黄芪复方制剂对实验性糖尿病大鼠及肠道菌群的影响
马淑霞 杨景云 施忠凯 李丽秋 李俭 刘君星 形德刚 吕密凯
摘要 降糖素口服液给大鼠灌胃20d后,可使四氧嘧啶所致糖尿病大鼠血糖显著下降,实验组大鼠血糖接近正常水平,菌群失调得到恢复,提示降糖素口服液可能在治疗糖尿病及调整菌群失调方面具有一定应用前景。
关键词:黄芪 四氧嘧啶 实验性糖尿病大鼠
糖尿病是给人类造成巨大危害的慢性病之一,在临床上很难治愈,且发病率有日渐增高的趋势。我院生理教研室对糖尿病的防治进行了系列研究,特别是在用中药防治糖尿病方面取得了一定进展。在此基础上我们又筛选出黄芪复方制剂(降糖素口服液),因其有良好的调节体内菌群平衡的作用,因此可对胰岛素的分泌及发挥作用产生一定的影响。
1 材料与方法
, 百拇医药
1.1 实验动物 Wistar雄性大鼠(体重190g~250g),佳木斯大学医学院动物室提供。实验前在本室饲养6天,饮食不限。四氧嘧啶(Alloxan AXN):Fluka公司,瑞典。葡萄糖手工酶法检验试剂盒:黑龙江省临床检验中心。731型分光光度计:上海长江科学仪器厂。降糖素的制备:主要用中药黄芪、葛根、黄芩、刺五加、甘草等经醇提后制成的复方口服液。
1.2 糖尿病模型的制备 动物随机分为对照组和实验组,禁食24h后(饮水不限),分别在乙醚麻醉下尾静脉一次注射1.5%四氧嘧啶(50mg/kg,实验组)及等体积生理盐水(对照组)。模型制成后,实验组再随机分两组,糖尿病自然恢复组(简称糖尿病组)和降糖素口服液治疗组(简称治疗组)。糖尿病口服液治疗组按比例5mg/d.kg剂量胃饲降糖素口服液,糖尿病组以同样剂量胃饲Nacl水溶液,每周测血糖一次,连续4周。
1.3 培养基 EMB,Lbs,Bdb,Ec,Bs。
, http://www.100md.com
1.4 肠道菌群检查 大鼠在实验室饲养6d后检测5种优势菌群:肠球菌,肠杆菌,类杆菌,双歧杆菌,乳酸杆菌,作为正常对照组,然后检查模型组大鼠肠道菌群。最后对自然恢复组及降糖素口服液治疗组进行菌群检查。
1.5 统计学处理用随机数据t检验法比较两组数据,以<0.01为显著性界限。
2 结 果
2.1 四氧嘧啶致大鼠糖尿病作用 见表1。
表1 四氧嘧啶致大鼠糖尿病作用(x±SD)
组 别
例 数
血糖(mmol/L)
对照组
, http://www.100md.com
10
6.61±0.24
实验组
20
17.89±3.06*
注:*P<0.01与对照组相比
2.2 降糖素口服液对四氧嘧啶所致糖尿病大鼠的降血糖作用 见表2。
表2 降糖素口服液对四氧嘧啶所致糖尿病
大鼠血糖影响(x±SD)
组别
例数
, 百拇医药
1周
2周
3周
4周
糖尿病组
10
17.53±4.24
16.75±5.5
16.88±3.85
17.07±4.69
治疗组
10
17.70±5.01
, http://www.100md.com
14.65±3.63
7.01±1.22*
6.43±0.93
注:*P<0.01与糖尿病组相比
2.3 四氧嘧啶致大鼠肠道菌群失调作用 见表3
表3 模型组大鼠肠道菌群均值(x±SD)(lg10n/g)
EMB
Ec
Bs
Bdb
Lbs
, 百拇医药
正常对照组
8.24±0.86
7.08±0.26
10.07±0.52
10.89±0.92
9.01±0.76
模型组
6.14±0.86*
6.44±0.11*
7.68±0.43*
7.28±0.81*
, 百拇医药
8.12±0.28*
注:*P<0.01
2.4 自然恢复组及降糖素口服液治疗组大鼠肠道菌群变化 见表4。
表4 自然恢复组及治疗组大鼠肠道
菌群均值(x±SD)lg10n/g)
EMB
Ec
Bs
Bdb
Lbs
自然恢复组
, 百拇医药
6.92±0.83
6.59±0690
8.56±0.87
8.93±0.72
8.22±0.75
治疗组
7.23±0.21
6.89±0.46
9.85±0.26*
9.91±0.33*
9.07±0.18
, http://www.100md.com
注:*P<0.01
3 讨 论
实验组血糖显著高于对照组(P<0.01),且血糖的升高幅度均超过对照组100%,说明实验组大鼠患糖尿病并有菌群失调。用降糖素口服液胃饲后,从第3周测血糖,降糖素口服液治疗组动物血糖显著低于糖尿病组(P<0.01),菌群失调有所改善,提示降糖素口服液对实验性糖尿病大鼠有一定降血糖及菌群调整作用。与大肠杆菌产生封闭胰岛素受体的物质有关。
