骨肉瘤患者红细胞免疫功能与T淋巴细胞亚群的变化
作者：蓝旭 葛宝丰 刘雪梅 许建中
单位：蓝旭 葛宝丰 刘雪梅(兰州军区总医院骨科研究所，兰州 730050)；许建中(第三军医大学西南医院骨科，重庆 400038)
关键词：骨肉瘤；红细胞免疫；T淋巴细胞亚群
中国矫形外科杂志000803 摘 要 目的：探讨骨肉瘤患者红细胞免疫功能与T淋巴细胞亚 群的变化。方法：测定35例骨肉瘤患者红细胞补体受体花环率(C3bRR)、红细胞免疫 复合物花环率(RICR)、红细胞免疫促进因子(RFER)、红细胞免疫抑制因子(RFIR)和T淋巴细 胞亚群(CD3、CD4、CD8)的功能。同时测定30例健康献血员免疫指标作对照 。结果：骨肉瘤患者C3 bRR、RFER、CD3、CD4较对照组明显降低( P<0.05)，而RICR、RFIR、CD3则较对照组明显升高(P<0.05)。 骨肉瘤患者C3 bRR与CD4/CD8比值呈正相关。结论：骨肉瘤患者红细胞 免疫功能低下，T淋巴细胞亚群比例失调，两者有一定的联系。
, 百拇医药
中图分类号 R738.1 文献标识码 A 文章编号 1005-8478(2000)08-0740-02
The Changes of Erythrocyte Immunity and T Lymphocyte Subsets in Pat ients with Osteosarcoma
LAN Xu, GE Bao-feng, LIU Xue-mei,et al
(In stitute of Orthopedics, The General Hospital of PLA, Lanzhou, 730050)
Abstract Objective: To study the changes of erythrocyte immunity and T lymphocyte subsets in patients with osteosarcoma. Methods: The re d blood cell C3 b receptor rate (C3 bRR)、 immune complex rate(RICR)、im mune adherence enhance factor(RFER)、 immune adherence inhibitor factor(RFIR) an d the subsets of T lymphocyte were determined in 35 cases of osteosarcoma. 30 he althy men were determined for comparison. Results: The C3 bRR、RFER、CD3 、CD4 and CD4/CD8 ratio were lower in the osteosarcoma group than those of the control group(P<0.05). Meanwhile, RICR、RFIR、and CD8 were elevated (P<0.05). A positive correlation between C3 bRR and the rat io of CD4/CD8 was noted in the osteosarcoma group. Conclusions: Patients w ith osteosarcoma show lower erythrocyte function and disorder of T lymphocyte su bsets. There is probably a relationship between erythrocyte function and T lymph ocyte subsets.
, 百拇医药
Key words Osteosarcoma Erythrocyte immunity T lymphoc yte subsets
红细胞免疫系统在机体抗肿瘤免疫监护中有重要作用。红细胞具有识别、粘附、浓缩和 杀伤抗原，清除免疫复合物的能力。研究表明[1]：红细胞具有增强T细胞俘获抗 原及促进T辅助细胞的功能。本实验探讨了骨肉瘤患者红细胞免疫功能与T淋巴细胞亚群的变 化，以及两者之间的相互关系。
1 材料和方法
1.1 试剂和仪器 冻干补体致敏和未致敏酵母多糖试剂(第二军医大学长海医院免疫室)，荧光标记单克隆抗体(美国Sigma公司)。WFX-1A型原子吸收光谱仪和DUPONT 722 型分光光 度计(美国)，FAC-STAR流式细胞仪(德国)，RS-28S冷冻离心机(国产)。
1.2 研究对象 1996年9月～1999年6月住院的骨肉瘤患者，男25例，女10例。年龄5～56 岁，平均22.1岁。发生在股骨20例，胫骨11例，肱骨3例，骨盆1例。术后病理证实为骨肉瘤 ，不包括皮质旁骨肉瘤和继发性骨肉瘤。对照组选择甘肃省中心血站30例健康献血员。
