多瘤病毒MT基因真核表达载体的构建
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武汉大学口腔医学院;湖北武汉430070 何三纲;赵怡芳;贾俊
参见附件(31kb)。
武汉大学口腔医学院;湖北武汉430070 何三纲;赵怡芳;贾俊
关键词:多瘤病毒MT基因;真核表达;血管瘤
摘要:目的 :构建携带多瘤病毒MT癌基因的真核细胞表达载体。方法 :从野生型多瘤病毒上取其nt46 32至nt15 6 0片段克隆到pUC19上 ,再将该片段定点插入 pEGFP1的HindⅢ和EcoRI位点间 ,构建携带多瘤病毒MT癌基因的真核表达载体 pPyMT GFP。经线性化 ,将重组体导入鼠皮肤成纤维细胞中 ,G418选择培养 ,得到抗性细胞克隆。结果 :构建的pPyMT GFP质粒在鼠成纤维细胞中有稳定表达。 结论 :来源于野生型多瘤病毒的PyMT基因在哺乳动物细胞中有稳定表达 ,其真核表达载体 pPyMT GFP可被进一步用于研究PyMT蛋白在血管瘤发生中的作用。
武汉大学口腔医学院;湖北武汉430070 何三纲;赵怡芳;贾俊
关键词:多瘤病毒MT基因;真核表达;血管瘤
摘要:目的 :构建携带多瘤病毒MT癌基因的真核细胞表达载体。方法 :从野生型多瘤病毒上取其nt46 32至nt15 6 0片段克隆到pUC19上 ,再将该片段定点插入 pEGFP1的HindⅢ和EcoRI位点间 ,构建携带多瘤病毒MT癌基因的真核表达载体 pPyMT GFP。经线性化 ,将重组体导入鼠皮肤成纤维细胞中 ,G418选择培养 ,得到抗性细胞克隆。结果 :构建的pPyMT GFP质粒在鼠成纤维细胞中有稳定表达。 结论 :来源于野生型多瘤病毒的PyMT基因在哺乳动物细胞中有稳定表达 ,其真核表达载体 pPyMT GFP可被进一步用于研究PyMT蛋白在血管瘤发生中的作用。
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