高血压、高血脂、糖尿病患者血小板CD62p的表达及血清内皮素-1和降钙素基因相关肽水平及意义
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作者：顾静雄 李小雯 唐建英 朱晓红
单位：无锡市临床医学实验研究所 无锡市第一人民医院中心实验室 江苏无锡，214002
关键词：高血压；高脂血症；糖尿病；血小板α颗粒膜糖蛋白；内皮素-1；降钙素基因相关肽
临床心血管病杂志000812 摘要 目的：研究高血压、高血脂及糖尿病对心脑血管疾病的危险性。方法：采用流式细胞术和RIA法测定31例高血压、53例高血脂及33例糖尿病患者血小板CD62p的表达及血清内皮素-1(ET-1)、降钙素基因相关肽(CGRP)的水平。结果：所有患者的CD62p、ET-1均有不同程度升高(P<0.001)，CGRP均普遍下降(P<0.001)。CD62p：高血压及并发高血脂或高血糖患者>高胆固醇>糖尿病>高甘油三酯；ET-1：高血压>高血脂>糖尿病；CGRP：糖尿病>高血脂>高血压。结论：高血压可能是心脑血管疾病的最危险因子，对高胆固醇也应特别重视。
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The value and significances of platelet CD62p、serum endothelin-1 and calcitonin gene-related paptide in patients with hypertension、hyperlipidemia and diabetes mellitus
GU Jing-xiong，LI Xiao-wen，TANG Jian-ying，ZHU Xiao-hong
(Instilute of Clinical Laboratory,Wuxi;Central Loboratory,The First People′s Hospital,Wuxi 214002)
Abstract Objective:To study platelet CD62p and serum ET-1、 CGRP levels in hypertension,hyperlipemia and diabetes patients.Method:CD62p expression was measured by FCM，serum ET-1、CGRP were detected by RIA.Result:Both CD62p and ET-1、CGRP had significant statistical differences between patients and normal controls.The level of CD62p、ET-1 were highest and CGRP was lowest in hypertension patients.Conclusion:Hypertension might be the most dangerous factor of cardiovascular and cerebrovascular diseases.
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Key words Hypertension Hyperlipidemia Diabetes mellitus Platelet α-granule membrane glycoprotein Endothelin-1 Calcitonin gene-related peptide
高血压、高血脂及高血糖都是影响心脑血管疾病的重要因素，而血小板活化、血管内皮细胞的损伤及血管收缩、舒张调节的异常是这些疾病的病理原因之一。CD62p为血小板a颗粒膜糖蛋白，是血小板活化的灵敏标记物〔1〕；血清内皮素-1(ET-1)主要由内皮细胞产生，是血管内皮细胞损伤的标记物〔2〕，同时也是迄今最强大、持续时间最长的血管收缩肽；降钙素基因相关肽(CGRP)则是作用最强的内源性血管舒张物质〔3〕。我们通过检测高血压、高血脂及糖尿病患者的血小板CD62p及ET-1和CGRP的水平来研究其影响心脑血管疾病的危险性，为临床治疗提供资料。
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1 对象与方法
1.1 对象
高血压患者，31例，年龄51～83岁，无血脂及血糖异常。高血脂患者，53例，其中高胆固醇18例，年龄65～85岁；高甘油三酯35例，年龄73～90岁。糖尿病患者，33例，年龄62～87岁，无高血压及高血脂。高血压并发高血脂患者，25例，年龄67～79岁。高血压并发糖尿病患者，23例，年龄59～80岁。正常人，为健康献血员，30例，年龄18～35岁。
1.2 检测方法
1.2.1 血小板CD62p:缓慢抽取患者静脉血3 ml，离心取血浆，1∶1加2% 多聚甲醛溶液固定10 min，1 000 r/min离心5 min，沉淀用PBS(0.01 mol/L PB，7.93 g/L NaCl，0.04 g/L KCl)溶解，洗涤离心，最后PBS溶解，调整细胞浓度109/L；取100 μl细胞悬液加20 μl荧光标记CD62p抗体(pharmingen)，室温反应30 min，加1 ml PBS振荡洗涤，1 000 r/min离心5 min，加PBS溶解，流式细胞仪检测。