, http://www.100md.com
1.3 检测方法 采集清晨空腹静脉血1.5ml，肝素抗凝。用郭峰[2]方法测定骨 肉瘤患者及对照组红细胞免疫功能。免疫荧光全血法[3]测定T淋巴细胞亚群CD 3、CD4、CD8阳性细胞百分率。测定结果用
±s表示，作组间 t检验。
2 结果
2.1 红细胞免疫功能测定 骨肉瘤患者C3 bRR、RFER明显低于对照组(P<0. 05)，而RICR和RFIR则明显高于对照组(P<0.05)，(见表1)。
表1 红细胞免疫功能检测结果(%±s) 组别
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例数
C 3bRR
RICR
RFER
RFIR
骨肉瘤组
35
10.34±1.28
12.95±1.73
93.05±6.37
7 8.19±4.65
对照组
, http://www.100md.com
30
19.36±2.18
8.22±0.76
157.67±8.46
32.67±5. 33
2.2 T淋巴细胞亚群测定 骨肉瘤患者CD3、CD4、CD4/CD8明显低于对 照组(P<0.05)，CD8则明显高于对照组(P<0.05)，(见表2)。
表2 T淋巴细胞亚群检测结果(%±s) 组别
例数
, 百拇医药
CD 3
CD4
CD8
CD4/CD8
骨肉瘤组
35
55.96±5.58
35.96±5.35
37.49±4.72
0 .96±0.24
对照组
, 百拇医药
30
69.13±5.12
40.67±7.14
21.33±3.76
1.91±0.3 3
2.3 相关分析 将骨肉瘤患者C3 bRR 与其CD4/CD8比值行相关分析，二者 呈正相关(r＝0.415，P<0.05)。
3 讨论
红细胞免疫功能主要通过其表面C3b受体的粘附功能实现，其免疫功能受血清中促进 因子(RFER)和抑制因子(RFIR)的调节[1]。红细胞参与细胞、体液免疫和细胞因子 网络的调控[4]。本组35例骨肉瘤患者红细胞C3b受体花环率降低，表明其红 细胞免疫粘附能力低下。免疫复合物花环率明显升高，则可能为继发性红细胞免疫功能下降 ， 免疫复合物增加，红细胞粘附过多的免疫复合物所引起[5]。骨肉瘤患者红细胞免 疫抑制因子升高，封闭了红细胞表面受体结合点，影响了C3b受体活性表达。另外，红 细胞免疫促进因子水平降低失去了对红细胞免疫增强促进作用。
, http://www.100md.com
骨肉瘤患者T淋巴细胞亚群中CD3、CD4、和CD4/CD8比值低于对照组，提示 骨肉瘤患者细胞免疫功能低下。而患者CD8水平较对照组明显升高，表明细胞免疫功能协 调性进一步紊乱。CD8亚群包括抑制性和杀伤性T细胞两个群体，肿瘤患者CD8亚群增 高，可能以抑制性T细胞增高为主[6]。相关分析显示骨肉瘤患者红细胞免疫粘附功 能与T淋巴细胞有一定联系。推测患者红细胞免疫功能低下，其免疫调控能力降低，对T淋巴 细胞免疫增强作用减弱，这可能是T细胞免疫功能降低的一个因素。
笔者认为，骨肉瘤的发生发展可能与患者的免疫功能状态有密切关系。监测患者的免疫功 能对临床诊断、治疗及预后评定具有重要的意义。
作者简介：蓝旭(1970-)，男，主治医师，医学硕士。研究 方向：骨肿瘤和关节外科。
, 百拇医药
参考文献：
〔1〕 郭峰，郭建.肿瘤红细胞免疫学研究[M].济南：济南出版社，1997 ，77～80，177～180.
〔2〕 郭峰，骆永珍.红细胞免疫学新探[M].南京：南京大学出版社，19 93，118～132.
〔3〕 Martinez OM, Villanueva J, Abtahi S, et al. CD30 expression identifies a functional alloreactive human T-lymphocyte subset[J].Transplan tation, 1998， 65:1 240～1 247.
〔4〕 Goroshinskaia IA, Golotina LIU, Gorlo EI, et al. Changes in lymphocyte and erythrocyte membrane microviscosity in cancer patients[J]. Vo pr-Med-Khim, 1999，45:53～57.
〔5〕 赵绵松，石岩，秦桂秀.过敏性紫癜患者红细胞免疫功能与NK细胞活 性的变化[J].中华风湿病学杂志，1999，3：44～45.
〔6〕 沈柏华，史时芳，魏克湘等.BCG加IL-2膀胱内灌注对外周血自然杀 伤细胞.T淋巴细胞亚群的影响[J].中华实验外科杂志， 1998，15：48～50.
