HPLC 法测定小柴胡胶囊中黄芩苷的含量
作者：何锦丽
单位：杭州市药物研究所 310023
关键词：
中草药000819 小柴胡胶囊系卫生部药品标准收载的小柴胡冲剂剂型改革而成，是由柴胡、黄芩、党参、半夏、生姜、甘草、大枣等中药组成，具有和解少阳，疏肝和胃的功效，用于治疗感冒、发热等。原冲剂仅有常规项检查，为了控制成品的质量，考虑到黄芩为方中君药，其主要成分黄芩苷有抗菌消炎解热等作用，我们采用反相高效液相色谱法测定了黄芩苷的含量，为控制成药的质量标准提供了依据。
1 药品与试剂
对照品：黄芩苷对照品从中国药品生物制品检定所购得。
样品：由杭州市药物研究所研制。
, http://www.100md.com
试剂：水为重蒸水，甲醇为色谱纯，其余均为分析纯。
2 仪器与色谱条件
SP8800 高效液相色谱仪： Spectra 200 型检测器 SP4600 型积分仪。色谱柱：大连依利特公司 μ-Bondapak C18(200 mm×4.0 mm 10 μm) 流动相：甲醇-0.2% 磷酸溶液 (60∶40)，流速： 1.0 mL/min；检测波长： 278 nm，理论塔板数以黄芩苷峰计算应不低于 3 500。按以上条件分析样品(图1)。
图1 对照品与样品色谱图
3 方法与结果
3.1 对照品溶液的制备：精密称取在 60 ℃ 真空干燥 4 h 的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每 1 mL 约含 0.3 mg 的对照品溶液。
, 百拇医药
3.2 样品溶液的制备：取胶囊 40 粒，倾出其内容物，混匀，研细，取细粉约 0.3 g，精密称定，置具塞锥形管中，加入甲醇 30 mL，密塞，超声处理 15 min，放冷，滤过，滤液置 50 mL 容量瓶中，用甲醇分次洗涤残渣和容器，洗液并入同一容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
3.3 样品测定方法：准确吸取样品溶液和对照品溶液各 20 μL,注入液相色谱仪，照上述色谱条件，外标法进行测定。
3.4 精密度试验：精密吸取对照品溶液 20 μL，注入液相色谱仪，重复进样 5 次，求得峰面积，RSD 为 0.42%。
3.5 线性关系试验：精密称取在 60 ℃ 真空干燥至恒重的黄芩苷对照品，以甲醇制成每 1 mL 含23.62 μg 的对照品溶液， 精密吸取 4， 8，12，16， 20μL 进样测定，以峰面积和进样量进行线性回归计算，结果表明黄芩苷在 0～0.4724 μg 之间线性关系良好，以黄芩苷进样量 (μg) 为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，回归方程为：Y=2622.56X，相关系数 r=0.999 9。
, 百拇医药
3.6 重现性试验：按样品溶液制备方法处理同一批样品5份，依法测定，求得峰面积，结果重现性良好，样品中黄芩苷含量的 RSD 为 0.98%。
3.7 回收率试验：准确称取已测知含量的样品，定量加入黄芩苷对照品适量，依法测定，结果测定的回收率为 101.9%，RSD 为0.72%(n=5)。
3.8 样品测定：按样品测定方法测定5 批成药样品，结果黄芩苷含量分别为 1.503%，1.602%，1.522%，1.548%，1.598%。
4 讨论
4.1 流动相的选择：本实验流动相选择了甲醇-0.2 % 磷酸溶液 (60∶40，50∶50，70∶30)进行试验，结果以甲醇-0.2%磷酸溶液 (60∶40)流动相分离效果比较好。
4.2 对黄芩苷标准品溶液在 200～600 nm 范围内进行扫描，测得其最大吸收波长为 278 nm，对样品中所测成分色谱峰与黄芩苷对照品色谱峰在 200～600 nm 的紫外光谱进行比较，结果一致。所以我们选用紫外检测波长为 278 nm，黄芩苷峰可以与其它峰达到良好的基线分离。
(1999-06-17收稿), 百拇医药
单位：杭州市药物研究所 310023
关键词：
