抗CD4人-鼠嵌合抗体的表达和抗增殖效应
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华中科技大学同济医学院免疫学系 430030武汉 朱志刚；沈关心；朱慧芬；张悦；邵静芳；杨敬
抗CD4单克隆抗体|嵌合抗体|增殖抑制
参见附件(63kb)。
华中科技大学同济医学院免疫学系 430030武汉 朱志刚；沈关心；朱慧芬；张悦；邵静芳；杨敬
关键词：抗CD4单克隆抗体；嵌合抗体；增殖抑制
摘要：目的 制备抗CD4人 鼠嵌合抗体。方法 从分泌抗CD4单克隆抗体的杂交瘤细胞中提取总RNA ,通过RT PCR扩增出VH 和VL 的DNA片段 ,对VH 和VL 进行DNA序列测定和分析 ,证实VH 和VL 具有小鼠Ig可变区完整的结构功能后 ,将VH 亚克隆至重链表达载体pγ1 Expr,VL 亚克隆至轻链表达载体pκ Expr,转化XL2 Blue细菌 ,通过菌落或质粒PCR筛选阳性克隆。通过电转染将VH pγ1、VL pκ共转染至小鼠骨髓瘤细胞X6 3Ag8.6 5 3,通过G418筛选、ELISA和免疫荧光鉴定。结果 得到分泌抗CD4人 鼠嵌合抗体的阳性转染瘤细胞克隆。所得到的嵌合抗体在体外对PHA和IL 2诱导的PBMC...
华中科技大学同济医学院免疫学系 430030武汉 朱志刚；沈关心；朱慧芬；张悦；邵静芳；杨敬
关键词：抗CD4单克隆抗体；嵌合抗体；增殖抑制
摘要：目的 制备抗CD4人 鼠嵌合抗体。方法 从分泌抗CD4单克隆抗体的杂交瘤细胞中提取总RNA ,通过RT PCR扩增出VH 和VL 的DNA片段 ,对VH 和VL 进行DNA序列测定和分析 ,证实VH 和VL 具有小鼠Ig可变区完整的结构功能后 ,将VH 亚克隆至重链表达载体pγ1 Expr,VL 亚克隆至轻链表达载体pκ Expr,转化XL2 Blue细菌 ,通过菌落或质粒PCR筛选阳性克隆。通过电转染将VH pγ1、VL pκ共转染至小鼠骨髓瘤细胞X6 3Ag8.6 5 3,通过G418筛选、ELISA和免疫荧光鉴定。结果 得到分泌抗CD4人 鼠嵌合抗体的阳性转染瘤细胞克隆。所得到的嵌合抗体在体外对PHA和IL 2诱导的PBMC...
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