食管癌相关基因1编码蛋白的相互作用蛋白筛选
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中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所肿瘤医院病因室 100021北京；天津医科大学附属肿瘤医院 王剑波；
食管癌相关基因1|蛋白-蛋白相互作用|酵母双杂交系统
参见附件(37kb)。
中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所肿瘤医院病因室 100021北京；天津医科大学附属肿瘤医院 王剑波；范宇；郭黎萍；陆士新
关键词：食管癌相关基因1；蛋白-蛋白相互作用；酵母双杂交系统
摘要：目的 筛选与食管癌相关基因 1(ECRG 1)编码蛋白相互作用的蛋白 ,为其功能研究奠定基础。方法 将编码ECRG 1羧基端 378个氨基酸的DNA序列插入到pGBKT7 DNA BD载体 ,与编码Gal4DNA结合结构域的DNA序列拼接做融合基因 ,将此重组质粒与已克隆到pACT2载体上的人肝脏cDNA文库 (与编码Gal4激活结构域的DNA序列融合 )共转化酵母细胞AH10 9。ECRG 1与相应的人肝脏cDNA片段编码的蛋白发生相互作用后 ,可激活报告基因的表达。排除假阳性后 ,阳性克隆中的文库cDNA进行测序分析。同源性检索搜寻GenBank中与之相同或相似的序列。结果 共转化得到约 3× 10 6个转化...
中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所肿瘤医院病因室 100021北京；天津医科大学附属肿瘤医院 王剑波；范宇；郭黎萍；陆士新
关键词：食管癌相关基因1；蛋白-蛋白相互作用；酵母双杂交系统
摘要：目的 筛选与食管癌相关基因 1(ECRG 1)编码蛋白相互作用的蛋白 ,为其功能研究奠定基础。方法 将编码ECRG 1羧基端 378个氨基酸的DNA序列插入到pGBKT7 DNA BD载体 ,与编码Gal4DNA结合结构域的DNA序列拼接做融合基因 ,将此重组质粒与已克隆到pACT2载体上的人肝脏cDNA文库 (与编码Gal4激活结构域的DNA序列融合 )共转化酵母细胞AH10 9。ECRG 1与相应的人肝脏cDNA片段编码的蛋白发生相互作用后 ,可激活报告基因的表达。排除假阳性后 ,阳性克隆中的文库cDNA进行测序分析。同源性检索搜寻GenBank中与之相同或相似的序列。结果 共转化得到约 3× 10 6个转化...
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