定点突变的人胰岛素原基因在体细胞中的表达
http://www.100md.com
复旦大学附属中山医院普外科；国家人类基因组南方中心 200032上海 沈坤堂；秦新裕；肖华胜；张新；许相儒；
人胰岛素原基因|Ⅰ型糖尿病|基因治疗|胰岛
参见附件(119kb)。
复旦大学附属中山医院普外科；国家人类基因组南方中心 200032上海 沈坤堂；秦新裕；肖华胜；张新；许相儒；韩泽广
关键词：人胰岛素原基因；Ⅰ型糖尿病；基因治疗；胰岛
摘要：目的 研究在非β细胞中表达成熟胰岛素 ,探讨替代胰岛素注射或胰岛移植治疗Ⅰ型糖尿病的方法。方法 采用重叠区扩增基因拼接法 (geneSOEing)自胰岛素原基因组基因中扩增胰岛素原的cDNA ,并于C肽的两端引入蛋白酶furin的识别和切割位点Arg Xaa Lys/Arg Arg ,将获得的突变体重组表达载体 pcDNA3 .1 /C .mINS通过脂质体法转染体外培养的Hela、2 93和L0 2细胞 ,转染后 48、72h取细胞培养液 ;并将L0 2细胞经G41 8(450mg/L)筛选 2个月后 ,得到稳定表达胰岛素的细胞株 ,同时用放射免疫和免疫组织化学的方法监测细胞内外胰岛素的表达水平。结果 成功地对胰岛...
复旦大学附属中山医院普外科；国家人类基因组南方中心 200032上海 沈坤堂；秦新裕；肖华胜；张新；许相儒；韩泽广
关键词：人胰岛素原基因；Ⅰ型糖尿病；基因治疗；胰岛
摘要：目的 研究在非β细胞中表达成熟胰岛素 ,探讨替代胰岛素注射或胰岛移植治疗Ⅰ型糖尿病的方法。方法 采用重叠区扩增基因拼接法 (geneSOEing)自胰岛素原基因组基因中扩增胰岛素原的cDNA ,并于C肽的两端引入蛋白酶furin的识别和切割位点Arg Xaa Lys/Arg Arg ,将获得的突变体重组表达载体 pcDNA3 .1 /C .mINS通过脂质体法转染体外培养的Hela、2 93和L0 2细胞 ,转染后 48、72h取细胞培养液 ;并将L0 2细胞经G41 8(450mg/L)筛选 2个月后 ,得到稳定表达胰岛素的细胞株 ,同时用放射免疫和免疫组织化学的方法监测细胞内外胰岛素的表达水平。结果 成功地对胰岛...
您现在查看是摘要介绍页，详见CAJ附件(119kb)。