反相HPLC法测定妇康栓中没食子酸的含量
作者：苗爱东 王本富 高晓黎
单位：苗爱东 王本富(空军乌鲁木齐医院药剂科 乌鲁木齐 830011)；高晓黎(新疆医科大学药学院药剂教研室)
关键词：高效液相色谱法；妇康栓；没食子酸；对氨基苯甲酸
西北药学杂志000605 摘要 采用反相HPLC法测定妇康栓中没食子酸的含量：以对氨基苯甲酸为内标，检测波长为273nm，以Hypersil BDS C18为固定相，甲醇-四氢呋喃-冰醋酸-水(0.08∶0.64∶2∶97.28，v/v)为流动相，平均回收率99.97%，RSD0.73%。
中图分类号：R917.2 文献标识码：A
妇康栓能治疗霉菌性阴道炎等妇科疾病，由没食子、马钱子、儿茶等中药制成。没食子酸(C7H6O5*H2O)是其主要有效成分之一[1，2]，本文采用反相HPLC法测定其含量。
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1 仪器与试药
1.1 仪器 日立L-7000型液相色谱仪(包括L-7100双泵，L-7300柱温箱，L-7400检测器，日本)；TP50超声波清洗器(北京天鹏电子新技术公司)。
1.2 试药 甲醇(色谱纯，浙江黄岩化工实验厂)；对氨基苯甲酸(中国药品生物制品检定所)；没食子酸(新疆医科大学药剂教研室提供)；妇康栓(自制)。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 流动相：甲醇-四氢呋喃-冰醋酸-水(0.08∶0.64∶2∶97.32，v/v)；Hypersil BDS C18保护柱(5μm，4mm×5mm)；Hypersil BDS C18柱(5μm，4mm×150mm)；流速1ml/min；纸速2.5mm/min；柱温为室温；检测波长为273nm；理论塔板数按没食子酸计算大于2500，灵敏度0.0164AUFS。没食子酸与内标物对氨基苯甲酸的保留时间分别为2.93min和4.99min，分离度大于3.0。色谱图见图1。
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图1 阴性对照及供试品色谱图
a-没食子酸 b-对氨基苯甲酸
2.2 线性关系及校正因子
2.2.1 试液的制备 精密称取对氨基苯甲酸25mg，用乙醇配成0.25mg/ml溶液。精密称取没食子酸25mg，加乙醇配成0.25mg/ml为标准溶液。
2.2.2 线性关系及校正因子考察 精密吸取标准溶液0.5，1.0，1.5，2.0，3.0，4.0ml，分别置于25ml量瓶中，加入内标液1ml，用流动相稀释定容。在上述色谱条件下，分别进样10μl，计算各组分的校正因子。以组分与内标物浓度比(R)为横坐标，峰面积比(A)为纵坐标回归，方程为：A＝0.693R+0.152，r＝0.9999，线性范围5～40μg/ml，平均校正因子为1.2850。同一供试品溶液，在0～6h内依法测定，RSD1.82%；连续进样重复测定5次，RSD1.02%。平均回收率为99.97%(RSD＝0.73%)。
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2.3 样品含量测定 取妇康栓剂5粒，置小烧杯中，在40℃～50℃水浴上微温熔融，搅拌冷却至室温；精密称取适量(相当于没食子酸10mg)置100ml量瓶中，加流动相适量，在40℃～50℃水浴中充分振摇使溶解，冷至室温，用流动相稀释至刻度，摇匀；滤过；精密量取续滤液2.5ml，加入内标溶液1ml，用流动相稀释至25ml；吸取10μl进样，按内标法计算，结果4批样品含没食子酸分别为42.25，36.24，34.96，34.60mg/g。
3 讨论
没食子酸在甲醇-水、乙腈-水、甲醇-0.067mol/L磷酸二氢钾、甲醇-0.5%硫酸铵等流动相中，其色谱峰拖尾较为严重。笔者筛选实验，发现采用甲醇-四氢呋喃-冰醋酸-水(0.08∶0.64∶2∶97.32，v/v)为流动相较为适宜，没食子酸的峰形尖锐，色谱分析8min内即可完成。
参考文献
[1]陈连剑，刘新宇，郭华.紫外分光光度法测定猴耳环消炎片中没食子酸的含量.广东药学院学报，1998，16(4)：322
[2]沙明，曹爱民，王冰，等.高效液相色谱法测定地榆中没食子酸的含量.中国中药杂志，1999，24(2)：99
