胰岛素受体底物-1基因5′-调控序列CAG富含区碱基缺失/插入的研究
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中南大学湘雅医学院生化教研室；长沙410078 黄建军；宋惠萍
基因|胰岛素受体底物-1|CAG富含区|等位基因|插入|缺失|2型糖尿病
参见附件(60kb)。
中南大学湘雅医学院生化教研室；长沙410078 黄建军；宋惠萍
关键词：基因；胰岛素受体底物-1；CAG富含区；等位基因；插入；缺失；2型糖尿病
摘要：研究胰岛素受体底物 1(IRS 1)基因5′ 调控序列与2型糖尿病的关系。采用PCR SSCP技术扫描76例2型糖尿病患者和78例正常对照IRS 1基因5′ 调控区,结合应用PCR 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染法,检测IRS 1基因5′ 调控序列CAG富含区的插入/缺失多态性;以检获的正常和变异样品基因组DNA为摸板,用高保真pfuDNApokymerase进行扩增,采用亚克隆技术,将扩增片段分别插入pCATBasic质粒中。通过限制性内切酶酶切并结合变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染分析后,根据迁移率不同筛选含有不同等位基因的重组质粒并进行测序。结果发现人IRS 1基因5′ 调控区CAG富含区存在以三核苷酸为单位的多种插入/缺失变异。共检测出7种基因型和6种等位基因(T1～T6),其中等位基因T5,T6仅见于2型糖尿病组。
中南大学湘雅医学院生化教研室；长沙410078 黄建军；宋惠萍
关键词：基因；胰岛素受体底物-1；CAG富含区；等位基因；插入；缺失；2型糖尿病
摘要：研究胰岛素受体底物 1(IRS 1)基因5′ 调控序列与2型糖尿病的关系。采用PCR SSCP技术扫描76例2型糖尿病患者和78例正常对照IRS 1基因5′ 调控区,结合应用PCR 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染法,检测IRS 1基因5′ 调控序列CAG富含区的插入/缺失多态性;以检获的正常和变异样品基因组DNA为摸板,用高保真pfuDNApokymerase进行扩增,采用亚克隆技术,将扩增片段分别插入pCATBasic质粒中。通过限制性内切酶酶切并结合变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染分析后,根据迁移率不同筛选含有不同等位基因的重组质粒并进行测序。结果发现人IRS 1基因5′ 调控区CAG富含区存在以三核苷酸为单位的多种插入/缺失变异。共检测出7种基因型和6种等位基因(T1～T6),其中等位基因T5,T6仅见于2型糖尿病组。
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