血管内皮生长因子在鼻咽癌中的表达及意义
作者：蒙翠原 邱前辉 林秋雄
单位：广东省人民医院耳鼻咽喉科 510080
关键词：鼻咽肿瘤；血管内皮生长因子；生物学行为
广东医学001114 【摘要】 目的 探讨血管内皮因子(VEGF)与鼻咽癌发生、生长及转移的关系。方法 应用LSAB免疫组织化学技术检测50例鼻咽鳞状上皮癌组织中VEGF的表达。结果 鼻咽鳞状上皮癌组织中VEGF的表达明显高于鼻咽慢性炎症组织组(P<0.05)，在鼻咽癌组织中，Ⅲ，Ⅳ期患者明显高于Ⅰ，Ⅱ期，而有颈部淋巴结转移组又明显高于无颈部淋巴结转移组(P<0.05)。结论 VEGF可作为判断鼻咽癌的发生、转移及预后的临床指标之一。
The biological significance of vascular endothelial growth factor expression in nasopharyngeal carcinoma
, 百拇医药
Meng Cuiyuan, Qiu Qianhui， Lin Qiuxiong.
(Department of Otolaryngology, Guangdong Provincial People's Hospital, Guangzhou 510080)
【Abstract】 Objective To study the relationship between expression vascular endothelial growth factor (VEGF) and occurrence, growth and the metastasis of nasopharyngeal carcinoma (NPC).Methods Immunostaining for VEGF expression was carried out in 50 cases of nasopharyngeal squamous epithelial carcinoma.Results Expression of VEGF was significantly higher in nasopharyngeal squamous epithelial carcinoma than in chronic inflammatory nasopharyngeal tissue (P<0.05). There was also significant difference in VEGF expression between Ⅲ or Ⅳ stage cases and Ⅰ or Ⅱ stage cases (P<0.05). Conclusion Expression of VEGF can be used as an clinical indicator for identifying occurrence and metastasis of NPC as well as for predicting prognosis.
, 百拇医药
【Key words】 Nasopharyneal neoplasms Carcinoma Vascular endothelial growth factor (VEGF)
肿瘤的生长与转移需要血管的形成，而肿瘤血管的形成与转移又依赖多种相关因子的诱导和调节。血管内皮生长因子(VEGF)被认为是促进血管形成的主要因素之一，可促进肿瘤血管生长。我们采用免疫组化方法检测了50例鼻咽癌及20例鼻咽组织慢性炎症患者中VEGF表达情况并就其意义进行了初步讨论。
1 资料与方法
1.1 一般资料 收集1999年10月至2000年1月我院病理科50例鼻咽癌石蜡标本，所有标本均经100 ml/L福尔马林固定，常规石蜡包埋，取4 μm厚的连续切片。全部患者均未接受放疗或化疗，病理均为鳞状细胞癌。其中男32例，女18例；平均年龄47.6岁。临床分期：Ⅰ期11例，Ⅱ期16例，Ⅲ期18例，Ⅳ期5例。有颈部淋巴结转移21例，无颈部淋巴结转移29例。同时选择同期鼻咽活检的20例鼻咽组织慢性炎症患者作对照。
, 百拇医药
1.2 试剂 鼠抗人VEGF由DAKO公司提供。
1.3 LSAB免疫组化染色方法 参照LSAB使用说明书进行。首先石蜡切片脱蜡，将脱蜡切片置于0.01 mol/L柠檬酸盐缓冲液中行微波处理，收复抗原，3%H2O2作用5 min，蒸馏水洗，非免疫性动物血清室温孵育5 min，一抗室温孵育60 min，二抗室温孵育15 min，复合物室温孵育15 min。显色，复染，脱水，封片。抗体工作浓度为1∶50，以PBS代替第一抗体作阴性对照，阳性对照采用已知的阳性切片。
1.4 判断标准 根据阳性细胞的比例判定，5%～50%细胞VEGF阳性染色的定为阳性(+)，阳性细胞比例大于50%定为强阳性(+ +)，少于5%的细胞着色或细胞与背景一致不着色定为阴性(-)。
