脑梗死患者血清神经元烯醇化酶测定的临床价值
苏州大学附属第一医院神经内科；苏州；215006 周刚；许丽珍；王稚
关键词：脑梗死；神经元烯醇化酶；预后
摘要：目的:探讨脑梗死患者血清神经元烯醇化酶(NSE)与脑梗死灶大小和临床预后的关系。方法:采用酶联免疫吸附法对39例脑梗死患者起病第1、3、7天血清NSE水平进行了动态测定。结果:脑梗死患者血清NSE浓度在起病第1、3天显著高于对照组(P<0.01＝，第3天达峰值，峰值浓度与梗死灶大小及临床预后有显著相关性。结论:血清NSE水平测定对判断脑梗死病变的严重程度、估价预后有重要参考价值。
神经元烯醇化酶(NSE)主要存在于大脑神经元和神经内分泌细胞胞浆内，其它组织含量甚微，在多种中枢神经系统疾病，如脑外伤、脑肿瘤中都曾发现脑脊液中NSE浓度升高，并同脑损伤关系密切。从临床角度来看，测定外周血中NSE浓度较测定脑脊液中NSE浓度具有操作简便、无并发症、可多次多时间段进行等优点。我们动态测定了39例脑梗死患者血清NSE水平，以探讨它与脑梗死患者神经元损伤程度及预后的关系，结果报道如下。
, http://www.100md.com
1 资料与方法
1.1 观察对象 脑梗死组39例，均为起病后24h内入院的我科住院患者。男22例，女17例。年龄36～90岁，平均62.74±12.85岁。诊断符合第4届全国脑血管会议制定的标准，并经头颅CT证实。脑梗死灶体积按Pullicino公式[1]计算，根据计算结果分为大梗死灶组(>10cm3)11例，中梗死灶组(4～10cm3)8例，小梗死灶组(<4cm3)12例。所有患者均在起病后3个月进行Barthel指数评分，以判断急性期预后。对照组27人，男16人，女11人。年龄45～75岁，平均62.21±9.85岁。均为我院门诊健康体检者。
1.2 方法
1.2.1 标本采集 脑梗死组均在起病第1、3、7天分别抽取空腹血4ml置-37℃冰箱，对照组只取1次血，方法同上。
1.2.2 NSE含量测定 采用酶联免疫吸附法，NSE-ELISA试剂盒由北京军事医学科学院提供。严格按操作说明书进行检测，具体步骤如下：将丹麦产酶联板洗涤3次，甩干，在板内NSE孔加入含NSE的标准物100μl，标准孔内分别加入含NSE2.5、5、10、20和50μg/L的标准品100μl，样品孔内加入样品血清及样品稀释液各50μl，混匀后于37℃孵育30min，洗板3次，甩干，每孔加酶标抗体100μl，37℃孵育30min，洗板5次，甩干。每孔加OPP液100μl，室温显色10～15min，依序每孔加入4mmol/L H2SO4液50μl终止反应。用酶联免疫检测仪测各孔吸光度，根据标准曲线换算成实际浓度。
, 百拇医药
1.2.3 统计方法 组间差别采用t检验和方差分析，变量间的分析采用spearman相关分析。
1.3 结果
1.3.1 NSE动态变化 脑梗死组血清平均浓度在起病第1天为8.95±2.13μg/L，第3天达峰值为13.06±6.53μg/L，第7天为9.26±5.29μg/L。起病第1、3天NSE浓度较对照组(7.64±1.49μg/L)显著升高(P<0.01)。
1.3.2 NSE与脑梗死灶大小的关系 脑梗死组血清NSE浓度与梗死灶大小的关系见附表。起病第3天血清NSE浓度在各组间有显著差异(P<0.05)。经spearman相关分析，NSE峰值与梗死灶大小呈正相关(r=0.476,P<0.05)，而与出院时BI评分呈负相关(r=0.523,P<0.05)。
附表 脑梗死患者血清NSE浓度与梗死灶大小的
, http://www.100md.com
关系(x±s)
组别 n NSE(μg/L)
第1天 第3天 第7天
大梗死 14 9.01±1.95 17.31±7.85* 11.38±8.22
中梗死 10 9.15±2.34 11.54±4.17* 8.25±2.74
小梗死 15 8.75±2.37 10.12±4.04* 7.98±1.77
*3组间比较，P<0.05
2 讨论
烯醇化酶是糖酵解途径中的关键酶，普遍存在于生物体内的糖酵解代谢中。烯醇化酶由免疫性质不同的α、β和γ 3种亚基组成，其中γ型同功酶特异地存在于神经元和神经内分泌细胞的胞浆内，称NSE。占脑全部可溶性蛋白的1.5%，比例很高，周围神经中含量远低于脑。当脑损伤时，细胞膜完整性被破坏，由于NSE不与细胞内肌动蛋白结合，故最易从细胞内释放出来，并迅速进入细胞间隙，进而释放入脑脊液或通过血脑屏障进入外周血[2，3]。文献报道，脑梗死患者脑脊液中NSE水平升高，并与梗死灶大小密切相关[4]，认为是反映脑损伤程度的较为灵敏的指标。但抽取脑脊液有一定的损伤，可出现并发症，颅内压增高较明显时有导致脑疝的危险，患者难以接受。而测定血清中NSE水平则无上述缺点。本研究显示，脑梗死患者起病第1天血清NSE水平即显著高于对照组，第3天达峰值，这与Cunningham等[5，6]的结果一致。由于血细胞内NSE含量远低于脑，故起病第1天血清NSE水平升高反映了神经元的原发性损伤。起病第3天血清NSE浓度达峰值，这与脑梗死后脑水肿出现的时间一致，故可能反映了脑水肿或颅内压增高所致的继发性神经元损伤。如在此前给予脱水治疗，则有可能避免脑水肿-颅内压增高-脑水肿的恶性循环，减轻神经元继发性损伤。本研究还提示，血清NSE峰值与梗死灶大小呈正相关，而与BI分值呈负相关，表明血清NSE水平是反映脑损伤程度及估计预后的指标之一。另外，在脑梗死急性期，头颅影像学检查不能区分脑梗死是否可逆，临床神经功能检查也不能判断神经症状持续的时间，故检测血清NSE水平对于监测脑梗死的病情变化及指导临床治疗有重要意义。