(收稿日期：2000-05-10), 百拇医药
单位：苗爱东 王本富(空军乌鲁木齐医院药剂科 乌鲁木齐 830011)；高晓黎(新疆医科大学药学院药剂教研室)
关键词：高效液相色谱法；妇康栓；没食子酸；对氨基苯甲酸
西北药学杂志000605 摘要 采用反相HPLC法测定妇康栓中没食子酸的含量：以对氨基苯甲酸为内标，检测波长为273nm，以Hypersil BDS C18为固定相，甲醇-四氢呋喃-冰醋酸-水(0.08∶0.64∶2∶97.28，v/v)为流动相，平均回收率99.97%，RSD0.73%。
中图分类号：R917.2 文献标识码：A
妇康栓能治疗霉菌性阴道炎等妇科疾病，由没食子、马钱子、儿茶等中药制成。没食子酸(C7H6O5*H2O)是其主要有效成分之一[1，2]，本文采用反相HPLC法测定其含量。
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1 仪器与试药
1.1 仪器 日立L-7000型液相色谱仪(包括L-7100双泵，L-7300柱温箱，L-7400检测器，日本)；TP50超声波清洗器(北京天鹏电子新技术公司)。
1.2 试药 甲醇(色谱纯，浙江黄岩化工实验厂)；对氨基苯甲酸(中国药品生物制品检定所)；没食子酸(新疆医科大学药剂教研室提供)；妇康栓(自制)。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 流动相：甲醇-四氢呋喃-冰醋酸-水(0.08∶0.64∶2∶97.32，v/v)；Hypersil BDS C18保护柱(5μm，4mm×5mm)；Hypersil BDS C18柱(5μm，4mm×150mm)；流速1ml/min；纸速2.5mm/min；柱温为室温；检测波长为273nm；理论塔板数按没食子酸计算大于2500，灵敏度0.0164AUFS。没食子酸与内标物对氨基苯甲酸的保留时间分别为2.93min和4.99min，分离度大于3.0。色谱图见图1。
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图1 阴性对照及供试品色谱图
a-没食子酸 b-对氨基苯甲酸
2.2 线性关系及校正因子
2.2.1 试液的制备 精密称取对氨基苯甲酸25mg，用乙醇配成0.25mg/ml溶液。精密称取没食子酸25mg，加乙醇配成0.25mg/ml为标准溶液。
2.2.2 线性关系及校正因子考察 精密吸取标准溶液0.5，1.0，1.5，2.0，3.0，4.0ml，分别置于25ml量瓶中，加入内标液1ml，用流动相稀释定容。在上述色谱条件下，分别进样10μl，计算各组分的校正因子。以组分与内标物浓度比(R)为横坐标，峰面积比(A)为纵坐标回归，方程为：A＝0.693R+0.152，r＝0.9999，线性范围5～40μg/ml，平均校正因子为1.2850。同一供试品溶液，在0～6h内依法测定，RSD1.82%；连续进样重复测定5次，RSD1.02%。平均回收率为99.97%(RSD＝0.73%)。
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2.3 样品含量测定 取妇康栓剂5粒，置小烧杯中，在40℃～50℃水浴上微温熔融，搅拌冷却至室温；精密称取适量(相当于没食子酸10mg)置100ml量瓶中，加流动相适量，在40℃～50℃水浴中充分振摇使溶解，冷至室温，用流动相稀释至刻度，摇匀；滤过；精密量取续滤液2.5ml，加入内标溶液1ml，用流动相稀释至25ml；吸取10μl进样，按内标法计算，结果4批样品含没食子酸分别为42.25，36.24，34.96，34.60mg/g。
3 讨论
没食子酸在甲醇-水、乙腈-水、甲醇-0.067mol/L磷酸二氢钾、甲醇-0.5%硫酸铵等流动相中，其色谱峰拖尾较为严重。笔者筛选实验，发现采用甲醇-四氢呋喃-冰醋酸-水(0.08∶0.64∶2∶97.32，v/v)为流动相较为适宜，没食子酸的峰形尖锐，色谱分析8min内即可完成。
参考文献
[1]陈连剑，刘新宇，郭华.紫外分光光度法测定猴耳环消炎片中没食子酸的含量.广东药学院学报，1998，16(4)：322
[2]沙明，曹爱民，王冰，等.高效液相色谱法测定地榆中没食子酸的含量.中国中药杂志，1999，24(2)：99
(收稿日期：2000-05-10), 百拇医药