祖国医学虽然早在2000年前就对糖尿病有所认识,但有关中草药对血糖影响的研究,于本世纪30年代才开始进行动物实验。在这些实验中又很少对实验性糖尿病的胰岛β细胞机能、形态、结构的影响进行研究,尤其是从微生态学的角度进行研究更少见报道,微生态学的研究发现,正常菌群与糖尿病有一定关系。临床上服用酸奶或双歧杆菌制剂,可改善糖尿病的症状。Leroih等发现有一种大肠杆菌(Esherchia coli)能产生胰岛素样物质。这种物质进入血行后,先与胰岛素的靶细胞接触封闭了胰岛素受体。当真正的胰岛素与靶细胞接触时已无法发挥作用,于是血糖不能被吸收和利用而发生糖尿病。此种情况下应用具有扶植双歧杆菌、乳杆菌等的中药,使之发挥生物拮抗作用,排除能产生胰岛素样物质的大肠杆菌,糖尿病即可得到缓解。降糖素的降糖作用机制可能与此有关,尚需进一步研究。
, http://www.100md.com
作者简介:马淑霞(1966-),女,回族,副主任,副教授,硕士。
作者单位:马淑霞(佳木斯大学医学院 微生物教研室,黑龙江 佳木斯 154002)
杨景云(佳木斯大学医学院 微生物教研室,黑龙江 佳木斯 154002)
施忠凯(佳木斯大学医学院 微生物教研室,黑龙江 佳木斯 154002)
李丽秋(佳木斯大学医学院 微生物教研室,黑龙江 佳木斯 154002)
李 俭(佳木斯大学医学院 微生物教研室,黑龙江 佳木斯 154002)
刘君星(佳木斯大学医学院 微生物教研室,黑龙江 佳木斯 154002)
形德刚(生理教研室,佳木斯 154002)
, 百拇医药
吕密凯(生理教研室,佳木斯 154002)
参考文献
[1]徐叔云,等.药理实验方法[M].北京:人民卫生出版计,1986,989.
[2]于吉人,等.消炎痛对四氧嘧啶引起糖尿病大鼠的保护作用[J].生理学报,1992,44(2):202.
[3]丁道芳.医学科学研究基本方法[M].沈阳:中国医科大学出版社,1984,87.
[4]蒋寒青,等.双歧杆菌与乳杆菌对大鼠菌群失调的调整作用的初步研究[J].中国微生态学杂志,1995,7(2):32.
[5]康白.微生态学原理[M].大连:大连出版社,1986,142., 百拇医药
摘要 降糖素口服液给大鼠灌胃20d后,可使四氧嘧啶所致糖尿病大鼠血糖显著下降,实验组大鼠血糖接近正常水平,菌群失调得到恢复,提示降糖素口服液可能在治疗糖尿病及调整菌群失调方面具有一定应用前景。
关键词:黄芪 四氧嘧啶 实验性糖尿病大鼠
糖尿病是给人类造成巨大危害的慢性病之一,在临床上很难治愈,且发病率有日渐增高的趋势。我院生理教研室对糖尿病的防治进行了系列研究,特别是在用中药防治糖尿病方面取得了一定进展。在此基础上我们又筛选出黄芪复方制剂(降糖素口服液),因其有良好的调节体内菌群平衡的作用,因此可对胰岛素的分泌及发挥作用产生一定的影响。
1 材料与方法
, 百拇医药
1.1 实验动物 Wistar雄性大鼠(体重190g~250g),佳木斯大学医学院动物室提供。实验前在本室饲养6天,饮食不限。四氧嘧啶(Alloxan AXN):Fluka公司,瑞典。葡萄糖手工酶法检验试剂盒:黑龙江省临床检验中心。731型分光光度计:上海长江科学仪器厂。降糖素的制备:主要用中药黄芪、葛根、黄芩、刺五加、甘草等经醇提后制成的复方口服液。
1.2 糖尿病模型的制备 动物随机分为对照组和实验组,禁食24h后(饮水不限),分别在乙醚麻醉下尾静脉一次注射1.5%四氧嘧啶(50mg/kg,实验组)及等体积生理盐水(对照组)。模型制成后,实验组再随机分两组,糖尿病自然恢复组(简称糖尿病组)和降糖素口服液治疗组(简称治疗组)。糖尿病口服液治疗组按比例5mg/d.kg剂量胃饲降糖素口服液,糖尿病组以同样剂量胃饲Nacl水溶液,每周测血糖一次,连续4周。
1.3 培养基 EMB,Lbs,Bdb,Ec,Bs。
, http://www.100md.com
1.4 肠道菌群检查 大鼠在实验室饲养6d后检测5种优势菌群:肠球菌,肠杆菌,类杆菌,双歧杆菌,乳酸杆菌,作为正常对照组,然后检查模型组大鼠肠道菌群。最后对自然恢复组及降糖素口服液治疗组进行菌群检查。
1.5 统计学处理用随机数据t检验法比较两组数据,以<0.01为显著性界限。
2 结 果
2.1 四氧嘧啶致大鼠糖尿病作用 见表1。
表1 四氧嘧啶致大鼠糖尿病作用(x±SD)
组 别
