FLT3配基基因在人骨髓基质细胞中的表达
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军事医学科学院基础医学研究所 100850北京 刘元林；张毅；朱馥丽；唐佩弦；毛宁
FLT3配基|骨髓基质细胞|基因表达
参见附件(37kb)。
军事医学科学院基础医学研究所 100850北京 刘元林；张毅；朱馥丽；唐佩弦；毛宁
关键词：FLT3配基；骨髓基质细胞；基因表达
摘要：目的 构建人FLT3配基 (FL)逆转录病毒载体 ,并观察其在人骨髓基质细胞中的表达。方法 用基因重组技术 ,将FLcDNA插入逆转录病毒载体pLXIN ,获得重组载体pLFIN。采用脂质体法将重组质粒pLFIN转染包装细胞PA317,G418筛选抗性克隆 ,用抗性克隆上清液感染人骨髓基质细胞 ,RT PCR和基因组DNA PCR检测外源基因mRNA的转录及染色体的整合 ,ELISA法和小鼠CFU GM集落形成法检测FL蛋白表达量和生物学活性。结果 酶切鉴定表明成功构建重组逆转录病毒载体pLFIN ;染色体基因组中整合有外源基因FL和Neo;在mRNA和蛋白质水平均可检测到FL表达 ;2 4hFL蛋白表达量为 4.3 ...
军事医学科学院基础医学研究所 100850北京 刘元林；张毅；朱馥丽；唐佩弦；毛宁
关键词：FLT3配基；骨髓基质细胞；基因表达
摘要：目的 构建人FLT3配基 (FL)逆转录病毒载体 ,并观察其在人骨髓基质细胞中的表达。方法 用基因重组技术 ,将FLcDNA插入逆转录病毒载体pLXIN ,获得重组载体pLFIN。采用脂质体法将重组质粒pLFIN转染包装细胞PA317,G418筛选抗性克隆 ,用抗性克隆上清液感染人骨髓基质细胞 ,RT PCR和基因组DNA PCR检测外源基因mRNA的转录及染色体的整合 ,ELISA法和小鼠CFU GM集落形成法检测FL蛋白表达量和生物学活性。结果 酶切鉴定表明成功构建重组逆转录病毒载体pLFIN ;染色体基因组中整合有外源基因FL和Neo;在mRNA和蛋白质水平均可检测到FL表达 ;2 4hFL蛋白表达量为 4.3 ...
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