1.5 统计学处理 采用χ2检验及秩和检验
, 百拇医药
2 结果
2.1 VEGF在鼻咽癌组织和鼻咽慢性炎症组织中的表达 见表1。
表1 VEGF在鼻咽癌组织和鼻咽慢性炎症组织中的表达 例(%) 组别
例数
VEGF阳性
慢性炎症组
20
8(40)
鼻咽癌组
50
48(96)
P值
, http://www.100md.com
<0.05
2.2 VEGF在鼻咽癌不同分期及有无颈淋巴结转移中的表达 我们通过秩和检验分析发现，Ⅲ，Ⅳ期鼻咽癌组织的强阳性率明显高于Ⅰ，Ⅱ期鼻咽癌组织，而有淋巴结转移的鼻咽癌组织的VEGF强阳性率又明显高于未发生转移的鼻咽癌组织。见表2。 表2 VEGF在鼻咽癌不同分期及有无颈淋巴结转移中的表达例 项 目
例数
VEGF表达
P值
(-)
(+)
(++)
临床分期
, 百拇医药 Ⅰ，Ⅱ期
Ⅲ，Ⅳ期
27
23
1
1
24
8
2
14
<0.05
颈淋巴结转移
有
无
, 百拇医药
21
29
1
1
5
26
15
2
<0.05
3 讨论
VEGF是近年来发现的一种多肽类细胞因子，由多种亚型组成，其生物学功能一般认为有两种：第一种VEGF增加血管尤其是微血管的渗透性，使血浆大分子外渗，另一种功能是它能选择性促使血管内皮细胞有丝分裂，刺激内皮细胞增殖并促血管形成[1] 。有文献报道，VEGF在肾癌、膀胱癌、乳腺癌、胃癌、喉癌及卵巢癌等肿瘤中呈高水平表达，并与其临床分期、转移成正相关，与预后成负相关，因而一般认为VEGF有促进肿瘤生长的作用[1～2]。而VEGF促进肿瘤生长的作用机制表现在它的生物学功能上，它使血浆蛋白(主要是纤维蛋白)外渗，沉积在血管外的基质中，为肿瘤细胞的生长和新生毛细血管网的建立提供了最佳基质。而VEGF与其受体结合，刺激血管内皮细胞的增殖，促进血管形成，丰富血管网的建立，又为肿瘤生长提供了充足的养份[1]。
, 百拇医药
我们应用免疫组化方法，对50例鼻咽癌及20例鼻咽慢性炎症组织进行VEGF的检测，并对VEGF在上述两种组织中表达的结果进行分析，同时对鼻咽癌组内有无淋巴结转移以及不同分期进行比较。结果表明，VEGF在鼻咽癌组织中的表达明显高于鼻咽慢性炎症组织(P<0.05)。而在鼻咽癌组织中，有颈部淋巴结转移的VEGF表达率较无颈部淋巴结转移的VEGF表达率明显增高(P<0.05)，Ⅲ，Ⅳ期组又高于Ⅰ，Ⅱ期组。结果提示，VEGF在鼻咽癌的生长、发展及转移过程中起着重要作用。
VEGF与肿瘤关系的研究备受重视，进展迅速。目前体外实验证明了中和VEGF抗体和封闭VEGF受体，对肿瘤细胞生长有明显的抑制作用，这为研究抑肿瘤药物提供了一条新的途径。而富含VEGF的肿瘤患者治疗后较含VEGF少者较早复发的特点，又为临床观察疗效及预测患者预后提供新的指标[3，4]。
参考文献
1，张海鸣.血管内皮细胞生长因子与实体肿瘤.国外医学生理、病理科学与临床分册，1998，18(2)：123
, http://www.100md.com
2，严瑞兰，惠宏襄.血管内皮生长因子在上皮性卵巢癌中的表达.第四军医大学学报，1999，20(4)：291
3，邓志宏，黄维国.血管内皮细胞生长因子及其受体对喉癌细胞生长的影响.临床耳鼻喉科杂志，1998，12(8)：358
4，Toi M, Hoshina S, Takayanagi T, et al. Association of VEGF expression with tumor angiogenesis and with relapse in primary breast cancer. Jpn J Cancer Res, 1994, 85:1045
(收稿日期：2000-06-26), http://www.100md.com
单位：广东省人民医院耳鼻咽喉科 510080
关键词：鼻咽肿瘤；血管内皮生长因子；生物学行为
广东医学001114 【摘要】 目的 探讨血管内皮因子(VEGF)与鼻咽癌发生、生长及转移的关系。方法 应用LSAB免疫组织化学技术检测50例鼻咽鳞状上皮癌组织中VEGF的表达。结果 鼻咽鳞状上皮癌组织中VEGF的表达明显高于鼻咽慢性炎症组织组(P<0.05)，在鼻咽癌组织中，Ⅲ，Ⅳ期患者明显高于Ⅰ，Ⅱ期，而有颈部淋巴结转移组又明显高于无颈部淋巴结转移组(P<0.05)。结论 VEGF可作为判断鼻咽癌的发生、转移及预后的临床指标之一。
The biological significance of vascular endothelial growth factor expression in nasopharyngeal carcinoma
, 百拇医药
Meng Cuiyuan, Qiu Qianhui， Lin Qiuxiong.
