小鼠白细胞介素12基因的钓取及其在COS-7细胞中的表达
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吉林大学卫生部放射生物学重点实验室;吉林长春130021 杨英;刘晓冬;刘树铮
白细胞介素12|RT-PCR|COS-7细胞转染|pNG-mIL-12
参见附件(52kb)。
吉林大学卫生部放射生物学重点实验室;吉林长春130021 杨英;刘晓冬;刘树铮
关键词:白细胞介素12;RT-PCR;COS-7细胞转染;pNG-mIL-12
摘要:目的 :钓取小鼠白细胞介素 12 (m IL- 12 ) p4 0和 p35c DNA并检测其在哺乳动物细胞 (COS- 7)中的表达。方法 :RT- PCR法从小鼠腹腔巨噬细胞 m RNA中扩增 p4 0和 p35亚基 ;脂质体Lipofect AMINE将质粒 p NG- m IL- 12转染至 COS- 7细胞 ,ELISA法检测不同时间 m IL- 12表达水平。结果 :1RT- PCR法扩增出特异的 p4 0和 p35亚基 ,p35亚基克隆至 p KS载体测序 ;2 EL ISA法检测转染 p NG- m IL- 12的 COS- 7细胞上清有 m IL- 12分泌。结论 :为进一步研究 m IL- 12的免疫调节机制及其抑瘤作用奠定了基础。
吉林大学卫生部放射生物学重点实验室;吉林长春130021 杨英;刘晓冬;刘树铮
关键词:白细胞介素12;RT-PCR;COS-7细胞转染;pNG-mIL-12
摘要:目的 :钓取小鼠白细胞介素 12 (m IL- 12 ) p4 0和 p35c DNA并检测其在哺乳动物细胞 (COS- 7)中的表达。方法 :RT- PCR法从小鼠腹腔巨噬细胞 m RNA中扩增 p4 0和 p35亚基 ;脂质体Lipofect AMINE将质粒 p NG- m IL- 12转染至 COS- 7细胞 ,ELISA法检测不同时间 m IL- 12表达水平。结果 :1RT- PCR法扩增出特异的 p4 0和 p35亚基 ,p35亚基克隆至 p KS载体测序 ;2 EL ISA法检测转染 p NG- m IL- 12的 COS- 7细胞上清有 m IL- 12分泌。结论 :为进一步研究 m IL- 12的免疫调节机制及其抑瘤作用奠定了基础。
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