中草药000819 小柴胡胶囊系卫生部药品标准收载的小柴胡冲剂剂型改革而成，是由柴胡、黄芩、党参、半夏、生姜、甘草、大枣等中药组成，具有和解少阳，疏肝和胃的功效，用于治疗感冒、发热等。原冲剂仅有常规项检查，为了控制成品的质量，考虑到黄芩为方中君药，其主要成分黄芩苷有抗菌消炎解热等作用，我们采用反相高效液相色谱法测定了黄芩苷的含量，为控制成药的质量标准提供了依据。
1 药品与试剂
对照品：黄芩苷对照品从中国药品生物制品检定所购得。
样品：由杭州市药物研究所研制。
, http://www.100md.com
试剂：水为重蒸水，甲醇为色谱纯，其余均为分析纯。
2 仪器与色谱条件
SP8800 高效液相色谱仪： Spectra 200 型检测器 SP4600 型积分仪。色谱柱：大连依利特公司 μ-Bondapak C18(200 mm×4.0 mm 10 μm) 流动相：甲醇-0.2% 磷酸溶液 (60∶40)，流速： 1.0 mL/min；检测波长： 278 nm，理论塔板数以黄芩苷峰计算应不低于 3 500。按以上条件分析样品(图1)。
图1 对照品与样品色谱图3 方法与结果
3.1 对照品溶液的制备：精密称取在 60 ℃ 真空干燥 4 h 的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每 1 mL 约含 0.3 mg 的对照品溶液。
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3.2 样品溶液的制备：取胶囊 40 粒，倾出其内容物，混匀，研细，取细粉约 0.3 g，精密称定，置具塞锥形管中，加入甲醇 30 mL，密塞，超声处理 15 min，放冷，滤过，滤液置 50 mL 容量瓶中，用甲醇分次洗涤残渣和容器，洗液并入同一容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
3.3 样品测定方法：准确吸取样品溶液和对照品溶液各 20 μL,注入液相色谱仪，照上述色谱条件，外标法进行测定。
3.4 精密度试验：精密吸取对照品溶液 20 μL，注入液相色谱仪，重复进样 5 次，求得峰面积，RSD 为 0.42%。
3.5 线性关系试验：精密称取在 60 ℃ 真空干燥至恒重的黄芩苷对照品，以甲醇制成每 1 mL 含23.62 μg 的对照品溶液， 精密吸取 4， 8，12，16， 20μL 进样测定，以峰面积和进样量进行线性回归计算，结果表明黄芩苷在 0～0.4724 μg 之间线性关系良好，以黄芩苷进样量 (μg) 为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，回归方程为：Y=2622.56X，相关系数 r=0.999 9。
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3.6 重现性试验：按样品溶液制备方法处理同一批样品5份，依法测定，求得峰面积，结果重现性良好，样品中黄芩苷含量的 RSD 为 0.98%。
3.7 回收率试验：准确称取已测知含量的样品，定量加入黄芩苷对照品适量，依法测定，结果测定的回收率为 101.9%，RSD 为0.72%(n=5)。
3.8 样品测定：按样品测定方法测定5 批成药样品，结果黄芩苷含量分别为 1.503%，1.602%，1.522%，1.548%，1.598%。
4 讨论
4.1 流动相的选择：本实验流动相选择了甲醇-0.2 % 磷酸溶液 (60∶40，50∶50，70∶30)进行试验，结果以甲醇-0.2%磷酸溶液 (60∶40)流动相分离效果比较好。
4.2 对黄芩苷标准品溶液在 200～600 nm 范围内进行扫描，测得其最大吸收波长为 278 nm，对样品中所测成分色谱峰与黄芩苷对照品色谱峰在 200～600 nm 的紫外光谱进行比较，结果一致。所以我们选用紫外检测波长为 278 nm，黄芩苷峰可以与其它峰达到良好的基线分离。
(1999-06-17收稿), 百拇医药