(Department of Otolaryngology, Guangdong Provincial People's Hospital, Guangzhou 510080)
【Abstract】 Objective To study the relationship between expression vascular endothelial growth factor (VEGF) and occurrence, growth and the metastasis of nasopharyngeal carcinoma (NPC).Methods Immunostaining for VEGF expression was carried out in 50 cases of nasopharyngeal squamous epithelial carcinoma.Results Expression of VEGF was significantly higher in nasopharyngeal squamous epithelial carcinoma than in chronic inflammatory nasopharyngeal tissue (P<0.05). There was also significant difference in VEGF expression between Ⅲ or Ⅳ stage cases and Ⅰ or Ⅱ stage cases (P<0.05). Conclusion Expression of VEGF can be used as an clinical indicator for identifying occurrence and metastasis of NPC as well as for predicting prognosis.
, 百拇医药
【Key words】 Nasopharyneal neoplasms Carcinoma Vascular endothelial growth factor (VEGF)
肿瘤的生长与转移需要血管的形成，而肿瘤血管的形成与转移又依赖多种相关因子的诱导和调节。血管内皮生长因子(VEGF)被认为是促进血管形成的主要因素之一，可促进肿瘤血管生长。我们采用免疫组化方法检测了50例鼻咽癌及20例鼻咽组织慢性炎症患者中VEGF表达情况并就其意义进行了初步讨论。
1 资料与方法
1.1 一般资料 收集1999年10月至2000年1月我院病理科50例鼻咽癌石蜡标本，所有标本均经100 ml/L福尔马林固定，常规石蜡包埋，取4 μm厚的连续切片。全部患者均未接受放疗或化疗，病理均为鳞状细胞癌。其中男32例，女18例；平均年龄47.6岁。临床分期：Ⅰ期11例，Ⅱ期16例，Ⅲ期18例，Ⅳ期5例。有颈部淋巴结转移21例，无颈部淋巴结转移29例。同时选择同期鼻咽活检的20例鼻咽组织慢性炎症患者作对照。
, 百拇医药
1.2 试剂 鼠抗人VEGF由DAKO公司提供。
1.3 LSAB免疫组化染色方法 参照LSAB使用说明书进行。首先石蜡切片脱蜡，将脱蜡切片置于0.01 mol/L柠檬酸盐缓冲液中行微波处理，收复抗原，3%H2O2作用5 min，蒸馏水洗，非免疫性动物血清室温孵育5 min，一抗室温孵育60 min，二抗室温孵育15 min，复合物室温孵育15 min。显色，复染，脱水，封片。抗体工作浓度为1∶50，以PBS代替第一抗体作阴性对照，阳性对照采用已知的阳性切片。
1.4 判断标准 根据阳性细胞的比例判定，5%～50%细胞VEGF阳性染色的定为阳性(+)，阳性细胞比例大于50%定为强阳性(+ +)，少于5%的细胞着色或细胞与背景一致不着色定为阴性(-)。
