3种不同加工川贝母有效成分的比较
作者：邝翠仪 钟诗龙 黎曙霞 任斌
单位：中山医科大学附属第一医院药学部 广州 510080
关键词：川贝母；加工；有效成分；含量测定
中草药000817摘 要 目的：通过对3种不同加工川贝母有效成分分析比较，为优化川贝母加工工艺提供理论依据。方法：提取不同加工方法处理的川贝母总皂苷和总生物碱并测定其含量。结果：测得传统加工法、水洗法、打硫法处理后川贝母的总苷含量分别为 0.887%、0.949%、0.486%，总生物碱含量分别为 0.082%、0.098%、0.095%。结论：单因素方差分析的两两比较显示水洗加工方法为优。
川贝母 Tendrilleaf fritillary Bulb 是临床常用中药，目前加工工艺主要有 3 种方法。本实验通过对 3 种不同加工工艺处理后的川贝母有效成分生物碱、甾体皂苷等进行比较，为优化川贝母加工工艺提供理论依据。
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1 实验部分
1.1 ①传统加工法：夏季挖取鳞茎，去净泥土，晒至半干后撞去外表粗皮，再复晒至足干；②水洗法：夏季挖取鳞茎，水洗去泥土，晒至足干；③打硫法：夏季挖取鳞茎，去净泥土，装入网袋置于熏炉中，用硫磺熏后晒干。
1.2 仪器及材料：岛津 UV-1601PC 紫外分光光度计，定量滤纸；3种方法加工贝母。贝母样品均采自四川阿坝，实验时除去杂质，粉碎，置 60 ℃ 真空干燥箱内烘烤 5 h，置干燥器中备用。贝母素甲 (peimine) 对照品(中国药品生物制品检定所)。其他试剂均为分析纯。
1.3 总生物碱的提取：精密称取各贝母样品粉末 2.0 g,以 40 mL 0.5% 盐酸乙醇为溶剂，95 ℃ 回流 1.5 h。冷却后过滤，滤渣用 0.5% 盐酸乙醇洗涤，过滤，滤液合并，水浴挥干溶剂，分次用氯仿溶解，过滤，滤液置于 50 mL 容量瓶中，用氯仿定容。
, 百拇医药
提取终点的确定：滤渣用 0.5 %盐酸乙醇洗涤过滤后，以 0.5 % 盐酸乙醇回流 0.5 h，取提取液约 0.5 mL，置小试管中，加 0.1 mol/L 盐酸 1 mL，放水浴上将有机溶剂蒸去，放冷，滴加改良的 Drangendorff 试剂1滴，没有发生混浊，说明提取完全。
1.4 标准曲线的制备：精密称取贝母素甲对照品 2.89 mg 于 50 mL 量瓶中，氯仿溶解，定容至刻度。准确吸取 1.0,2.0,3.0,4.0,5.0 mL 于 25 mL 量瓶中，加入 2.0 mL pH 5.0 缓冲溶液及 2.0 mL 0.001 mol/L 溴麝香草酚蓝溶液，摇匀，再加氯仿至刻度，震摇 15 min ，移至分液漏斗中，分离下层液作测试液。以 0 管为空白，先以对照品测试液于分光光度计 300～600 nm 进行扫描，λmax 为 410 nm，然后在该波长处分别测定吸光度。在本实验条件下，贝母素甲在 2.368～11.84 μg/mL 范围内线性关系良好，回归方程为：A=0.041 2 C-0.015 5 (r=0.9995)。
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1.5 加样回收率及精密度测定：精密量取已知含量的样品液9份，分为 3 组，分别加入贝母素甲对照品溶液依标准曲线项下操作测定吸光度。结果平均回收率为 97.7%，RSD=4.2%。
1.6 样品测定：精密吸取样品溶液一定量，依标准曲线项下操作测定吸光度。
1.6.1 总皂苷的含量测定：精密称取各贝母样品粉末约 5 g，置索氏提取器中加入 150 mL 甲醇回流 6 h ，提取液浓缩至约 50 mL，冷却后加入 150 mL 乙醚混匀，冰箱放置过夜，倾出上清液，沉淀用 10 mL 乙醚洗涤，沉淀加热溶解于 50 mL 甲醇中，用玻砂漏斗过滤，冷后再加 150 mL乙醚，混匀，置冰箱内过夜，倾出上清液，再用乙醚洗涤沉淀2次，然后转移至表面皿，60 ℃真空干燥，得总皂苷。
2 结果
3 种样品的总生物碱(按贝母素甲计) 和总皂苷的测定结果见表1。
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表1 3种样品的总皂苷和总生物碱含量 种类
总皂苷 (n=6)
总生物碱 (n=6)
含量(%)
RSD(%)
含量(%)
RSD(%)
传统加工法
0.887
12.40
0.082
1.28
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水洗法
0.949
8.82
0.098
3.56
打硫法
0.468
14.33
0.095
1.70
由单因素方差分析的两两比较，传统加工法与水洗法处理后的样品含总皂苷无显著性差异(P>0.05)，均显著高于打硫法处理后的总皂苷含量。而水洗法与打硫法处理后的样品含生物碱无显著性差异(P>0.05)，均显著高于传统加工法处理后的总生物碱含量。可见水洗法处理后贝母含总皂苷和总生物碱较高，色泽洁白，外观好，加工方法也较简便，此法为优。传统加工法损失生物碱较多，打硫法损失总皂苷较多，因此可根据所需成分选择加工方法。 (2000-01-26收稿), 百拇医药