(收稿：1999-12-24 修回：2000-03-10), 百拇医药
单位：蓝旭 葛宝丰 刘雪梅(兰州军区总医院骨科研究所，兰州 730050)；许建中(第三军医大学西南医院骨科，重庆 400038)
关键词：骨肉瘤；红细胞免疫；T淋巴细胞亚群
中国矫形外科杂志000803 摘 要 目的：探讨骨肉瘤患者红细胞免疫功能与T淋巴细胞亚 群的变化。方法：测定35例骨肉瘤患者红细胞补体受体花环率(C3bRR)、红细胞免疫 复合物花环率(RICR)、红细胞免疫促进因子(RFER)、红细胞免疫抑制因子(RFIR)和T淋巴细 胞亚群(CD3、CD4、CD8)的功能。同时测定30例健康献血员免疫指标作对照 。结果：骨肉瘤患者C3 bRR、RFER、CD3、CD4较对照组明显降低( P<0.05)，而RICR、RFIR、CD3则较对照组明显升高(P<0.05)。 骨肉瘤患者C3 bRR与CD4/CD8比值呈正相关。结论：骨肉瘤患者红细胞 免疫功能低下，T淋巴细胞亚群比例失调，两者有一定的联系。
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中图分类号 R738.1 文献标识码 A 文章编号 1005-8478(2000)08-0740-02
The Changes of Erythrocyte Immunity and T Lymphocyte Subsets in Pat ients with Osteosarcoma
LAN Xu, GE Bao-feng, LIU Xue-mei,et al
(In stitute of Orthopedics, The General Hospital of PLA, Lanzhou, 730050)
Abstract Objective: To study the changes of erythrocyte immunity and T lymphocyte subsets in patients with osteosarcoma. Methods: The re d blood cell C3 b receptor rate (C3 bRR)、 immune complex rate(RICR)、im mune adherence enhance factor(RFER)、 immune adherence inhibitor factor(RFIR) an d the subsets of T lymphocyte were determined in 35 cases of osteosarcoma. 30 he althy men were determined for comparison. Results: The C3 bRR、RFER、CD3 、CD4 and CD4/CD8 ratio were lower in the osteosarcoma group than those of the control group(P<0.05). Meanwhile, RICR、RFIR、and CD8 were elevated (P<0.05). A positive correlation between C3 bRR and the rat io of CD4/CD8 was noted in the osteosarcoma group. Conclusions: Patients w ith osteosarcoma show lower erythrocyte function and disorder of T lymphocyte su bsets. There is probably a relationship between erythrocyte function and T lymph ocyte subsets.
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Key words Osteosarcoma Erythrocyte immunity T lymphoc yte subsets
红细胞免疫系统在机体抗肿瘤免疫监护中有重要作用。红细胞具有识别、粘附、浓缩和 杀伤抗原，清除免疫复合物的能力。研究表明[1]：红细胞具有增强T细胞俘获抗 原及促进T辅助细胞的功能。本实验探讨了骨肉瘤患者红细胞免疫功能与T淋巴细胞亚群的变 化，以及两者之间的相互关系。
1 材料和方法
1.1 试剂和仪器 冻干补体致敏和未致敏酵母多糖试剂(第二军医大学长海医院免疫室)，荧光标记单克隆抗体(美国Sigma公司)。WFX-1A型原子吸收光谱仪和DUPONT 722 型分光光 度计(美国)，FAC-STAR流式细胞仪(德国)，RS-28S冷冻离心机(国产)。
1.2 研究对象 1996年9月～1999年6月住院的骨肉瘤患者，男25例，女10例。年龄5～56 岁，平均22.1岁。发生在股骨20例，胫骨11例，肱骨3例，骨盆1例。术后病理证实为骨肉瘤 ，不包括皮质旁骨肉瘤和继发性骨肉瘤。对照组选择甘肃省中心血站30例健康献血员。