1.5 统计学处理 采用χ2检验及秩和检验
, 百拇医药
2 结果
2.1 VEGF在鼻咽癌组织和鼻咽慢性炎症组织中的表达 见表1。
表1 VEGF在鼻咽癌组织和鼻咽慢性炎症组织中的表达 例(%) 组别
例数
VEGF阳性
慢性炎症组
20
8(40)
鼻咽癌组
50
48(96)
P值
, http://www.100md.com
<0.05
2.2 VEGF在鼻咽癌不同分期及有无颈淋巴结转移中的表达 我们通过秩和检验分析发现，Ⅲ，Ⅳ期鼻咽癌组织的强阳性率明显高于Ⅰ，Ⅱ期鼻咽癌组织，而有淋巴结转移的鼻咽癌组织的VEGF强阳性率又明显高于未发生转移的鼻咽癌组织。见表2。 表2 VEGF在鼻咽癌不同分期及有无颈淋巴结转移中的表达例 项 目
例数
VEGF表达
P值
(-)
(+)
(++)
临床分期
, 百拇医药 Ⅰ，Ⅱ期
Ⅲ，Ⅳ期
27
23
1
1
24
8
2
14
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颈淋巴结转移
有
无
, 百拇医药
21
29
1
1
5
26
15
2
<0.05
3 讨论
VEGF是近年来发现的一种多肽类细胞因子，由多种亚型组成，其生物学功能一般认为有两种：第一种VEGF增加血管尤其是微血管的渗透性，使血浆大分子外渗，另一种功能是它能选择性促使血管内皮细胞有丝分裂，刺激内皮细胞增殖并促血管形成[1] 。有文献报道，VEGF在肾癌、膀胱癌、乳腺癌、胃癌、喉癌及卵巢癌等肿瘤中呈高水平表达，并与其临床分期、转移成正相关，与预后成负相关，因而一般认为VEGF有促进肿瘤生长的作用[1～2]。而VEGF促进肿瘤生长的作用机制表现在它的生物学功能上，它使血浆蛋白(主要是纤维蛋白)外渗，沉积在血管外的基质中，为肿瘤细胞的生长和新生毛细血管网的建立提供了最佳基质。而VEGF与其受体结合，刺激血管内皮细胞的增殖，促进血管形成，丰富血管网的建立，又为肿瘤生长提供了充足的养份[1]。
, 百拇医药
我们应用免疫组化方法，对50例鼻咽癌及20例鼻咽慢性炎症组织进行VEGF的检测，并对VEGF在上述两种组织中表达的结果进行分析，同时对鼻咽癌组内有无淋巴结转移以及不同分期进行比较。结果表明，VEGF在鼻咽癌组织中的表达明显高于鼻咽慢性炎症组织(P<0.05)。而在鼻咽癌组织中，有颈部淋巴结转移的VEGF表达率较无颈部淋巴结转移的VEGF表达率明显增高(P<0.05)，Ⅲ，Ⅳ期组又高于Ⅰ，Ⅱ期组。结果提示，VEGF在鼻咽癌的生长、发展及转移过程中起着重要作用。
VEGF与肿瘤关系的研究备受重视，进展迅速。目前体外实验证明了中和VEGF抗体和封闭VEGF受体，对肿瘤细胞生长有明显的抑制作用，这为研究抑肿瘤药物提供了一条新的途径。而富含VEGF的肿瘤患者治疗后较含VEGF少者较早复发的特点，又为临床观察疗效及预测患者预后提供新的指标[3，4]。
参考文献
1，张海鸣.血管内皮细胞生长因子与实体肿瘤.国外医学生理、病理科学与临床分册，1998，18(2)：123
, http://www.100md.com
2，严瑞兰，惠宏襄.血管内皮生长因子在上皮性卵巢癌中的表达.第四军医大学学报，1999，20(4)：291
3，邓志宏，黄维国.血管内皮细胞生长因子及其受体对喉癌细胞生长的影响.临床耳鼻喉科杂志，1998，12(8)：358
4，Toi M, Hoshina S, Takayanagi T, et al. Association of VEGF expression with tumor angiogenesis and with relapse in primary breast cancer. Jpn J Cancer Res, 1994, 85:1045
(收稿日期：2000-06-26), http://www.100md.com