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1.2.2 ET-1测定：晨空腹抽取静脉血2 ml，加10%EDTA 2 Na 30 μl和抑肽酶40 μl，4℃，3 000 r/min离心10 min，取血浆；用放射免疫试剂盒(北京东亚免疫技术研究所)均相竞争法直接测定ET-1含量。
1.2.3 CGRP测定：同上法采集标本，放射免疫试剂盒(北京东亚免疫技术研究所)非平衡法测定CGRP含量。
1.3 统计学处理
采用t检验分析。
2 结果
2.1 血小板CD62p的表达
高血压、高胆固醇、高甘油三酯及糖尿病患者血小板CD62p分别为(52.9±19.4)%、(31.7±21.6)%、(7.4±5.2)%及(11.7±4.4)%，高血压并发高血脂及高血压并发糖尿病者分别为(50.8±22.4)%、(59.1±22.3)%，均较正常人(1.3±0.5)%有显著升高(P<0.001)。
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2.2 血清ET-1和CGRP水平
高血压、高血脂及糖尿病患者和正常人血清ET-1、CGRP水平见表1。
表1 高血压、高血脂及糖尿病患者与正常人血清ET-1、CGRP水平比较ng/L,±s 组别
例数
ET-1
CGRP
高血压组
31
99.3±27.11)
39.1±10.41)
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高血脂组
53
77.4±21.51)
54.6±15.31)
糖尿病组
33
66.5±20.61)
70.1±13.21)
正常组
30
52.8±10.1
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117.1±33.8
与正常组比较1)P<0.0013 讨论
血小板的主要生理功能是参与止血和血栓形成，并且在动脉粥样硬化、肿瘤转移和炎症反应等过程中起重要作用。血小板在止血生理或病理过程中所起的作用与其粘附、释放和聚集等密切相关，而血小板的粘附、释放、聚集等反应统称为血小板活化。CD62p又称P-选择素，是血小板a颗粒膜糖蛋白，它在血小板活化时从a颗粒转到细胞膜上，是血小板活化的灵敏标记物。研究表明，在血栓疾病发病时血小板CD62p显著升高〔1〕，可作为血栓疾病的病情监测和评价血栓前状态的有效指标。ET是迄今所知的作用最强、持续时间最久的缩血管活性多肽〔2〕。目前在生物体内有ET-1、ET-2、ET-3、ET-4四种，组成内皮素家族〔4〕。ET-1主要在内皮细胞中表达，它在内皮细胞损伤时释放，是其损伤标记物〔5〕。动脉血管内皮细胞损伤是促进动脉硬化和血栓形成的基本原因。研究表明，在动脉粥样硬化及血栓性疾病发作时患者血清ET-1有明显升高〔1，5〕。CGRP是在人和哺乳动物内存在的一种含37个氨基酸残基的多肽，主要是降钙素基因在神经组织的表达产物，具广泛的生物学效应特别对心血管和消化系统。它有强心、扩血管作用，是迄今为止发现的最强大的内源性血管舒张物质〔3〕。它通过扩张血管，增加血流量来对抗组织损伤，对血管内皮细胞起重要的保护作用。从本检测的结果发现，高血压、高血脂和糖尿病患者的血小板CD62p、血清ET-1均有不同程度的升高，而血清CGRP均下降。其中在单纯高血压患者的血小板CD62p及ET-1值最高，CGRP值最低，这表明高血压对心脑血管疾病的危险系数可能最大。对其治疗时应重视对血小板活化的控制以及对血管收缩、舒张的调整。高血脂和糖尿病对血小板活化的影响程度虽然小一些，但如果并发高血压时能加重其危险性。而且高血脂、糖尿病患者同样存在内皮损伤和血管舒张不良的病因，这也是其并发心脑血管疾病的原因之一，因此在对他们治疗的时候，同样需要控制血小板活化，改善血管舒张状况和内皮细胞损伤。另外高血脂中高胆固醇患者的CD62p明显高于高甘油三酯者，这进一步证实高胆固醇对动脉粥样硬化形成的危险性高于高甘油三酯的结论〔6〕。
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参考文献
1，王振义，李家增，阮长耿，等.血栓与止血——基础理论与临床.第2版.上海：上海科学技术出版社，1996，231～257
2，Yanagisawa M，Kurihara H，Kimura S，et al.A novel potent vasoconstrictor peptide produced by endothelial cells. Nature ，1988，332:411～415
3，赵水平，王钟林，陆宇良.临床血脂学.长沙：湖南科技出版社，1997，33～46
4，Inoue A，Yanagisawa M，Kimura S，et al.The human endothelin family:Three structurally and pharmaco-logically distinct isopeptide predicted by three separate genes. Proc Natl Acad Sci，1989，86:2863～2867
5，冯娟，张德英.脑梗塞患者血浆内皮素和降钙素基因血管肽含量变化及其临床意义.中国医科大学学报，1997，26:596～598
6，Brain S D，Williams T J，Tippins J R，et al.Calcitonin gene-related peptide is a potent vasodilator. Nature，1985，313:54～56
(收稿 1999-09-24), http://www.100md.com