单位：中山医科大学附属第一医院药学部 广州 510080
关键词：川贝母；加工；有效成分；含量测定
中草药000817摘 要 目的：通过对3种不同加工川贝母有效成分分析比较，为优化川贝母加工工艺提供理论依据。方法：提取不同加工方法处理的川贝母总皂苷和总生物碱并测定其含量。结果：测得传统加工法、水洗法、打硫法处理后川贝母的总苷含量分别为 0.887%、0.949%、0.486%，总生物碱含量分别为 0.082%、0.098%、0.095%。结论：单因素方差分析的两两比较显示水洗加工方法为优。
川贝母 Tendrilleaf fritillary Bulb 是临床常用中药，目前加工工艺主要有 3 种方法。本实验通过对 3 种不同加工工艺处理后的川贝母有效成分生物碱、甾体皂苷等进行比较，为优化川贝母加工工艺提供理论依据。
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1 实验部分
1.1 ①传统加工法：夏季挖取鳞茎，去净泥土，晒至半干后撞去外表粗皮，再复晒至足干；②水洗法：夏季挖取鳞茎，水洗去泥土，晒至足干；③打硫法：夏季挖取鳞茎，去净泥土，装入网袋置于熏炉中，用硫磺熏后晒干。
1.2 仪器及材料：岛津 UV-1601PC 紫外分光光度计，定量滤纸；3种方法加工贝母。贝母样品均采自四川阿坝，实验时除去杂质，粉碎，置 60 ℃ 真空干燥箱内烘烤 5 h，置干燥器中备用。贝母素甲 (peimine) 对照品(中国药品生物制品检定所)。其他试剂均为分析纯。
1.3 总生物碱的提取：精密称取各贝母样品粉末 2.0 g,以 40 mL 0.5% 盐酸乙醇为溶剂，95 ℃ 回流 1.5 h。冷却后过滤，滤渣用 0.5% 盐酸乙醇洗涤，过滤，滤液合并，水浴挥干溶剂，分次用氯仿溶解，过滤，滤液置于 50 mL 容量瓶中，用氯仿定容。
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提取终点的确定：滤渣用 0.5 %盐酸乙醇洗涤过滤后，以 0.5 % 盐酸乙醇回流 0.5 h，取提取液约 0.5 mL，置小试管中，加 0.1 mol/L 盐酸 1 mL，放水浴上将有机溶剂蒸去，放冷，滴加改良的 Drangendorff 试剂1滴，没有发生混浊，说明提取完全。
1.4 标准曲线的制备：精密称取贝母素甲对照品 2.89 mg 于 50 mL 量瓶中，氯仿溶解，定容至刻度。准确吸取 1.0,2.0,3.0,4.0,5.0 mL 于 25 mL 量瓶中，加入 2.0 mL pH 5.0 缓冲溶液及 2.0 mL 0.001 mol/L 溴麝香草酚蓝溶液，摇匀，再加氯仿至刻度，震摇 15 min ，移至分液漏斗中，分离下层液作测试液。以 0 管为空白，先以对照品测试液于分光光度计 300～600 nm 进行扫描，λmax 为 410 nm，然后在该波长处分别测定吸光度。在本实验条件下，贝母素甲在 2.368～11.84 μg/mL 范围内线性关系良好，回归方程为：A=0.041 2 C-0.015 5 (r=0.9995)。
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1.5 加样回收率及精密度测定：精密量取已知含量的样品液9份，分为 3 组，分别加入贝母素甲对照品溶液依标准曲线项下操作测定吸光度。结果平均回收率为 97.7%，RSD=4.2%。
1.6 样品测定：精密吸取样品溶液一定量，依标准曲线项下操作测定吸光度。
1.6.1 总皂苷的含量测定：精密称取各贝母样品粉末约 5 g，置索氏提取器中加入 150 mL 甲醇回流 6 h ，提取液浓缩至约 50 mL，冷却后加入 150 mL 乙醚混匀，冰箱放置过夜，倾出上清液，沉淀用 10 mL 乙醚洗涤，沉淀加热溶解于 50 mL 甲醇中，用玻砂漏斗过滤，冷后再加 150 mL乙醚，混匀，置冰箱内过夜，倾出上清液，再用乙醚洗涤沉淀2次，然后转移至表面皿，60 ℃真空干燥，得总皂苷。
2 结果
3 种样品的总生物碱(按贝母素甲计) 和总皂苷的测定结果见表1。
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表1 3种样品的总皂苷和总生物碱含量 种类
总皂苷 (n=6)
总生物碱 (n=6)
含量(%)
RSD(%)
含量(%)
RSD(%)
传统加工法
0.887
12.40
0.082
1.28
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水洗法
0.949
8.82
0.098
3.56
打硫法
0.468
14.33
0.095
1.70
由单因素方差分析的两两比较，传统加工法与水洗法处理后的样品含总皂苷无显著性差异(P>0.05)，均显著高于打硫法处理后的总皂苷含量。而水洗法与打硫法处理后的样品含生物碱无显著性差异(P>0.05)，均显著高于传统加工法处理后的总生物碱含量。可见水洗法处理后贝母含总皂苷和总生物碱较高，色泽洁白，外观好，加工方法也较简便，此法为优。传统加工法损失生物碱较多，打硫法损失总皂苷较多，因此可根据所需成分选择加工方法。 (2000-01-26收稿), 百拇医药