以GFP为报告基因优化CNE-2Z细胞脂质体转染条件的实验研究
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广东医学院生物化学与分子生物学研究所；广东湛江524023 陈扬超；张月飞；周克元；凌光鑫
绿色荧光蛋白|报告基因|优化|脂质体转染
参见附件(52kb)。
广东医学院生物化学与分子生物学研究所；广东湛江524023 陈扬超；张月飞；周克元；凌光鑫
关键词：绿色荧光蛋白；报告基因；优化；脂质体转染
摘要：目的 :为在脂质体介导基因转染人低分化鼻咽癌上皮细胞株 CNE- 2 Z时获得较高转染效率 ,同时观察 GFP作为报告基因用于脂质体转染条件优化的可行性。方法 :以 GFP为报告基因 ,通过比较碱裂解法与 PEG纯化法制备质粒 ;改变 DNA、脂质体量及转染时间 ,在荧光显微镜下观察并计算转染效率。结果 :在 35 mm培养皿中 ,2 μ g DNA与 4μ L脂质体转染 CNE- 2 Z细胞 8h,转染效率最高 ,且在显微镜下观察不到细胞的形态变化。结论 :在 35 mm培养皿中 ,2μ g DNA与 4μ L 脂质体转染 CNE- 2 Z细胞 8h,可获得最佳转染效率 ,GFP可作为报告基因优化脂质体转染条件。
广东医学院生物化学与分子生物学研究所；广东湛江524023 陈扬超；张月飞；周克元；凌光鑫
关键词：绿色荧光蛋白；报告基因；优化；脂质体转染
摘要：目的 :为在脂质体介导基因转染人低分化鼻咽癌上皮细胞株 CNE- 2 Z时获得较高转染效率 ,同时观察 GFP作为报告基因用于脂质体转染条件优化的可行性。方法 :以 GFP为报告基因 ,通过比较碱裂解法与 PEG纯化法制备质粒 ;改变 DNA、脂质体量及转染时间 ,在荧光显微镜下观察并计算转染效率。结果 :在 35 mm培养皿中 ,2 μ g DNA与 4μ L脂质体转染 CNE- 2 Z细胞 8h,转染效率最高 ,且在显微镜下观察不到细胞的形态变化。结论 :在 35 mm培养皿中 ,2μ g DNA与 4μ L 脂质体转染 CNE- 2 Z细胞 8h,可获得最佳转染效率 ,GFP可作为报告基因优化脂质体转染条件。
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