宋内志贺氏菌I相大质粒的定向改造和诱动转移
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北京生物工程研究所；北京100071 冯尔玲；王恒樑；林云；廖翔；苏国富
参见附件(55kb)。
北京生物工程研究所；北京100071 冯尔玲；王恒樑；林云；廖翔；苏国富
关键词：志贺氏菌；I相大质粒；诱动转移
摘要：本文通过全细胞PCR克隆了宋内志贺氏菌侵袭性I相大质粒上的virG基因的部分片段 (virG ) ,并用天冬氨酸半醛脱氢酶基因 (asd)取代了virG 的中间部分 ,随之插入自杀性诱动质粒pXL2 75中 ,获得重组质粒pKNVA1。通过细菌间交配和体内同源重组 ,pKNVA1整合至I相大质粒中 ,在另一温度敏感的结合转移质粒pTH10的帮助下 ,共整合质粒被诱动转移至福氏志贺氏菌FWL0 1和大肠杆菌X6 0 97中 ,并通过氯霉素富集和蔗糖反选择使自杀质粒pKNVA1从大质粒上脱落下来 ,玻片凝集试验和大质粒电泳图谱证实了宋内I相大质粒的成功诱动转移 ,表明这是一种定向转移大质粒行之有效。
北京生物工程研究所；北京100071 冯尔玲；王恒樑；林云；廖翔；苏国富
关键词：志贺氏菌；I相大质粒；诱动转移
摘要：本文通过全细胞PCR克隆了宋内志贺氏菌侵袭性I相大质粒上的virG基因的部分片段 (virG ) ,并用天冬氨酸半醛脱氢酶基因 (asd)取代了virG 的中间部分 ,随之插入自杀性诱动质粒pXL2 75中 ,获得重组质粒pKNVA1。通过细菌间交配和体内同源重组 ,pKNVA1整合至I相大质粒中 ,在另一温度敏感的结合转移质粒pTH10的帮助下 ,共整合质粒被诱动转移至福氏志贺氏菌FWL0 1和大肠杆菌X6 0 97中 ,并通过氯霉素富集和蔗糖反选择使自杀质粒pKNVA1从大质粒上脱落下来 ,玻片凝集试验和大质粒电泳图谱证实了宋内I相大质粒的成功诱动转移 ,表明这是一种定向转移大质粒行之有效。
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