临床诊断及判断预 后提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料：选取有完整随访资料的膀胱移行细胞癌手术标本82例，另取10 例非癌膀胱粘膜作对照。标本经10%福尔马林固定、石蜡包埋。rasP21、P53鼠抗人抗体购自 中山生物技术公司。P185鼠抗人抗体为美国oncogene Science公司产品。ABC试剂盒为美国v ector Lab公司产品。
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1.2 方法
1.2.1 免疫组化染色：石蜡包埋组织连续厚4μm切片。其中1张行HE染色 ，其组织病理分级按WHO标准，临床分期采用UICC标准。免疫组织染色采用ABC法，一抗P21 、P53、P185(1：50)。以PBS代替第一或第二抗体作为阴性对照。以已知阳性切片作阳性对 照。按染色范围及强度判断染色结果。
1.2.2 统计学分析：所有资料进行X2检验。
2 结果
2.1 临床资料：膀胱移行细胞癌82例，作基因产物(P21、P53、P183)检测 ，男性70例，女性12例。年龄26～82岁，平均56.34岁。肿瘤大小：最大直径8.5cm，最小 者0.4cm。组织学分级：Ⅰ级18例，Ⅱ级38例，Ⅲ级26例。临床分期：Tis-T1期22例；T2期 36例；T3-4期24例。82例随访结果，复发30例，死亡17例，其中4例复发后死亡。
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2.2 免疫组化结果分析(附表)：10例正常膀胱粘膜中，2例P185蛋白呈弱 阳性，P21、P53蛋白均阴性。82例膀胱移行细胞癌中P21蛋白阳性率62.2%(51例)，P53蛋白 阳性率31.7%(26例)，P185蛋白阳性率58.5%(48例)。P21蛋白、P53蛋白与预后关系：本组 82例膀胱移行细胞癌，复发30例，复发时间≤3年20例，>3～<5年3例，≥5年7例。仅P53阳 性者复发率33.6%，显著高于阴性者复发率(17.1%，P≤0.05)。各种蛋白表达与复发 时间无关。死亡17例，其中生存时间≤3年10例，>3～<5年4例，≥5年3例。P21阳性者死亡 率33.4%，高于阴性者死亡率(6.2%，P<0.01)。P53阳性者死亡率34.6%，高于阴性 者死亡率(12.4%，P<0.01)。与生存时间长短无明显关系。三种蛋白检测结果显示， 两种以上基因产物表达者计32例(39%)，P21、P53蛋白共同表达阳性率10.7%，P185，P53蛋 白共同表达阳性率5.1%，P21，P185，P53蛋白共同表达阳性率24.6%。两种以上蛋白共同 表达者复发率为29.6%，显著高于非共同表达者复发率(11.7%，P<0.05)，而死亡率 比较无显著差异(P>0.05)。
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3 讨论
本组对膀胱移行细胞癌P21蛋白检测结果表明：阳性率分别为Ⅰ级31%、Ⅱ级59%、Ⅲ级74%， 各级间相关显著(P<0.05)；Tis-T1期29.7%、T2期61.2%、T3-4期74%，各期间相关显 著(P<0.05)。本文结果与文献报道基本相符[1，2]，但亦有相反结论的报道 [3]。P21蛋白阳性表达者预后差，死亡率高，反之则预后好，死亡率低。因此我们 认为P21蛋白表达可作为膀胱癌恶性程度高和预后不良的重要指标之一。
本实验对膀胱移行细胞癌P185蛋白检测结果表明：Ⅰ级69.6%、Ⅱ级56.4%、Ⅲ级41%；Tis -T1期68.1%、T2期57.9%、T3-4期41%。统计学分析表明：各级及各期间相差显著(P<0 .05)。与文献报道基本一致[4]。但国外有相反结果报导[5]。提示P185 蛋白表达可能是膀胱移行细胞癌的早期表现。统计学分析表明：P185蛋白与预后无显著关系 (P>0.05)。
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附表 82例膀胱移行细胞癌P21、P185、P53蛋白表达结果 组织学分类
例数
P21
P185
P53
+
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正常粘膜
10
0
0
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2
0
0
0
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膀胱移行细胞癌
82
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Soini等[6]检测膀胱移行细胞癌中P53蛋白阳性表达随病理分级及临床分期增高而 增高。我们的结果与其相一致，其中Ⅰ级阳性率13.8%，Ⅲ级阳性率41.2%，Tis-T1期阳性 率12.5%，T3-4期41.2%。在分化差的膀胱癌中表达最强。P53蛋白阳性表达者局部淋巴结 转移率高，死亡率高，预后差；阴性者则预后好。因此我们认为P53蛋白表达可作为判断膀 胱癌恶性程度及预后的指标。
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资料表明：膀胱移行细胞癌的发生、发展表现为多基因协同作用。叶定伟等[7]报 道了膀胱移行细胞癌中ras和c-erb-2癌基因产物的表达。Lipponen[8]报道了c-erb -2癌基因产物表达同时伴有P53蛋白表达。本研究检测三种基因蛋白的结果，说明多个基因 协同激活在膀胱移行细胞癌发生、发展中起一定作用。
参考文献
1，Viola MV,Fromo Witz F,Oravez S,et al.Ras oncogene P21 expressi on is increased in premalignant lesions and high grade bladder carcinoma.J Exp M ed,1985,161:1213
2，何兆伟，陆灿辉，申鹏飞，等.ras-P21和P53在膀胱癌表达的临床意义 .中华泌尿外科杂志，1996，1：20
, http://www.100md.com
3缪延杰，王泽.癌基因ras产物P21表达与膀胱癌生物学行为之间的关系 .临床泌尿外科杂志，1990，5：156
4，邹文，吴明明，虞颂庭，等.膀胱癌原癌基因c-erb-2蛋白产物表达. 中华泌尿外科杂志，1995.16：84
5，Sato K,Mriyama M,Moris,et al.An immunohistoloical evaluation o f c-erb-2 gene product in patient with urinary bladder carcinoma.Cancer,1992,70: 2493
6，Soini Y,Turpeenniemi-Hujanen T,Kamel D,et al.P53 Immunohistoch emistry in transitional cell carcinoma and dysplasia of the urinary bladder corr elates with disease progression.Br J Cancer,1993,68:1029
7，叶定伟，郑家富，钱松溪，等.P53基因突变与泌尿系肿瘤关系的初步 研究.中华医学杂志，1994，74：656
8，Lipponen PK.Interrelationship between expression of P53 prolif eration cell nuclear antigen and c-erb-2 in bladder cancer.Pathology,1993,61:178, http://www.100md.com