例 数
血糖(mmol/L)
对照组
, http://www.100md.com
10
6.61±0.24
实验组
20
17.89±3.06*
注:*P<0.01与对照组相比
2.2 降糖素口服液对四氧嘧啶所致糖尿病大鼠的降血糖作用 见表2。
表2 降糖素口服液对四氧嘧啶所致糖尿病
大鼠血糖影响(x±SD)
组别
例数
, 百拇医药
1周
2周
3周
4周
糖尿病组
10
17.53±4.24
16.75±5.5
16.88±3.85
17.07±4.69
治疗组
10
17.70±5.01
, http://www.100md.com
14.65±3.63
7.01±1.22*
6.43±0.93
注:*P<0.01与糖尿病组相比
2.3 四氧嘧啶致大鼠肠道菌群失调作用 见表3
表3 模型组大鼠肠道菌群均值(x±SD)(lg10n/g)
EMB
Ec
Bs
Bdb
Lbs
, 百拇医药
正常对照组
8.24±0.86
7.08±0.26
10.07±0.52
10.89±0.92
9.01±0.76
模型组
6.14±0.86*
6.44±0.11*
7.68±0.43*
7.28±0.81*
, 百拇医药
8.12±0.28*
注:*P<0.01
2.4 自然恢复组及降糖素口服液治疗组大鼠肠道菌群变化 见表4。
表4 自然恢复组及治疗组大鼠肠道
菌群均值(x±SD)lg10n/g)
EMB
Ec
Bs
Bdb
Lbs
自然恢复组
, 百拇医药
6.92±0.83
6.59±0690
8.56±0.87
8.93±0.72
8.22±0.75
治疗组
7.23±0.21
6.89±0.46
9.85±0.26*
9.91±0.33*
9.07±0.18
, http://www.100md.com
注:*P<0.01
3 讨 论
实验组血糖显著高于对照组(P<0.01),且血糖的升高幅度均超过对照组100%,说明实验组大鼠患糖尿病并有菌群失调。用降糖素口服液胃饲后,从第3周测血糖,降糖素口服液治疗组动物血糖显著低于糖尿病组(P<0.01),菌群失调有所改善,提示降糖素口服液对实验性糖尿病大鼠有一定降血糖及菌群调整作用。与大肠杆菌产生封闭胰岛素受体的物质有关。
祖国医学虽然早在2000年前就对糖尿病有所认识,但有关中草药对血糖影响的研究,于本世纪30年代才开始进行动物实验。在这些实验中又很少对实验性糖尿病的胰岛β细胞机能、形态、结构的影响进行研究,尤其是从微生态学的角度进行研究更少见报道,微生态学的研究发现,正常菌群与糖尿病有一定关系。临床上服用酸奶或双歧杆菌制剂,可改善糖尿病的症状。Leroih等发现有一种大肠杆菌(Esherchia coli)能产生胰岛素样物质。这种物质进入血行后,先与胰岛素的靶细胞接触封闭了胰岛素受体。当真正的胰岛素与靶细胞接触时已无法发挥作用,于是血糖不能被吸收和利用而发生糖尿病。此种情况下应用具有扶植双歧杆菌、乳杆菌等的中药,使之发挥生物拮抗作用,排除能产生胰岛素样物质的大肠杆菌,糖尿病即可得到缓解。降糖素的降糖作用机制可能与此有关,尚需进一步研究。
, http://www.100md.com
作者简介:马淑霞(1966-),女,回族,副主任,副教授,硕士。
作者单位:马淑霞(佳木斯大学医学院 微生物教研室,黑龙江 佳木斯 154002)
杨景云(佳木斯大学医学院 微生物教研室,黑龙江 佳木斯 154002)
施忠凯(佳木斯大学医学院 微生物教研室,黑龙江 佳木斯 154002)
李丽秋(佳木斯大学医学院 微生物教研室,黑龙江 佳木斯 154002)
李 俭(佳木斯大学医学院 微生物教研室,黑龙江 佳木斯 154002)
刘君星(佳木斯大学医学院 微生物教研室,黑龙江 佳木斯 154002)
形德刚(生理教研室,佳木斯 154002)
, 百拇医药
吕密凯(生理教研室,佳木斯 154002)
参考文献
[1]徐叔云,等.药理实验方法[M].北京:人民卫生出版计,1986,989.
[2]于吉人,等.消炎痛对四氧嘧啶引起糖尿病大鼠的保护作用[J].生理学报,1992,44(2):202.
[3]丁道芳.医学科学研究基本方法[M].沈阳:中国医科大学出版社,1984,87.
[4]蒋寒青,等.双歧杆菌与乳杆菌对大鼠菌群失调的调整作用的初步研究[J].中国微生态学杂志,1995,7(2):32.
[5]康白.微生态学原理[M].大连:大连出版社,1986,142., 百拇医药