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编号:10200253
可溶性肝抗原的克隆、表达及初步临床应用
http://www.100md.com 第二军医大学附属长征医院全军临床免疫中心 范列英;仲人前;王皓;朱烨;娄加陶;侯小菁;孔宪涛
可溶性肝抗原|基因克隆|融合表达|自身免疫性肝炎
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     第二军医大学附属长征医院全军临床免疫中心 范列英;仲人前;王皓;朱烨;娄加陶;侯小菁;孔宪涛

    关键词:可溶性肝抗原;基因克隆;融合表达;自身免疫性肝炎

    摘要:为克隆、表达可溶性肝抗原 (SLA ) ,本文采用RT PCR技术从人肝组织基因中扩增SLA全长cDNA ,经双酶切插入载体PQE 30并在大肠杆菌M15中表达。对表达载体PQE 30 /SLA中的SLA进行序列分析 ,表达产物用SDS PAGE、免疫印迹方法鉴定并初步临床应用。结果显示SLAcDNA序列与报道一致 ,表达产物在相对分子质量略大于 4 7× 10 4处有一条明显的蛋白带 ,该蛋白带能特异性与抗SLA阳性血清反应。表明构建的表达载体PQE 30 /SLA能表达具有抗原活性的可溶性肝抗原。以SLA融合蛋白为抗原检测 18例临床诊断为自身免疫肝炎患者 ,4例SLA抗体阳性。重组SLA融合蛋白的制备为...

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