, 百拇医药
周刚：硕士研究生；许丽珍：导师
周刚(苏州大学附属第一医院神经内科，苏州，215006)
许丽珍(苏州大学附属第一医院神经内科，苏州，215006)
王稚(苏州大学附属第一医院神经内科，苏州，215006)
参考文献
1，Pullicno P.Small deep infarcts dignosed on computed tomography.Neurology,1980,30∶1890～1891
2，Hatfield RH,Mckernan RM.CSF neurone specific enolase,a clinivally useful marker for neuron damage in a rat stoke model.Brain Res,1992,577∶249～252
, http://www.100md.com
3，Schaarschmidt H,Prange HW,Reiber H,et al.Neurone specific enolase concentrations in blood as a prognostic parameter in cerebrovascular disesse.Stroke,1994,25∶558～565
4，Marangos PJ,Schmechel DE.Neuro-specific enolase,a clinically useful marker for neurons and neuroendocrine cells.Ann Rev Neurosci,1987,10∶269～295
5，Butterwarth RJ,Wassif WS,Sherwood RA,et al.Serum neuron-specific enolase,carnosinase,and their ratio in acute stoke.Stoke,1996,27∶2064～2068
6，Cunningham KT,Youngs IS,Winder J,et al.Serum neurone specific with cerebral infarction.Eur J Clin Invest,1991,21∶497～500, http://www.100md.com
关键词：脑梗死；神经元烯醇化酶；预后
摘要：目的:探讨脑梗死患者血清神经元烯醇化酶(NSE)与脑梗死灶大小和临床预后的关系。方法:采用酶联免疫吸附法对39例脑梗死患者起病第1、3、7天血清NSE水平进行了动态测定。结果:脑梗死患者血清NSE浓度在起病第1、3天显著高于对照组(P<0.01＝，第3天达峰值，峰值浓度与梗死灶大小及临床预后有显著相关性。结论:血清NSE水平测定对判断脑梗死病变的严重程度、估价预后有重要参考价值。
神经元烯醇化酶(NSE)主要存在于大脑神经元和神经内分泌细胞胞浆内，其它组织含量甚微，在多种中枢神经系统疾病，如脑外伤、脑肿瘤中都曾发现脑脊液中NSE浓度升高，并同脑损伤关系密切。从临床角度来看，测定外周血中NSE浓度较测定脑脊液中NSE浓度具有操作简便、无并发症、可多次多时间段进行等优点。我们动态测定了39例脑梗死患者血清NSE水平，以探讨它与脑梗死患者神经元损伤程度及预后的关系，结果报道如下。
, http://www.100md.com
1 资料与方法
1.1 观察对象 脑梗死组39例，均为起病后24h内入院的我科住院患者。男22例，女17例。年龄36～90岁，平均62.74±12.85岁。诊断符合第4届全国脑血管会议制定的标准，并经头颅CT证实。脑梗死灶体积按Pullicino公式[1]计算，根据计算结果分为大梗死灶组(>10cm3)11例，中梗死灶组(4～10cm3)8例，小梗死灶组(<4cm3)12例。所有患者均在起病后3个月进行Barthel指数评分，以判断急性期预后。对照组27人，男16人，女11人。年龄45～75岁，平均62.21±9.85岁。均为我院门诊健康体检者。
1.2 方法
1.2.1 标本采集 脑梗死组均在起病第1、3、7天分别抽取空腹血4ml置-37℃冰箱，对照组只取1次血，方法同上。
1.2.2 NSE含量测定 采用酶联免疫吸附法，NSE-ELISA试剂盒由北京军事医学科学院提供。严格按操作说明书进行检测，具体步骤如下：将丹麦产酶联板洗涤3次，甩干，在板内NSE孔加入含NSE的标准物100μl，标准孔内分别加入含NSE2.5、5、10、20和50μg/L的标准品100μl，样品孔内加入样品血清及样品稀释液各50μl，混匀后于37℃孵育30min，洗板3次，甩干，每孔加酶标抗体100μl，37℃孵育30min，洗板5次，甩干。每孔加OPP液100μl，室温显色10～15min，依序每孔加入4mmol/L H2SO4液50μl终止反应。用酶联免疫检测仪测各孔吸光度，根据标准曲线换算成实际浓度。
