弓形虫表面抗原 P22编码基因片段的亚克隆与表达
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广东省妇幼保健医院；深圳市卫生防疫站 广东深圳518020 高世同；吴少庭；林敏；梁驹卿；占国清
弓形虫|P22表面抗原|基因克隆|表达,弓形虫表面抗原P22编码基因片段的亚克隆与表达
参见附件(99kb)。
广东省妇幼保健医院；深圳市卫生防疫站 广东深圳518020 高世同；吴少庭；林敏；梁驹卿；占国清
关键词：弓形虫；P22表面抗原；基因克隆；表达
摘要：目的 亚克隆弓形虫 RH株表面抗原 P2 2编码基因 ,构建表达质粒 p BK/ P2 2 ,并对其在大肠杆菌 (E.coli)中的表达作初步研究。 方法 以限制性内切酶 Bam H 和 Kpn 双酶切质粒 p BCG5 .6 / P2 2 ,获得弓形虫表面抗原 P2 2编码基因目的片段 ,在以低熔点琼脂糖回收纯化后 ,插入表达质粒载体 p BK- CMV的多克隆位点 ,构建重组体 p BK/ P2 2 ,并转化大肠杆菌 DH5 α,快速酚法初筛阳性重组子 ,阳性克隆以 PCR法与限制性酶切分析鉴定后 ,以 IPTG进行诱导在 E.coli DH5 α中表达 ,表达产物以 SDS- PAGE与免疫印迹分析。 结果 双酶切质粒 p BCG5 .6 / P2 2 ,
广东省妇幼保健医院；深圳市卫生防疫站 广东深圳518020 高世同；吴少庭；林敏；梁驹卿；占国清
关键词：弓形虫；P22表面抗原；基因克隆；表达
摘要：目的 亚克隆弓形虫 RH株表面抗原 P2 2编码基因 ,构建表达质粒 p BK/ P2 2 ,并对其在大肠杆菌 (E.coli)中的表达作初步研究。 方法 以限制性内切酶 Bam H 和 Kpn 双酶切质粒 p BCG5 .6 / P2 2 ,获得弓形虫表面抗原 P2 2编码基因目的片段 ,在以低熔点琼脂糖回收纯化后 ,插入表达质粒载体 p BK- CMV的多克隆位点 ,构建重组体 p BK/ P2 2 ,并转化大肠杆菌 DH5 α,快速酚法初筛阳性重组子 ,阳性克隆以 PCR法与限制性酶切分析鉴定后 ,以 IPTG进行诱导在 E.coli DH5 α中表达 ,表达产物以 SDS- PAGE与免疫印迹分析。 结果 双酶切质粒 p BCG5 .6 / P2 2 ,
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