, http://www.100md.com
1.3 检测方法 采集清晨空腹静脉血1.5ml，肝素抗凝。用郭峰[2]方法测定骨 肉瘤患者及对照组红细胞免疫功能。免疫荧光全血法[3]测定T淋巴细胞亚群CD 3、CD4、CD8阳性细胞百分率。测定结果用
±s表示，作组间 t检验。2 结果
2.1 红细胞免疫功能测定 骨肉瘤患者C3 bRR、RFER明显低于对照组(P<0. 05)，而RICR和RFIR则明显高于对照组(P<0.05)，(见表1)。
表1 红细胞免疫功能检测结果(%
±s) 组别, http://www.100md.com
例数
C 3bRR
RICR
RFER
RFIR
骨肉瘤组
35
10.34±1.28
12.95±1.73
93.05±6.37
7 8.19±4.65
对照组
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30
19.36±2.18
8.22±0.76
157.67±8.46
32.67±5. 33
2.2 T淋巴细胞亚群测定 骨肉瘤患者CD3、CD4、CD4/CD8明显低于对 照组(P<0.05)，CD8则明显高于对照组(P<0.05)，(见表2)。
表2 T淋巴细胞亚群检测结果(%
±s) 组别例数
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CD 3
CD4
CD8
CD4/CD8
骨肉瘤组
35
55.96±5.58
35.96±5.35
37.49±4.72
0 .96±0.24
对照组
, 百拇医药
30
69.13±5.12
40.67±7.14
21.33±3.76
1.91±0.3 3
2.3 相关分析 将骨肉瘤患者C3 bRR 与其CD4/CD8比值行相关分析，二者 呈正相关(r＝0.415，P<0.05)。
3 讨论
红细胞免疫功能主要通过其表面C3b受体的粘附功能实现，其免疫功能受血清中促进 因子(RFER)和抑制因子(RFIR)的调节[1]。红细胞参与细胞、体液免疫和细胞因子 网络的调控[4]。本组35例骨肉瘤患者红细胞C3b受体花环率降低，表明其红 细胞免疫粘附能力低下。免疫复合物花环率明显升高，则可能为继发性红细胞免疫功能下降 ， 免疫复合物增加，红细胞粘附过多的免疫复合物所引起[5]。骨肉瘤患者红细胞免 疫抑制因子升高，封闭了红细胞表面受体结合点，影响了C3b受体活性表达。另外，红 细胞免疫促进因子水平降低失去了对红细胞免疫增强促进作用。
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骨肉瘤患者T淋巴细胞亚群中CD3、CD4、和CD4/CD8比值低于对照组，提示 骨肉瘤患者细胞免疫功能低下。而患者CD8水平较对照组明显升高，表明细胞免疫功能协 调性进一步紊乱。CD8亚群包括抑制性和杀伤性T细胞两个群体，肿瘤患者CD8亚群增 高，可能以抑制性T细胞增高为主[6]。相关分析显示骨肉瘤患者红细胞免疫粘附功 能与T淋巴细胞有一定联系。推测患者红细胞免疫功能低下，其免疫调控能力降低，对T淋巴 细胞免疫增强作用减弱，这可能是T细胞免疫功能降低的一个因素。
笔者认为，骨肉瘤的发生发展可能与患者的免疫功能状态有密切关系。监测患者的免疫功 能对临床诊断、治疗及预后评定具有重要的意义。
作者简介：蓝旭(1970-)，男，主治医师，医学硕士。研究 方向：骨肿瘤和关节外科。
, 百拇医药
参考文献：
〔1〕 郭峰，郭建.肿瘤红细胞免疫学研究[M].济南：济南出版社，1997 ，77～80，177～180.
〔2〕 郭峰，骆永珍.红细胞免疫学新探[M].南京：南京大学出版社，19 93，118～132.
〔3〕 Martinez OM, Villanueva J, Abtahi S, et al. CD30 expression identifies a functional alloreactive human T-lymphocyte subset[J].Transplan tation, 1998， 65:1 240～1 247.
〔4〕 Goroshinskaia IA, Golotina LIU, Gorlo EI, et al. Changes in lymphocyte and erythrocyte membrane microviscosity in cancer patients[J]. Vo pr-Med-Khim, 1999，45:53～57.
〔5〕 赵绵松，石岩，秦桂秀.过敏性紫癜患者红细胞免疫功能与NK细胞活 性的变化[J].中华风湿病学杂志，1999，3：44～45.
〔6〕 沈柏华，史时芳，魏克湘等.BCG加IL-2膀胱内灌注对外周血自然杀 伤细胞.T淋巴细胞亚群的影响[J].中华实验外科杂志， 1998，15：48～50.
(收稿：1999-12-24 修回：2000-03-10), 百拇医药