, 百拇医药
1.2.3 统计方法 组间差别采用t检验和方差分析，变量间的分析采用spearman相关分析。
1.3 结果
1.3.1 NSE动态变化 脑梗死组血清平均浓度在起病第1天为8.95±2.13μg/L，第3天达峰值为13.06±6.53μg/L，第7天为9.26±5.29μg/L。起病第1、3天NSE浓度较对照组(7.64±1.49μg/L)显著升高(P<0.01)。
1.3.2 NSE与脑梗死灶大小的关系 脑梗死组血清NSE浓度与梗死灶大小的关系见附表。起病第3天血清NSE浓度在各组间有显著差异(P<0.05)。经spearman相关分析，NSE峰值与梗死灶大小呈正相关(r=0.476,P<0.05)，而与出院时BI评分呈负相关(r=0.523,P<0.05)。
附表 脑梗死患者血清NSE浓度与梗死灶大小的
, http://www.100md.com
关系(x±s)
组别 n NSE(μg/L)
第1天 第3天 第7天
大梗死 14 9.01±1.95 17.31±7.85* 11.38±8.22
中梗死 10 9.15±2.34 11.54±4.17* 8.25±2.74
小梗死 15 8.75±2.37 10.12±4.04* 7.98±1.77
*3组间比较，P<0.05
2 讨论
烯醇化酶是糖酵解途径中的关键酶，普遍存在于生物体内的糖酵解代谢中。烯醇化酶由免疫性质不同的α、β和γ 3种亚基组成，其中γ型同功酶特异地存在于神经元和神经内分泌细胞的胞浆内，称NSE。占脑全部可溶性蛋白的1.5%，比例很高，周围神经中含量远低于脑。当脑损伤时，细胞膜完整性被破坏，由于NSE不与细胞内肌动蛋白结合，故最易从细胞内释放出来，并迅速进入细胞间隙，进而释放入脑脊液或通过血脑屏障进入外周血[2，3]。文献报道，脑梗死患者脑脊液中NSE水平升高，并与梗死灶大小密切相关[4]，认为是反映脑损伤程度的较为灵敏的指标。但抽取脑脊液有一定的损伤，可出现并发症，颅内压增高较明显时有导致脑疝的危险，患者难以接受。而测定血清中NSE水平则无上述缺点。本研究显示，脑梗死患者起病第1天血清NSE水平即显著高于对照组，第3天达峰值，这与Cunningham等[5，6]的结果一致。由于血细胞内NSE含量远低于脑，故起病第1天血清NSE水平升高反映了神经元的原发性损伤。起病第3天血清NSE浓度达峰值，这与脑梗死后脑水肿出现的时间一致，故可能反映了脑水肿或颅内压增高所致的继发性神经元损伤。如在此前给予脱水治疗，则有可能避免脑水肿-颅内压增高-脑水肿的恶性循环，减轻神经元继发性损伤。本研究还提示，血清NSE峰值与梗死灶大小呈正相关，而与BI分值呈负相关，表明血清NSE水平是反映脑损伤程度及估计预后的指标之一。另外，在脑梗死急性期，头颅影像学检查不能区分脑梗死是否可逆，临床神经功能检查也不能判断神经症状持续的时间，故检测血清NSE水平对于监测脑梗死的病情变化及指导临床治疗有重要意义。
, 百拇医药
周刚：硕士研究生；许丽珍：导师
周刚(苏州大学附属第一医院神经内科，苏州，215006)
许丽珍(苏州大学附属第一医院神经内科，苏州，215006)
王稚(苏州大学附属第一医院神经内科，苏州，215006)
参考文献
1，Pullicno P.Small deep infarcts dignosed on computed tomography.Neurology,1980,30∶1890～1891
2，Hatfield RH,Mckernan RM.CSF neurone specific enolase,a clinivally useful marker for neuron damage in a rat stoke model.Brain Res,1992,577∶249～252
, http://www.100md.com
3，Schaarschmidt H,Prange HW,Reiber H,et al.Neurone specific enolase concentrations in blood as a prognostic parameter in cerebrovascular disesse.Stroke,1994,25∶558～565
4，Marangos PJ,Schmechel DE.Neuro-specific enolase,a clinically useful marker for neurons and neuroendocrine cells.Ann Rev Neurosci,1987,10∶269～295
5，Butterwarth RJ,Wassif WS,Sherwood RA,et al.Serum neuron-specific enolase,carnosinase,and their ratio in acute stoke.Stoke,1996,27∶2064～2068
6，Cunningham KT,Youngs IS,Winder J,et al.Serum neurone specific with cerebral infarction.Eur J Clin Invest,1991,21∶497～500, http://www.100md.com