人CD7胞外区基因在大肠杆菌中的表达
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重庆第三军医大学免疫学教研室;重庆400038 周艳春;朱锡华;黄云辉
参见附件。
重庆第三军医大学免疫学教研室;重庆400038 周艳春;朱锡华;黄云辉
关键词:CD7;融合蛋白;大肠杆菌表达
摘要:目的在大肠杆菌中表达人白细胞分化抗原 CD7胞外区蛋白。方法采用 PCR技术调整 CD7基因的阅读框架 ,使之与生物素化蛋白基因阅读框架一致 ,缺失了 CD7c DNA基因的起始密码子并增加一个大肠杆菌偏性终止密码子 ,构建CD7胞外区 c DNA和生物素化蛋白基因融合的原核表达质粒 Pin Pointxa3- CD7。将重组质粒转入大肠杆菌 DH5 α表达 ,SDS-PAGE及 Western blotting鉴定结果。结果融合蛋白的分子量约为 30 0 0 0 u,Western blotting结果表明 :表达的蛋白质可被抗CD7的单克隆抗体识别。结论为研制抗 CD7基因工程抗体奠定了基础。
重庆第三军医大学免疫学教研室;重庆400038 周艳春;朱锡华;黄云辉
关键词:CD7;融合蛋白;大肠杆菌表达
摘要:目的在大肠杆菌中表达人白细胞分化抗原 CD7胞外区蛋白。方法采用 PCR技术调整 CD7基因的阅读框架 ,使之与生物素化蛋白基因阅读框架一致 ,缺失了 CD7c DNA基因的起始密码子并增加一个大肠杆菌偏性终止密码子 ,构建CD7胞外区 c DNA和生物素化蛋白基因融合的原核表达质粒 Pin Pointxa3- CD7。将重组质粒转入大肠杆菌 DH5 α表达 ,SDS-PAGE及 Western blotting鉴定结果。结果融合蛋白的分子量约为 30 0 0 0 u,Western blotting结果表明 :表达的蛋白质可被抗CD7的单克隆抗体识别。结论为研制抗 CD7基因工程抗体奠定了基础。
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